Методы обнаружения и исследования простейших. Толстая капля крови.

С целью обнаружения гемопаразитов микроскопируют с иммерсионным маслом под большим увеличением мазок и толстую каплю крови.

Толстую каплю крови в отличие от мазка крови не фиксируют. Под влиянием водного раствора краски нефиксированные эритроциты гемолизируются, препарат становится прозрачным. Это ускоряет и облегчает нахождение паразитов, так как в одном поле зрения можно исследовать гораздо больший объем крови, чем в мазке.

Если же толстая капля будет зафиксирована, то гемолиза эритроцитов не произойдет, они будут наслаиваться друг на друга и препарат окажется непригодным для микроскопии.

Слой крови в толстой капле не должен быть очень толстым, иначе после высушивания она трескается и может отпасть. Нормальной считается толстая капля, через которую после высушивания слабо просвечивает крупный печатный текст, а при микроскопии в одном поле зрения насчитывается в среднем 10-15 ядер лейкоцитов.

Алгоритм приготовления толстой капли крови

1. Несколько чистых предметных стекол положить на стол

2. Ватой, смоченной 70% этанолом, протереть концевую фалангу IV пальца левой руки пациента

3. После высыхания этанола проколоть кожу пальца с ладонной стороны копьем, ставя плоскость копья поперечно к линиям кожного рисунка.

4. Выступившую первую каплю крови снять сухой ватой.

5. Нажимая на боковые поверхности пальца по направлению к месту прокола (палец пациента при этом держат опущенным) выдавить крупную каплю крови.

6. Предметным стеклом, держа его за боковые ребра, прикоснуться и снять выступившую каплю крови, которую располагают отступя на 2-2,5 см от узкого края стекла.

7. Круговыми движениями стекла размазать каплю, доводя ее размер до 1,5 см в диаметре.

8. Точно так же приготовить толстую каплю на другой половине стекла. Расстояние между каплями должно быть не менее 2 см.

9. В промежутке между каплями нанести на стекло полоску крови, на которой после высушивания написать простым карандашом номер по списку или фамилию пациента. Делать подобную надпись на поверхности толстой капли недопустимо, так как это портит препарат и затруднит микроскопическое исследование.

10. Стекла в горизонтальном положении положить на стол (в кювету) для просушивания, предохраняя от попадания прямых солнечных лучей, пыли и мух.

11. Ранку на пальце обработать ватой, смоченной этанолом.

Возможные диагностические ошибки:

1. На плазмодии похожи тромбоциты, лежащие на эритроците или остатке ретикулоцита. Они отличаются цветом: тромбоциты окрашиваются в розовый с более яркой зернистостью в центре, а плазмодии в голубой (ядра красные).

2. За плазмодии можно принять грибы, водоросли, жгутиконосцы, частицы красителя, лежащие на эритроцитах.

3. Царапины на стекле.

Дополнительные методы диагностики: серодиагностика, непрямая иммунофлюоресценция — играют второстепенную роль из-за недостаточной специфичности результатов, сложности оборудования и необходимости обучения персонала.

Профилактика: выявление и лечение людей — источников инфекции. Приказ Минздрава СССР от 23 сентября 1976 г. №930 «Об улучшении работы по выявлению больных малярией и паразитоносителей». Для раннего выявления больных необходимо обследование на малярию:

1. При заболеваниях с высокой температурой, если человек приехал из тропиков (в течение 2 лет)

2. Заболеваниях с продолжающимися периодическими подъемами температуры

3. Любом заболевании с неустановленным диагнозом, в течение первых 5 суток, сопровождающимся повышением температуры

4. Повышении температуры, развившимся в течение 3 мес после переливания крови.

5. Любом заболевании, сопровождающимся повышением температуры у лиц, болевших малярией за последние два года

6. Увеличении печени и(или) селезенки, анемии неясной этиологии.