4. Методы исследования экологического состояния почв.
Пробоподготовка.Методы этой группы включают выделение, очистку и предварительное разделение органических веществ на составляющие компоненты.
Центрифугирование — один из распространенных методов разделения смесей, состоящих из компонентов с разной плотностью, массой и размерами частиц; оно эффективнее фильтрования и отстаивания — методов менее чистых и значительно более длительных. Центрифугирование позволяет разделять вещества, забивающие поры фильтра или портящиеся от соприкосновения с ним.
Электрофорез — метод разделения смесей, основанный на разной подвижности компонентов в электрическом поле. Он обладает высокой разрешающей способностью и применяется как в аналитических, так и в препаративных целях.
Высаливание— общедоступный метод для препаративного фракционирования гуминовых кислот.
Методы анализа.Эта группа методов охватывает способы изучения содержания, состава, свойств и строения органического вещества почв.
Спектроскопические методы. Спектры поглощения гумусовых веществ в ультрафиолетовой и видимой частях спектра применяют:
1) для сравнительной характеристики гумусовых веществ различного происхождения;
2) как метод изучения свойств и строения гуминовых кислот и фульвокислот при различных антропогенных нагрузках;
3) для быстрого количественного определения содержания гумусовых кислот в почвах;
4) для количественного определения некоторых компонентов, обнаруживаемых в щелочных и спиртобензольных экстрактах (пигмент Pg*, хлорофилл, некоторые химические загрязняющие вещества);
5) для контроля за растворимостью гуминовых кислот и фульвокислот, условиями их осаждения, образования соединений с катионами металлов.
Электрохимические методы анализа.Для анализа органического вещества почв используют полярографию. При использовании этого метода не происходит физического разделения смеси на отдельные компоненты. В качестве катода чаще всего применяют ртутный капающий электрод, поверхность которого непрерывно обновляется, что позволяет получать полярограммы и проводить анализ с высокой воспроизводимостью результатов.
Прямое определение возможно лишь при наличии веществ, способных восстанавливаться на катоде. Это ионы металлов, органические соединения, содержащие галогены, нитро-, нитрозогруппы, карбонильные соединения, пероксиды, эпоксиды, дисульфиды. Возможности полярографического метода ограничены, однако при определении полярографических активных соединений достигается высокая селективность определения без предварительного разделения сложных смесей на отдельные компоненты.
Хроматографические методыпозволяют непосредственно или после предварительной химической деструкции и трансформации определить качественный состав и количественное содержание многих специфических и неспецифических составляющих почвенного гумуса, идентифицировать органические химические загрязняющие вещества.
Термические методы используют для изучения структурных особенностей гуминовых веществ, их изменений под влиянием антропогенных факторов, продуктов взаимодействия гуминовых веществ и химических загрязняющих веществ.
Электронномикроскопическое исследование гуминовых кислот и продуктов их взаимодействия с тяжелыми металлами применяют для оценки формы и размеров молекул, однако при подготовке препаратов к анализу в результате высушивания проб образуются, как правило, надмолекулярные структуры — ассоциаты округлой формы, что существенно ограничивает возможности метода.
Необходимо отметить, что использование всех вышеперечисленных методов при исследовании органических веществ почв, продуктов их взаимодействия с химическими загрязняющими веществами в почвах требует тщательной стандартизации условий эксперимента с предварительным установлением оптимальных параметров работы прибора и перевода органических веществ в стандартное состояние. Только в этом случае можно получить надежные и воспроизводимые результаты. Стандартизации требуют не только методы анализа и извлечения органических веществ из почв, но и способы отбора образцов, общие методологические подходы при решении задач изучения почвенного гумуса при антропогенных нагрузках.