Задача:

КАМПИЛОБАКТЕР Спор и капсул не образуют. Подвижны, совершают характерное быстрое винтовое движение с помощью одиночных жгутиков, расположенных на одном или обоих концах клетки. Микроскопическое исследование тонкого мазка, окрашенного 1% раствором фуксина в течение 10-30сек., позволяет быстро обнаружить спиралевидные или S-образные бактерии. Типичные формы чаще обнаруживают при окраске кристаллическим фиолетовым. Также можно применять фазово-контрастную микроскопию суспензии испражнений в жидкой среде (нативные препараты). Основным методом является бактериологическое исследование – выделение чистой культуры возбудителя и ее идентификация. Кампилобактеры плохо переносят транспортировку - их следует помещать в консервант, например, тиогликолевый бульон (рН 8,5) или щелочную пептонную воду, и хранить при температуре 4⁰С. Материал засевают на элективные питательные среды (например, среду Бутлера). Серодиагностика. Для идентификации Аг бактерий применяют РА с обработанной формалином культурой (через 10 суток после инфицирования титр Ат составляет 1:8 – 1:32) или РСК (видоспецифическая реакция, требующая соответствующего Аг).В России разработаны диагностикумы для выделения Ат в реакции РНГА, применяемые для распознавания кампилобактериозов животных и человека.За рубежом разработаны коммерческие реагенты для выявления Ат в РИФ или реакции иммунной сорбции Ат, меченных ферментами (ИФА), иммунный блотинг,

Билет14 Органы иммунитета и иммунокомпетентные клетки. Процесс

антителообразования. Органы иммунной системы - анатомические образования, участвующие в формировании иммунной готовности организма нейтрализовать чужеродные структуры и вещества.Костный мозг, тимус, селезенка, лимфоузлы, пейеровы бляшки кишечника, миндалины и червеобразный отросток являются образованиями, в которых непрерывно образуются и созревают клетки, способные осуществлять "иммунный надзор" в человеческом теле. Эти иммунные органы и ткани непрерывно обмениваются между собой метками и молекулами, создавая достаточный уровень антител в каждой ткани. Активность органов иммунной системы регулируется автономной нервной системой и гуморальными веществами. Иммунокомпетентные клетки - клетки, способные специфически распознавать антиген и отвечать на него иммунной реакцией. Такими клетками являются Т- и В-лимфоциты (тимусзависимые и костномозговые лимфоциты), которые под влиянием чужеродных агентов дифференцируются в сенсибилизированный лимфоцит и плазматическую клетку.Т-лимфоциты – это сложная по составу группа клеток, которая происходит от полипотентной стволовой клетки костного мозга, а созревает и дифференцируется в тимусе из предшественников. .B-лимфоциты – преимущественно эффекторные иммунокомпетентные клетки. Зрелые В-лимфоциты и их потомки – плазматические клетки являются антителопродуцентами. Их основными продуктами являются иммуноглобулины. В-лимфоциты участвуют в формировании гуморального иммунитета, Макрофаги - клетки соединительной ткани, способные к активному захвату и перевариванию бактерий, остатков клеток и других чужеродных для организма частиц. Основная функция макрофагов сводится к борьбе с теми бактериями, вирусами и простейшими Антителообразование: первичный и вторичный от­вет.  Способность к образованию ан­тител появляется во внутриутробном периоде у 20-недельного эмбриона; после рождения начинается собственная продукция иммуноглобулинов, которая увеличивается до наступления зре­лого возраста и несколько снижается к старости. Динамика об­разования антител имеет различный характер в зависимости от силы антигенного воздействия (дозы антигена), частоты воздействия антигена, состояния организма и его иммунной системы. При первичном и повторном введении антигена динамика антителообразования также различна и протекает в несколько ста­дий. Выделяют латентную, логарифмическую, стацио­нарную фазу и фазу снижения. В латентной фазе происходят переработка и представление антигена иммунокомпетентным клеткам, размножение клона клеток, специализированного на выработку антител к данному антигену, начинается синтез ан­тител. В этот период антитела в крови не обнаруживаются.  Во время логарифмической фазы синтезированные антитела высво­бождаются из плазмоцитов и поступают в лимфу и кровь.  В ста­ционарной фазе количество антител достигает максимума и ста­билизируется, затем наступает фаза снижения уровня антител. При первичном введении антигена (первичный иммунный ответ) латентная фаза составляет 3—5 сут, логарифмическая — 7— 15 сут, стационарная — 15—30 сут и фаза снижения — 1—6 мес. и более.Особенностью первичного иммунного ответа является то, что первоначально синтезируется IgM, а затем IgG. В отличие от первичного иммунного ответа при вторичном введении антигена (вторичный  иммунный ответ) латентный период укорочен до нескольких часов или 1—2 сут, логарифми­ческая фаза характеризуется быстрым нарастанием и значитель­но более высоким уровнем антител, который в последующих фазах длительно удерживается и медленно, иногда в течение не­скольких лет, снижается. При вторичном иммунном ответе в отличие от первичного синтезируются главным образом IgG. Такое различие динамики антителообразования при первич­ном и вторичном иммунном ответе объясняется тем, что после первичного введения антигена в иммунной системе формирует­ся клон лимфоцитов, несущих иммунологическую память о данном антигене. Очень быстрое и энергичное антителообразование при повтор­ной встрече с антигеном используется в практических целях при необходимости получения высоких титров антител при производстве диагностических и лечебных сывороток от иммунизиро­ванных животных, а также для экстренного создания иммуни­тета при вакцинации. ЗАДАЧА: хеликобактер

3Для иммунодиагностики хеликобактериозов используют биоптаты слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки для цитологических и бактериологических исследований и кровь. В настоящее время разработаны тест-системы для определения Агхеликобактеров в биоптатах с помощью ИФА, а также в сыворотке в РСК. В крови определяют JgM, JgA, JgG – антитела с помощью ИФА, в ПЦР – гены бактерий. биоптаты слизистой желудка и двенадцатиперстной кишки. Бактерии распознают по типичным морфологическим особенностям. Для выявления возбудителя в материале обычно применяют фазово-контрастную микроскопию, определяющую характерную подвижность. Хеликобактеры хорошо видны в гистологических препаратах, окрашенных гематоксилин-эозином или импрегнированных серебром по Уортину-Старри. Хорошие результаты дает люминесцентная микроскопия мазков, окрашенных акридиновым оранжевым. В последние годы широко распространены методы косвенного обнаружения H.pylori в биоптатах; чаще всего используют определение уреазной активности (кло-тест); используют такой тест, как обнаружение продуктов распада мочевины в выдыхаемом воздухе. Для получения чистых культур применяют кровяные среды (5-17% эритроцитов), дополненные антибиотиками (цефсулодин). На 5-7 сутки культивирование при 37⁰С наблюдают видимый рост. Принадлежность культур к хеликобактерам определяют по характерной морфологии микроорганизмов и колоний; «винтообразной» подвижности; способности к росту в микроаэрофильных условиях и отсутствию роста в аэробных и анаэробных условиях и при температуре 25⁰С и 42⁰С. Из биохимических свойств наиболее часто определяют оксидазную, каталазную и уреазную активности

БИЛЕТ15 Понятие о стерилизации Стерилизация(обеспложивание) – полное уничтожение патогенных и сапрофитных форм микроорганизмов в материалах. .Способы и виды стерилизации. Фламбирование - стерилизация в пламени горелки; применяют при стерилизации бактериальных петель, шпателей, пинцетов, игл, пипеток, предметных и покровных стёкол.Стерилизация кипячением - проводится в стерилизаторах и используется для обработки металлических инструментов, стеклянной и металлической посуды, резиновых изделий (перчатки, пробки). При кипячении рекомендуется добавлять к воде 1-2% раствор гидрокарбоната натрия, что повышает стерилизующее действие кипящей воды и предохраняет металлические предметы от ржавчины.3. Стерилизация сухим жаром - проводится в суховоздушных (сухожаровых) шкафах. Так стерилизуют стеклянную посуду (пробирки, колбы, чашки Петри, пипетки и др.). Продолжительность стерилизации при 160 ⁰С-150 мин; при 180⁰ С-60 мин.4.Стерилизация текучим паром- осуществляется в текучепаровом аппарате Коха или в автоклаве при открытом кране и проводится в тех случаях, когда стерилизуемый объект изменяет свои свойства при температуре свыше 100⁰ С. Так стерилизуют питательные среды, содержащие аммиачные соли, молоко, углеводы, картофель, кровь. сыворотку и др. Стерилизуют при 100⁰ С 3 дня подряд по 30 мин. 5. Тиндализация - дробная стерилизация, при которой жидкость выдерживают 5-6 дней при 56-60 ⁰С с инкубацией её в промежутках между сеансами в термостате. Проводится на водяной бане..Стерилизация паром под давлением - обеспечивает уничтожение вегетативных и споровых форм бактерий при однократной обработке материала. Её проводят в автоклавах при давлении в 1,1 атм-120⁰ С в теч 45 мин.; при давлении в 2,0 атм-132⁰ С в теч 20 мин. В автоклаве нельзя стерилизовать пластмассовые изделия и питательные среды, содержащие нативный белок. 7. Стерилизация ультразвуком - осуществляется с помощью ультразвуковых установок. Так стерилизуют одноразовый инструментарий, пластмассовые изделия, молоко, соки (для детского питания).8. Пастеризация - способ обезвреживания органических жидкостей путём их нагревания до температуры ниже 100⁰ С, когда гибнут лишь вегетативные формы микробов. Используют для консервирования молока, сливок, соков, желе и др. продуктов в теч. 20-30 мин при 65 ⁰С. В баклабораториях её применяют для стерилизации белковых питательных сред при температуре 55-65⁰ С в теч. 60 или 30 мин 2-3 дня подряд. Проводится на водяной бане.Стерилизация лучевая (холодная) - при помощи установок с радиоактивными источниками излучения (с кобальтом, цезием).Так стерилизуют поливитамины, антибиотики, гормоны, ферменты, кетгут, вату, марлю, одноразовый инструментарий и чашки Петри, трансплантанты. . Фильтрация - осуществляется при помощи бактериальных фильтров.Фильтрование используют для стерилизации питательных сред содержащих белок, для отделения бактерий и вирусов, фагов, экзотоксинов. ЗАДАЧА: Клебсиелла 5. Методы лабораторной диагностики: 1. Бактериологический – основной 2. Серологический 3. Микроскопический 4. ПЦР- диагностика 6. Тесты идентификации клебсиелл: это 3этап 1. Проверяютоднородность выделенной культуры в мазке по Граму. 2. Проводят первичную идентификацию чистой культуры по характеру её роста на среде Клиглера (Ресселя, Олькеницкого). 3. Проба на оксидазу. 4. Посев на короткий «пестрый» ряд Гисса и СПБ с двумя индикаторными бумажками (на индол и сероводород) → 37^оС 24 часа. 5. Посев на среду Симмонса → 37^оС 24 часа. 6. Посев в столбик полужидкого агара → 37^оС 24 часа. 7. РА на стекле с агглютинирующими видовыми О- и К – сыворотками клебсиеллам, т.е. серологическая идентификация. 8. Проба на чувствительность к антибиотикам: посев на АГВ→ 37^оС 24 часа. I этап: 1. Мазок из материала по Граму предварительный ответ. 2. Посев на чашки Петри с СПА, Эндо, Плоскирева, Левина, ВСА 37⁰С 24 часа. 3. Посев на глюкозный бульон (среда накопления) 37⁰С 24 часа. Примечание: с материалом проводят феномен «набухания капсул» по Нейфельду со специфическими антисыворотками. II этап: 1. Отбирают типичную колонию, с 1/3 ее делают мазок по Граму. 2. Вторую треть колонии пересевают на одну из сред первичной идентификации: Клиглера, Ресселя, Олькеницкого37⁰С 24 часа. 3. Оставшуюся треть – пересевают на скошенный СПА 37⁰С 24 часа (для выделения и накопления чистой культуры и ее серологической идентификации). IV этап: 1. Учет всех результатов. 2. Ответ: «Выделены K.pneumoniae К 11, чувствительные к…..».

БИЛЕТ16 ФЕРМЕНТЫ, ИХ РОЛЬ Микроорганизмы синтезируют разнообразные ферменты. Ферментный состав любого микроорганизма является достаточно стабильным признаком, что широко применяется для их идентификации. Вместе с тем ряд ферментов способствует проявлению патогенных свойств у возбудителей некоторых инфекционных заболеваний. Поскольку субстратом их действия являются вещества, входящие в состав клеток и тканей организма человека. Например, гиалуронидаза расщепляет межклеточное вещество соединительной ткани (гиалуроновую кислоту) и тем самым способствует поражению соединительной ткани и распространению возбудителя в макроорганизме. Характерным свойством ферментов является специфичность их действия, т.е. каждый фермент реагирует с определенным химическим соединением или катализирует одну или несколько близких химических реакций. Например, фермент лактаза расщепляет лактозу. Классификация ферментов: экзоферменты- Выделяются во внешнюю среду; расщепляют в окружающей среде макромолекулы до более простых соединений, которые затем транспортируются в микробную клетку. Эндоферменты - Это внутриклеточные ферменты, которые обеспечивают протекание метаболических реакций в определенной последовательности. ФЕРМЕНТАТИВНЫЕ СВОЙСТВА МИКРООРГАНИЗМОВ Сахаролитическая активность т.е. способность расщеплять сахара и многоатомные спирты с образованием кислоты и газа, изучают на средах Гисса, которые содержат тот или иной углевод и индикатор. Под действием образующейся при расщеплении углевода кислоты индикатор меняет окраску среды. Поэтому эти среды названы «пестрый ряд». Микробы, не ферментирующее данный углевод, растут на среде не измененяя ее. Протеолитическая активность т.е. способность расщеплять белки, полипептиды) изучают на средах с желатином, молоком, сывороткой, пептоном. При росте на желатиновой среде микробов, ферментирующих желатин, среда разжижается. Характер разжижения различен. При расщеплении пептидогликанов выделяется индол, сероводород, аммиак. Их образование устанавливают с помощью индикаторных бумажек, Аммиак вызывает посинение бумажки. Сероводород – почернение бумажки. Индол – покраснение бумажки Гемолитические свойства т.е. способность разрушать эритроциты) – изучают на средах с кровью. Жидкие среды становятся прозрачными, а на плотных средах вокруг колонии появляется прозрачная зона, а α-гемолитические стрептококки образуют небольшую зеленоватую зону, что свидетельствует о переходе гемоглобина в метгемоглобин. ЗАДАЧА: 1 образует индол и сероводород I этап Первичные посевы материала проводят так же, как при выделении ЭПЭ. Специальных посевов для выделения протеев не делают, если они есть, то вырастут на всех 6 чашках. II этап 1.Отбирают по культуральным признакам типичную для протеев колонию и ½ часть ее пересевают на среду Клиглера, или Ресселя, или Олькеницкого) → 37^оС 24 часа. 2.Вторую часть колонии пересевают на скошенный СПА → 37^оС 24 часа. III этап 1.Проверяют однородность выделенной культуры в мазке по Граму 2.Проводят первичную идентификацию чистой культуры по характеру её роста на среде Клиглера (Ресселя, Олькеницкого). 3.Проба на оксидазу. 4.Посев на короткий «пестрый» ряд Гисса и СПБ с двумя индикаторными бумажками (на индол и сероводород) → 37^оС 24 часа. 5.Посев на среду Симмонса → 37^оС 24 часа 6.Посев в столбик полужидкого агара → 37^оС 24 часа 7. РА на стекле с видовыми протейными сыворотками и чистой культурой, т.е. серологическая идентификация. 8.Проба на чувствительность к антибиотикам. IV этап 1.Учет всех результатов. 2.Выдача ответа: « ВыделенPr.vulgaris ….»

БИЛЕТ17 Аллергия - одна из форм иммунного ответа, заключающаяся в формировании гиперчувствительности животного организма, включая человека, к веществам различного состава и происхождения.выделяют 2 группы аллергенов:аллергены внешней среды (экзоаллергены)аллергены, образующиеся в самом организме (эндоаллергены).Классификация аллергий: 1.Аллергия лекарственная - аллергические заболевания и реакции, возникающие в ответ на лекарства. 2.Пищевая аллергияПищевая аллергия особенно часто встречается в первые годы жизни и этиологически связана с разнообразными пищевыми аллергенами животного или растительного происхождения.3. Респираторная аллергияЛюбой отдел дыхательных путей может стать плацдармом (шоковым органом) для возникновения аллергических реакций, в результате чего развиваются различные нозологические формы респираторных аллергозов. Чаще всего они связаны с воздействием экзогенных аллергенов неинфекционной природы. Среди них ведущая роль принадлежит бытовым (домашняя пыль).Типы аллергических реакцийВ патогенезе аллергических болезней могут участвовать аллергические реакции разных типов. По современной классификации выделяют 4 типа аллергических реакций.1тип (анафилактический, реагиновый, немедленный) связан с формированием антител-реагинов, ассоциирующихся с наличием IgE.2тип (цитотоксический, цитолитический) протекает с участием IgE и IgM, которые тесно связываются с клеточными мембранами. Последующее взаимодействие антитела с аллергеном приводит к разрушению клеток. Этот тип реакции характерен для иммунных форм заболеваний крови.III тип аллергической реакции (иммунокомплексный, полузамедленный), как и первые два, являетсягуморальным и связан, главным образом, с формированием преципитирующих антител, относящихся к IgG. В процессе реакции формируются иммунные комплексы, повреждающие сосуды.IVтипаллергической реакции (клеточный, замедленный) связан с образованиемсенсибилизированных лимфоцитов, избирательно и специфично повреждающих ткани, подобноантителам. Этот тип реакции более свойствен инфекционной аллергии. Различные аллергические заболевания могут протекать с участием того или иного типа аллергической реакции. ЗАДАЧА: ПСЕВДОМАНАДА Большинство штаммов образует растворимый в воде пигмент пиоцианин, цвет которого зависит от рН среды – сине-зеленый в нейтральной или щелочной среде и красный – в кислой. Некоторые штаммы образуют меланиновый пигмент (черный, коричнево-черный, красно-коричневый). На СПА – колонии круглые, плоские, слизистые, пигментированные , окрашивается и среда, ароматный сладковатый запах ( «жасмина» ). В СПБ – муть и осадок, бульон окрашивается в цвет пигмента, запах «жасмина». Тесты идентификации P.aeruginosa: 1) Проверяют однородность чистой культуры, т.е. делают мазок со скошенного СПА, окрашивают по Граму и микроскопируют. 2) Посев на короткий «пестрый» ряд Гисса и СПБ с двумя индикаторными бумажками → 37^оС 24 часа. (Гл+; индол-, Н₂О+ (слабо), разжижает желатин и молоко) 3) Проба на оксидазу (+). 4) Проба для обнаружения пиоцианина: подщелоченную культуру обрабатывают хлороформом, при наличии синегнойной палочки среда окрашивается в синий цвет 5) Проба на чувствительность к антибиотикам (посев на АГВ→ 37^оС 24 часа).

БИЛЕТ18 Морфология, ультраструктура, размеры вирусных частиц Вирусы относят к царству Vira. Это мельчайшие микроорганизмы, не имеющие клеточного строения, белоксинтезирующей системы, содержащие только один тип нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК). Сформированная вирусная частица называется вирионом. Морфологию и структуру вирусов изучают с помощью электронного микроскопа, т.к. их размеры малы и сравнимы с толщиной оболочки бактерий. Форма вирионов может быть различной: палочковидной (вирус табачной мозаики), пулевидной (вирус бешенства), сферической (вирусы полиомиелита, ВИЧ), в виде сперматозоида (многие бактериофаги-вирусы бактерий). Размеры вирусов определяют с помощью электронной микроскопии, методов ультрафильтрации через фильтры с известным диаметром пор, методом ультрацентри-фугирования. Размеры вирионов различных вирусов варьируют в широких пределах: от 15-18 до 300-400нм. оэтому их принято делить на три группы: 1. крупные - имеют размеры в пределах 200-400 нм (вирусы натуральной оспы); 2. средние - 70-120 нм (вирусы гриппа, бешенства); 3. мелкие - величина не превышает 22-28 нм (вирусы полиомиелита. Простой вирион состоит из нуклеиновой кислоты - нуклеоид, плотно упакованной в белковую оболочку - капсид, который состоит из повторяющихся морфологических субъединиц - капсомеров. Нуклеиновая кислота и белковая оболочка вместе называются нуклеокапсид. Таким образом, простой вирион по морфологической структуре является нуклеокапсидом. Сложно устроенные вирионы в отличие от простых, кроме указанных структур, имеют еще внешнюю оболочку, которая окружает капсид и называется суперкапсид. Эта дополнительная липопротеидная оболочка - производное мембранных структур клетки-хозяина, в которой паразитирует вирус. Биологические особенности вирусов, методы их культивирования. Однако у вирусов обнаружено свыше 10 ферментов, разных по своему происхождению и функциональному назначению.По происхождению вирусные ферменты делятся на три группы:1. вирионные- входят в состав вирионов;2. вирусиндуцированные - ферменты, структура которых закодирована в геноме вируса, а синтез происходит на рибосомах клетки-хозяина;3. клеточные, модифицированные вирусом - это ферменты клетки-хозяина, которые не являются вирусспецифическими и которые участвуют в репродукции вируса.По функциональному значению вирусные ферменты можно подразделить на 2 группы:1) ферменты, участвующие в процессе репликации и транскрипции вирусной нуклеиновой кислоты;2) ферменты, способствующие проникновению вирусной НК в клетку-хозяина и выходу образовавшихся вирионов. Известны три типа взаимодействия вируса с клеткой:1) продуктивный тип, завершающийся образованием вирусного потомства;2) абортивный тип, не завершающийся образованием новых вирусных частиц, поскольку инфекционный процесс прерывается на одном из этапов;3) интегративный тип(или вирогения), характеризующийся встраиванием вирусной ДНК в хромосому клетки-хозяина. Проникновение вируса в клетку: существует два способа проникновения вирусов животных в клетку: виропексиси слияниевирусной оболочки с клеточной мембраной. При виропексисе, после адсорбции вирусов, происходит впячивание участка клеточной мембраны и образование внутриклеточной вакуоли, которая содержит вирусную частицу. Вакуоль с вирусом может транспортироваться в любом направлении в разные участки цитоплазмы или ядро клетки. Процесс слияния осуществляется одним из поверхностных вирусных белков капсидной или суперкапсидной оболочек. «Раздевание» вируса: процесс заключается в удалении защитных вирусных оболочек и освобождении внутреннего компонента вируса, способного вызвать инфекционный процесс. Биосинтез компонентов вируса; проникшая в клетку вирусная нуклеиновая кислота несет генетическую информацию, которая успешно конкурирует с генети-ческой информацией клетки. Формирование (сборка) вирионов: синтезированные вирусные нуклеиновые кислоты и белки обладают способностью специфически узнавать друг друга и при достаточной их концентрации самопроизвольно соединяются в результате гидрофобных, солевых и водородных связей. ЗАДАЧА: БАКТЕРОИДЫ Лабораторная диагностика бактероидозов. Методы: I.Бактериологический - основной. 2.Микроскопический. I этап: I Материал исследуют на наличие анаэробной и аэробной микрофлоры. Посев проводят на следующие питательные среды: 1) для выявления анаэробной флоры → в 2 пробирки мартеновского или пёченочного бульона при чем одну пробирку после посева прогревают при 80°С в течение 20 мин для обнаружения споровых форм); по 1-ой пробирке полужидкой среды № 1, 2,3 2) для аэробной флоры - по одной пробирке сахарного, простого СПБ и скошенного агара. 3) одновременно проводят посев на кровяной агар: 2 чашки на выявление анаэробной флоры (одну чашку помещают в атмосферу природного газа или смеси азота, водорода и углекислого газа, другую - в вакуум); 4) для определения антибиотикограммы посев делают на 2 чашки с кровяным агаром: I чашку помешают в анаэробные, другую - в аэробные условия. Все посевы инкубируют при 37°С. II - этап (2- 3-ий день): 1. Просмотр посевов, приготовление и просмотр препаратов из посевов → предварительный ответ. 2.Учет антибиотикограммы и предварительная информация клинициста. 3.Высев из жидких накопительных сред культур на твердые питательные среды для получения изолированных колоний. III этап (4-5 день): I. Просмотр посевов на чашках с кровяным агаром, культивированные в ных условиях , микроскопия колоний, окраска, по Граму. 2.Выделение чистой культуры на среде Китта-Тароцци или № 1,2,3. IV этап (5-7 пень):1. Изучение однородности выделенной чистой культуры→ мазок по Граму. 2. И «раздавленную каплю» → подвижность. РS: Мазок по Граму → высушивают на воздухе и фиксируют в 96° спирте 10-15 мин. 3. Проба на каталазу (на предметное стекло или на чашку Петри наносят 1 каплю 3% раствора перекиси водорода (Н₂О₂),в которой суспензируют изучаемую культуру.Если в течение 3 мин. не появляются пузырьки газ, считают, что микробы не вырабатывают фермент каталазу). 4. Посев на «пестрый» ряд Гисса и др. ферментативные свойства. Исследуют в системе СИБ или в полужидких средах с углеводами, разлитыми высокими столбиками. 5. Проба на антибиотики - методом диффузии в агар кровяной с применением бумажных дисков, в анаэробных условиях! V этап: 1.Учет свойств выделенной культуры. 2. Выдача ответа (7-10 день).

БИЛЕТ19 ГНТ – повышенная чувствительность организма к аллергенам, обусловленная Ат и медиаторами,аллергические реакции немедленного типа . Клинические появления этих реакций - крапивница , отек Квинке , бронхоспазм , анафилактический шок и другие анафилактические реакции . Эти реакции обычно развиваются в течение 30 мин после введения препарата. Анафилактические реакции вызывают многие препараты, однако чаще всего их причиной бывают пенициллины .Анафилактоидные реакции сходны с анафилактическими, но развиваются без участия иммунных механизмов. Их вызывают рентгеноконтрастные средства ,пшшмиксипы , аспирин , местные анестетики и другие лекарственные средства.ГНТ:1.Реакции возникают в ближайшие 15-20 мин (и раньше) после воздействия специфического аллергена.2.Вызываются аллергенами антигенной и неантигенной природы.3.Реакции чаще всего протекают в органах, богатых кровеносными сосудами, непосредственно в крови, гладкой мускулатуре. 4.Наличие в крови циркулирующих антител JgE.5.Возможен пассивный перенос гиперчувствительности с сывороткой крови сенсибилизированного организма. 6.В большинстве случаев состояние гиперчувствительности к аллергену можно снять путем десенсибилизации.7.Это В-зависимая форма аллергии, при которой сенсибилизация организма после первичного контакта с антигеном (аллергеном) связана с накоплением специфических цитофильных антител JgE. При повторной встрече с тем же антигеном в организме происходит выброс медиаторов типа гистамина, серотонина, ацетилхолина, адреналина, норадреналина, брадикинина.Вследствие выделения больного количества биохимических веществ возникают патофизиологические проявления ГНТ: нарушения деятельности ССС, отек слизистых, кожи, зуд, эритема, спазм гладкой мускулатуры, изменение в крови. -анафилаксия (анафилактический шок) - сывороточная болезнь - атопические реакции (атопии) - феномен Артюса-Сахарова ГЗТ – повышенная чувствительность к аллергенам, обусловленная Т-лимфоцитами – эффекторами и лимфокинами. аллергические реакции замедленного типа : во-первых, это аллергический контактный дерматит - клиническое проявление аллергической реакциизамедленноготипа , развивающейся послеместного применения лекарственныхсредств. Аллергический контактный дерматит может быть вызван не только действующим препаратом, но и содержащимися а нем консервантами.ГЗТ:1.Реакции возникают через 24-48 часов и позже (несколько суток) после контакта с аллергеном. 2.Вызывается после длительного воздействия полноценных (неразрушенных) инфекционных антигенов, химических веществ. 3.Реакции чаще протекают в самых разнообразных тканях при длительном контакте аллергена с кожей. 4.Антитела в крови отсутствуют. 5.Пассивный перенос осуществляется не с сывороткой, а с лейкоцитами, клетками лимфоидных органов. 6.Десенсибилизировать ГЗТ, как правило, не удается. 7.Это Т-зависимая форма аллергии, при которой сенсибилизации организма после повторного контакта с аллергеном (антигеном) связана с пролиферацией клона Т-лимфоцитов, несущих специфические для данного аллергена рецепторы. Эти сенсибилизированные Т-лимфоциты оказывают цитотоксическое действие на клетки-мишени (аллергены), выделяя лимфоцитоксин, усиливают фагоцитоз, защищают фагоциты от повреждения, ингибируют миграцию макрофагов, последние тоже оказывают цитотоксическое действие на клетки-мишени. Вследствие этого развивается воспаление. - инфекционная аллергия - контактная аллергия - аутоаллергические реакции - лекарственная аллергияСывороточная болезнь — аллергическое заболевание, возникающее при парентеральном введении с лечебной или профилактической целью сывороток или их препаратов, содержащих большое количество белка. Атопические реакции (атопии) Атопические реакции возникают в ответ на попадание в организм аллергенов у лиц с повышенной к ним чувствительностью. Предрасположение повышенной чувствительности передается по наследству. Механизм этих реакций состоит также во взаимодействии между аллергеном и антителами, которые образовались при первой встрече организма с данным аллергеном. В зависимости от органа и ткани, на клетках которых происходит фиксация (прикрепление) антител, возникают различные состояния: поражение дыхательных путей – аллергический насморк и бронхиальная астма; поражение слизистой оболочки глаз – конъюнктивит; кожи – крапивница. Кроме того,атопии проявляются в виде непереносимостиопределенных веществ: пищевых, лекарственных, растительных. Атопические состояния не поддаются десенсибилизации и наблюдаются только у человека. Анафилактический шок чаще всего вызывают пенициллин и его производные.Известные причины немедленныхгенерализованных - на пищу; - на лекарственные средства: пенициллины, цефалоспорины; - на пищевые добавки. ЗАДАЧА: Возбудитель чумы – иерсинияпестис I этап 1.Посев испражнений на 6 чашек Петри (как при выделении E.coli)  22С 24-48 часов. 2.Фагодиагностика с чумным и псевдотуберкулезным диагностическими фагами. II этап 1.Отбирают по культуральным свойствам типичную для иерсиний изолированную колонию и ½ часть ее пересевают на одну из сред первичной идентификации энтеробактерий :Клиглера, или Ресселя, или Олькеницкого  22С 24 часа. 2.Оставшуюся часть этой же колонии пересевают на скошенный СПА 22С 24 часа. III этап 1.Проверяют однородность выделенной чистой культуры, т. е. делают мазок и окрашивают по Граму, микроскопируют. 2.Проводят первичную идентификацию выделенной культуры по характеру ее роста на среде Клиглера (или Ресселя, или Олькеницкого). 3.Проба на оксидазу (-). 4.Посев на короткий «пестрый» ряд Гисса и СПБ с 2 индикаторными бумажками на индол и сероводород 22С 24 часа. 5.Посев в 2 столбика полужидкого агара, один посев инкубируют при22С 24 часа (подвижны), а другой – при 37С 24 часа (неподвижны). 6.Посев на среду Симмонса 22С 24 часа (не утилизируют цитрат все три вида иерсиний). 7.Посев на среду с мочевиной 22С 24 часа (+). 8.РА с чистой культурой и чумной агглютинирующей сывороткой ( - ). 9.Фаголизабельность: с чистой культурой повторяют пробу с диагностическими фагами – чумным и псевдотуберкулезным. 10.Проба на чувствительность к антибиотикам - посев на среду АГВ 22С 24 часа. IV этап 1.Учет результатов всех тестов. 2.Выдача окончательного ответа: «Выделена Y. enterocolitica………». В качестве вспомогательного метода применяют серодиагностику.Рнга Бактерии чумы отличаются высокой вирулентностью, проникают даже через неповрежденную кожу, образуют особый токсин, высокоядовитый для мышей, бактериоцины-пестицины. Большинство факторов вирулентности (V-,W-антигены, «мышиный» токсин, Fl, коагулаза протеазы и др.) контролируется генами плазм

БИЛЕТ20 Морфология, химический состав и биологические свойства и структура фагов.Морфология. фагов под электронным микроскопом имеют форму головастика или сперматозоида, некоторые— кубическую и нитевидную форму. Размеры фагов колеблются от 20 до 800 нм у нитевидных фагов.состоят из вытянутой икосаэндрической головки размером 65-100 нм и хвостового отростка длиной более 100 нм. Внутри хвостового отростка имеется полый цилиндрический стержень, сообщающийся с головкой, снаружи – чехол, способный к сокращению наподобие мышцы. Хвостовой отросток заканчивается шестиугольной базальной пластинкой с короткими шипами, от которых отходят нитевидные структуры – фибриллы.Химический состав.Фаги состоят из двух основный химических компонентов - нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК) и белка. У фагов, имеющих форму сперматозоида, двунитчатая ДНК плотно упакована в виде спиралей внутри головки. Белки входят в состав оболочки (капсида), окружающей нуклеиновую кислоту и во все структурные элементы хвостового отростка.Кроме структурных белков, у некоторых фагов обнаружены внутренние белки, связанные с нуклеиновой кислотой, и белки – ферменты, участвующие во взаимодействии фага с клеткой.Свойства фагов:Cпецифичность – это способность фага паразитировать только в определённом виде микроорганизмов. По названию микроба – хозяина именуют фаги с более строгой специфичностью, паразитирующие только на определённых представителях данного вида получили название типовых фагов.Фаги, вызывающие лизис микроорганизмов близких видов, входящих в один род, называются поливалентными.Антигенность – это способность фагов при парантеральном введении их в организм вызывать выработку специфических к ним антител, которые нейтрализуют литическую активность фага. Фаги содержат типоспецифические и группоспецифические антигены. По типоспецифическим антигенам их делят на серотипы.Применение бактериофагов в диагностике, профилактике, терапии инфекционных заболеваний Фаги используют в диагностике инфекционных болезней:а) с помощью известных (диагностических) фагов проводят идентификацию выделенных культур микроорганизмов, т.е. фагодиагностику.б) с помощью известных типовых бактериофагов можно определить принадлежность выделенной и идентифицированной до вида культуры к тому или иному фаговару внутри вида; этот способ диагностики получил названиефаготипирование.Фаги применяют для профилактики и лечения инфекционных заболеваний: а) фагопрофилактика - метод предупреждения развития некоторых бактериальных инфекций с помощью приема внутрь специфического бактериофага. Применяют для профилактики холеры, дизентерии, брюшного тифа и др. б) фаготерапия - метод лечения бактериальных инфекций посредством приема внутрь специфического фага.Умеренные фаги используют в генетической инженерии и биотехнологии в качестве векторов для получения рекомбинантных ДНК, используемых для получения биопрепаратов. ЗАДАЧА: ФРАНЦИСЕЛЛЫ ТУЛЯРЕМИИ Микробиологическая диагностика. Возбудитель туляремии относится к группе особо опасных микроорганизмов, вследствие чего его выделение и идентификация могут производиться только в специальных лабораториях ООИ ЦГЭ и ОЗ, противочумных станций, научно-исследовательских институтов, подготовленным персоналом, привитым против туляремии. Вследствие общности симптомов с чумой, сибирской язвой, брюшным и сыпным тифом, гриппом, малярией, бруцеллезом диагноз труден. Решающая роль в диагностике туляремии принадлежит лабораторным исследованиям. В зависимости от формы заболевания материалом для исследования являются пунктат из увеличенного лимфоузла, слизь из зева, отделяемое конъюктивы глаза, кожной язвы, мокрота или кровь, секционный материал (лимфоузлы, кусочки лёгких, селезёнки), а также почва, вода, ил, солома, кровососущие насекомые, пищевые продукты (путём проб). Используют все 5 микробиологических методов, но основным является серологический метод, а аллергический метод используется для ранней диагностики. У больных туляремией сенсибилизация наступает рано, уже на 3-4 день. Поэтому проводят постановку внутрикожной или накожной пробы с тулярином. Проба считается положительной, если отек и гиперемия не менее 5 мм вокруг или по ходу насечек (через 48-72 часа), или если инфильтрат диаметром не менее 5 мм. Проба положительна у переболевших и привитых Для серологической диагностики используют: РА, РПГА , РТГА, РИФ и ИФА, 1 этап 1.Для биопробы применяют белых мышей и морских свинок. Мышам материал вводят подкожно, морским свинкам - внутрибрюшинно. Животные погибают на 3-6 сутки, иногда позднее. 2 этап 1.Животных вскрывают, из органов делают мазки-отпечатки, окрашивают по Граму, дают предварительный ответ. 2.Из органов делают посев на свернутую желточную среду Мак-Коя и Чепина→ 37˚ С 10 дней (можно делать посев на желточно-агаровую среду.) 3 этап 1.Определяют характер роста на среде Мак-Коя и Чепина. 2.Делают мазок по Граму, проверяя однородность выделенной культуры. 3.Посев на «пестрый» ряд Гисса и бульон с 2 индикаторными бумажками→37˚С 24 часа. 4.Посев на СПА→37˚С 24 часа (отсутствие роста). 5.РА с противотуляремийной сывороткой. 6.РИФ с чистой культурой. 7.Проба на чувствительность к антибиотикам на среде Мак-Коя и Чепина. 4 этап. 1.Учет результатов. 2.Выдача окончательного положительного ответа на основании морфологии возбудителя, отсутствия роста культуры на СПА, агглютинации гомологичной сывороткой, патогенности для белых мышей и морских свинок. Лечение. Применяют антибиотики и вакцинотерапию, используя убитую туляремийную вакцину.Профилактика. Специфическая профилактика проводится с живой туляремийной вакциной из штамма 15-й линии НИИЭТ. Ревакцинируют привитых через 5 лет. Профилактические меры сводятся к борьбе с грызунами, защите водоисточников, санитарно-просветительной работе. Для создания активного иммунитета по эпидемиологическим показаниям применяют эффективную живую туляремийную вакцину, полученную из штамма №15 отечественными учеными Н.А. Гайским и Б.Я.Эльберто

БИЛЕТ21 Дыхание это – совокупность биохим. Процессов, в результате которых освобождается энергия, необходимая для жизнедеят. Организмов. По источникам энергии мик.орг. делятся на: фототрофы- исполь. Энергию солн. Света благодаря пигментам близким к хлорофилу. Хемотрофы – получают энергию за счет окисления неорг. И орг. Соединений.органеллы дыхания у бактерий – это мозосомы, они содержат дых. Ферменты типа цитохромоксидаз.Типы биологического окисления:Для поддержания процессов жизнедеятельности и синтеза структурных компонентов микробной клетки наряду с питательными веществами требуется достаточное количество энергии. Эта потребность удовлетворяется за счет биологического окисления, в результате которого синтезируются молекулы АТФ.но чаще микроорганизмы добывают энергию за счет окисления углеводов кислот, жиров.По типу дыхания все микроорганизмы делятся:Аэробыживут и размножаются только в присутствии кислорода, Молекулы АТФ образуются ими при окислительном фосфорилировании примером может служить окисление глюкозы в аэробных условиях.Анаэробы (клостридии столбняка, ботулизма и др.) могут жить и размножаться только в отсутствии свободного кислорода. Они получают энергию путем окисления углеводов, белков и липидов. При этом выделяется небольшое количество энергии.Факультативные анаэробы – могут расти и размножаться как в присутствии кислорода, так и без него. Они образуют АТФ при окислительном и субстратном фосфорилировании. К ним относят большинство патогенных и сапрофитных бактерий. ЗАДАЧА: 1 при бруцеллезе. Методы лабораторной диагностики: 1.Серологический – основной 2. Аллергический 3. Бактериологический 4. Биологический 5.Микроскопический Тесты идентификации бруцелл 1. Проверяют однородность выделенной чистой культуры, т.е. делают мазок со скошенной элективной среды, окрашивают по Граму и микроскопируют. 2. Делают посев на короткий «пестрый» ряд Гисса и элективный бульон с 2 индикаторными бумажками (на индол и сероводород) → 37^оС 24-48 час 3. Ставят РА на стекле с поливалентной бруцеллезной сывороткой и чистой культурой. 4. С чистой культурой ставят РИФ. 5. Чистую культуру проверяют на фаголизабильность с помощью бруцеллезного бактериофага диагностического → 37^оС 24-48 час. 6. Делают посев на среду с мочевиной → 37^оС 24-48 час, (определяют уреазную активность).7. Проверяют бактериостатическое действие красителей, т.е. делают посевы чистой культуры на плотные элективные среды в чашках Петри с фуксином и тионином → 37^оС 1-2-5 суток. 8. Ставят РА на стекле с моноспецифическими бруцеллезными сыворотками (видовыми). 9. Проба на чувствительность к антибиотикам На агаровых средах – колонии бруцелл выпуклые, круглые, правильно контурированные, бесцветные с перламутровым оттенком, гомогенные или с нежной зернистостью от 0,1-0,5мм в диаметре, т.е. типичные S-формы колоний (наряду с S-формами существуют и R-формы колоний и L-формы). На скошенных элективных средах бруцеллы образуют нежный, блестящий, прозрачный налет. На жидких элективных средах – бруцеллы образуют помутнение и небольшой осадок; пленка не образуется и только в старых культурах иногда отличается кольцевидный рост по периферии стекла, слегка приподнимающийся над уровнем жидкости.

БИЛЕТ22 Рост и размножение микроорганизмов. Способы размножения. Бактерии, как и все живые организмы способны к росту и размножению. Под ростом клетки понимают координированное воспроизведение всех клеточных компонентов и структур, ведущее в конечном итоге к увеличению массы клетки. Размножение – увеличение числа клеток в популяции. Большинство прокариот размножается поперечным делением, некоторые почкованием (МКБtbc). Грибы, как вы знаете, размножаются спорообразованием. При размножении микробной клетки наиболее важные процессы происходят в ядре (нуклеоиде), содержащем всю генетическую информацию в двунитчатой молекуле ДНК. Репликация ДНК происходит способом, обеспечивающим равномерное распределение генетического материала между дочерними клетками. Репликация ДНК начинается в определенной точке и происходит одновременно в 2-ух противоположных направлениях. Синтез дочерних нитей ДНК идет ступенчато, короткими фрагментами, равными 1-2 тыс. нуклеотидов, которые «сшиваются» специальным ферментом лигазой. Параллельно с репликацией ДНК происходит процесс образования межклеточной (поперечной) перегородки В период репликации ДНК и образования перегородки микробная клетка непрерывно растет. Наряду с пептидогликаном синтезируются биополимеры, входящие в состав ЦПМ, рибосом и цитоплазмы. На последней стадии дочерние клетки отделяются друг от друга. Деление палочковидных и извитых форм бактерий происходит поперечно и только в одной плоскости. Деление кокков может происходить в различных плоскостях с образованием многообразных сочетаний клеток: диплококки (парные соединения), стрептококки (в виде цепочек), стафилококки (гроздья винограда) и т.д. Риккетсии размножаются, как и бактерии. Хламидии размножаются несколько по-другому. Они проходят определенный цикл развития. Элементарное тельце проникает в клетку хозяина превращается в инициальное и ретикулярное тельца, которые способны к делению образуют скопления клеток (включения) несколько делений новые поколения элементарных телец выход из клетки хозяина после разрыва стенки вакуоли и гибели клетки хозяина. РАЗМНОЖЕНИЕ БАКТЕРИЙ НА ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕДАХ На плотных питательных средах бактерии образуют скопления клеток, называемые колониями. Внешний вид колоний у некоторых бактерий характерен, что может служить одним из дифференциальных признаков при их идентификации (например, колонии возбудителя сибирской язвы можно сравнить с колониями или львиной гривой). Однако эти признаки могут меняться в зависимости от условий культивирования. Признаки роста на жидких питательных средах: образование пленки на поверхности питательной среды; равномерное помутнение; осадок. ЗАДАЧА: ВЫДЕЛЕНЫ бациллы сиб. Язвы Методы лабораторной диагности 1 Бактериологический – основной 2. Микроскопический 3. Биологический 4. Аллергический 5. Серологический Тесты идентификации B.anthracis: 1. Проверяют однородность выделенной чистой культуры, т.е. делают мазок с косяка, окрашивают по Граму и микроскопируют. 2. Проверяют капсулообразование в мазке, окрашенном по методу Бурри-Гинса(бациллы сибирской язвы+, а сапрофиты, кроме B.cereus, -). 3. Проверяют подвижность культуры в препарате «висячая капля» или делают посев в столбик полужидкого (0,3%) агара → 37^оС 24 часа, (B.anthracis -, сапрофиты+). 4. Проверяют гемолитическую активность, делая посев на 5% кровяного агара → 37^оС 24 часа, (B.anthracis-, сапрофиты+).5. Тест «жемчужного ожерелья»: делают посев чистой культуры на СПА с пенициллином → 37^оС 24 часа, а затем из колонии делают мазок, окрашивают по Граму, при микроскопии вместо палочек видны бусинки (шары) в виде цепочки грам+. 6. Проверяют вирулентность, заражая под кожу кролика. Через 2-3 суток он погибает от септицемии, отмечается отсутствие трупного окоченения, несвернувшаяся густая темная кровь, в мазках – капсульные грам+ палочки. 7. Проверяют фаголизабильность чистой культуры диагностическим сибиреязвенным фагом. 8. С чистой культурой ставят РИФ (сапрофиты не люминисцируют). 9. Проба на чувствительность к антибиотикам: посев на АГВ → 37^оС 24 часа. 7. Средства специфической терапии: - антибиотики с учетом антибиотикограммы; - противосибиреязвенный иммуноглобулин (в/мышечно 30-50 мл). Средства специфической профилактики: - живая сибиреязвенная вакцина СТИ (предложена Н.Н.Гинсбургом и А.Л.Тамариным; представляет собой споровую культуру бескапсульного варианта сибиреязвенных бацилл для накожного и подкожного применения; - химическая сибиреязвенная вакцина (из сорбированного на носителе протективного антигена, который получают из вакцинного штамма); - комбинированная сибиреязвенная вакцина (комбинация из спор ослабленног штамма и протективного антигена, сорбированного на геле гидроксида алюминия); - рекомбинантная сибиреязвенная вакцина; - противосибиреязвенный иммуноглобулин, вводят лицам, имевшим контакт с больными сибирской язвой животными или употреблявшими в пищу их мясо, внутримышечно по 20 – 25 мл в течение 5 – 10 дней.

БИЛЕТ23 Типы питания:По усвоению углерода: автотрофы (литотрофы) – способны синтезировать все углеродсодержащие компоненты клетки из CO₂, как единственного источника углерода;гетеротрофы (органотрофы) - не могут существовать только за счет ассимиляции CO₂. Они используют разнообразные органические углеродсодержащие соединения – глюкозу, многоатомные спирты, углеводороды и др. соединения; сапрофиты,паразитПо усвоению азота:аминоавтотрофы – для синтеза белков используют молекулярный азот воздуха (клубеньковые бактерии, азотобактерии) или усваивают его из аммонийных солей (прототрофы);аминогетеротрофы - получают азот из органических соединений аминокислот, белков(ауксотрофы). К ним относятся все патогенные и условнопатогенные микроорганизмы. В зависимости от источников энергии природы доноров электронов: фототрофы (фотосинтезирующие), способные использовать солнечную энергию – сапрофиты;хемотрофы (хемосинтезирующие), способные использовать энергию за счет окислительно-восстановительных реакций – патогенные микробы. В зависимости от доноров электронов хемотрофы подразделяют: хемолитотрофы (хемоавтотрофы) хемоорганотрофы (хемогетеротрофы) Особенности питания микроорганизмов: поступление питательных веществ через всю поверхность клетки;быстрота метаболических реакций;быстрая адаптация к условиям окружающей среды.Транспорт питательных веществ в бактериальную клетку.Микробы ассимилируют питательные вещества в виде небольших молекул, поэтому белки, полисахариды и др. биополимеры могут служить им источниками питания только после расщепления экзоферментами до более простых соединений. Метаболиты и различные ионы проникают в клетку тремя различными путями: Пассивная диффузия – протекает без энергетических затрат, по градиенту концентрации. Таким путем поступают H₂O, O₂, CO₂, N₂. Облегченная диффузия – не требует энергетических затрат. Протекает при участии мембранных белков – транслоказ. Активный транспорт, протекает с энергетическими затратами против градиента концентрации: при участии специальных белков – пермеаз (особые молекулы-переносчики, обладающие специфичностью, т.е. каждая пермеаза переносит в клетку определенные соединения); при участии мембранных белков-транслоказ и фосфорилировании переносимой молекулы в процессе ее прохождения через мембрану (таким путем переносится глюкоза). Из бактериальной клетки.Фосфотрансферазная реакция – фосфорилирование переносимой молекулы. Контрансляционная секреция – в этом случае синтезируемые молекулы должны иметь особую лидирующую последовательность аминокислот, чтобы прикрепится к мембране и сформировать канал, через который молекулы белка смогут выйти в окружающую среду. Т. о. выходят из клетки соответствующих бактерий токсины столбняка, дифтерии Почкование мембраны. Молекулы, образующиеся в клетке, окружаются мембранным пузырьком, который отшнуровывается в окружающую среду. ЗАДАЧА: Можно предположить что выделены листерии . Методы лабораторной диагностики: Бактериологический – основной Серологический (развернутая РА с листериознымдиагностикумом, условно-диагностический титр – 1:200). Биологический Тесты идентификации листерий: Проверяют однородность выделенной чистой культуры, т.е. со скошенного СПА с глюкозой делают мазок, окрашивают по Граму и микроскопируют. Проба на оксидазу (-) Проба на каталазу (+) Посев на короткий «пестрый» ряд Гисса и СПБ с глюкозой с двумя индикаторными бумажками → 37⁰С 24 часа (не ферментируетМн, ферментирует до К Гл, М медленно Л и С, не образует индол и сероводород) Посев в столбик полужидкого агара с глюкозой → 20-25⁰С 24 часа (подвижны) Посев на среду с мочевиной → 37⁰С 24 часа (-) Посев на среду с растворимым крахмалом → 37⁰С 24 часа (-) Проба на чувствительность к антибиотикам (среда АГВ с глюкозой) → 37⁰С 24 часа (-) 7. Средства специфической терапии: - антибиотики с учетом антибиотикограммы Средства специфической профилактики не разработаны Серологические исследования. Обычно ставят РА с листериознымдиагностикумом в конце второй недели заболевания. Реакция специфична и к этому сроку болезни становится положительной в титре 1:200 с последующим нарастанием титра АТ; последние сохраняются не менее 1-2 лет после выздоровления (реакция может быть использована для ретроспективного анализа).

БИЛЕТ24 Пигментообразование, ароматообразование и свечение микроорганизмов. СВЕТЯЩИЕСЯ МИКРООРГАНИЗМЫ Некоторые бактерии, вибрионы и грибы обладают способностью светится (люминесцировать). Они вызывают свечение тех субстратов, на поверхности которых размножаются (например, чешуя рыб, высших грибов, гниющих деревьев, пищевых продуктов). Большинство светящихся бактерий (или фотобактерий) гаалофильны, т.е. способны размножаться при повышенных концентрациях солей, и поэтому обитают в морях и океанах. Механизм свечения связан с освобождением энергии в процессе биологического окисления субстрата. АРОМАТИЧЕСКИЕ МИКРООРГАНИЗМЫ Некоторые микроорганизмы способны вырабатывать ароматические вещества, например, уксусно-этиловый или уксусно-амиловый эфиры, которые придают аромат вину, пиву, молочнокислым продуктам. Ароматобразующие бактерии широко используют при приготовлении различных пищевых продуктов. Некоторые микробы в процессе жизнедеятельности образуют вещества с неприятным запахом (индол, скатол, сероводород), что связано с размножением органических веществ. Многие микроорганизмы в процессе своей жизнедеятельности синтезируют пигменты, различающиеся по цвету, химическому составу и растворимости. Эти пигменты делятся на: Жирорастворимые каратиноидные пигменты красного, оранжевого или желтого цветов (образуют МКБtbc, некоторые актиномицеты). Эти пигменты предохраняют их от действия УФ-лучей. Водорастворимые (синий пигмент пиоциамин, выделяющийся синегнойной палочкой). Растворимые в спирте и нерастворимые в воде (пигмент продигиозан, выделяющийся чудесной палочкой). Нерастворимые в спирте и воде (меланины, синтезируемые некоторыми видами дрожжей и плесеней). Цвет пигмента используется в качестве теста для идентификации пигментообразующих бактерий. ЗАДАЧА: дифтерия Corynebacteriumdiphtheriaе .Элективные питательные среды и характер роста: Среда Клауберга (КТА, кровяно-теллуритовыйагар) является основной средой для выделения C.diphtheriae, на которой они образуют различные колонии в зависимости от биовара. vargravis (грубый, шероховатый) – формирует плотные сухие шероховатые (R-формы), розеткообразные колонии диаметром 1,5-2 мм, с волнистым краем серого или темно-серого (черного), цвета. Колонии – хрупкие – при раздавливании петлей они крошатся на мелкие кусочки. Их можно также «двигать» петлей по поверхности агара без нарушения целостности. Они не дают гемолиза. varmitis (гладкий, тонкий) – образует серые матовые колонии диаметром 1,5-2 мм с ровным краем и гладкой поверхностью, блестящие (S-формы). Характерна вариабельность размеров колоний. Дают небольшую зону гемолиза.

varintermedius – образует колонии RS-формы: мелкие, серые, прозрачные колонии диаметром 0,5-1 мм. На среде Тинсдаля-Садыковой («Т», сывороточный агар с теллуритом калия и циститом) – рост такой же, как на среде Клауберга, кроме того, вокруг колоний всех биоваров образуется темно-коричневый ободок.

5-10% кровяной агар – растут как на среде Клауберга, только mitis без гемолиза. 20% сывороточныйагар – растут как на среде Клауберга, только без гемолиза. Среда Бучина (хинозольная, дифференциально-диагностическая среда) – колонии C.diphtheriae фиолетового цвета, а колонии C.xerosis и C. hoffmani – бесцветные или голубоватые на фиолетовом фоне среды. На сывороточном и сахарном бульонах биоварgravisобразует пленку и зернистый осадок; биоварmitis – диффузное помутнение; биоварintermedius – муть и зернистый осадок. Чистую культуру коринебактерий выделяют на скошенных элективных средах Ру (свернутая лошадиная сыворотка) и Лёффлера (3 части бычьей сыворотки и 1 часть сахарного бульона), которые выглядят одинаково – косячки белого цвета. Можно использовать и 20% сывороточный скошенный агар. На средах Ру, Лёффлера – коринебактерии дифтерии через 8-14 часов вырастают в виде изолированных небольших (точечных) выпуклых желтовато-кремовых колоний с гладкой или слегка зернистой поверхностью, напоминающих «шагреневую кожу».

Ложнодифтерийные бактерии культивируются на всех средах, в том числе и на СПА, где образуют сухие мелкие колонии серого цвета, а на бульонах вызывают помутнение.

БИЛЕТ25 Виды изменчивости: фенотипическая - (ненаследуемая)модификация-фенотипические изменения какого-либо признака или нескольких признаков, в отличие от мутаций. Модификации проявляются в изменении морфологических, культуральных и др. признаков. Биохимическую основу модификации составляет индуцированный синтез ферментов. Например, кишечная палочка только в присутствии лактозы синтезирует ферменты необходимые для ее ферментации. Генотипическая(наследуемая)Мутация- представляют собой изменения в первичной структуре ДНК, которые выражаются в наследственно закрепленной утрате или изменении какого-либо признака Рекомбинации:трансформация–непосредственная передача генетического материала (фрагмента ДНК) донора реципиентной клетке, трансдукция передача генетического материала от одних бактерий другим с помощью фагов. Различают 3 типа трансдукции: неспецифическую (общую) специфическую и абортивную.конъюгация.- перенос генетического материала из клетки-донора в клетку реципиента при их скрещивании. Клетка-донор прикрепляется к клетке-реципиенту с помощью половых ворсинокR-S-диссоциации: Диссоциацию большинство ученых рассматривают как закономерную форму модификации, а некоторые относят ее к мутациям. Присуща она прежде всего энтеробактериям, в однородной популяции которых обычно появляются различные по биологическим свойствам особи, образующие на питательных средах несколько типов колоний. R-КОЛОНИИ (rough – шершавый) – шероховатые, неправильной формы, неровными краями, поверхность утолщена, радиально исчерчена, сухая.SR-ФОРМЫ, переходные, нестойкие типы колоний.S-ФОРМЫ (smooth – гладкий) – круглые с ровными края, выпуклые, влажные, полупрозрачные.Значение учения об изменчивости для практической медицины: Модификации – изменение химического состава внешней оболочки вириона, связанное с включением в ее состав липидов и углеводов клеток-хозяина.Мутации – как и у бактерий спонтанные и индуцированные и затрагивают различные свойства вирусов.Генетическая рекомбинация –обмен генами между двумя и более вирусами. Генетическая реактивация, особый случай рекомбинации или перераспределения генов, когда у 2-ух родственных вирусов инактивированы разные гены. ЗАДАЧА:

Выделенабардетеллапертусис возбудитель коклюша. 2 этап. 1. Отбирают типичную колонию и делают мазок по Граму, микроскопируют. 2. При наличии в мазке мелких грам - , овоидных палочек, ставят РА на стекле с монорецепторными диагностическими коклюшной и паракоклюшной сыворотками, и при РА + дают предварительный положительный ответ. 3. Колонии, давшие РА+, отсевают на скошенный КУА для выделения и накопления чистой культуры 37С 24 часа. Тесты идентификации бордетелл: 1. Просматривают посевы чистой культуры на скошенном КУА и отмечают наличие или отсутствие изменения цвета среды. 2. Проверяют однородность чистой культуры, т.е. делают мазок со скошенного КУА, окрашивают по Граму и микроскопируют. 3. Делают посев чистой культуры на скошенный СПА с 0,1% тирозина → 37^оС 24 часа. 4. Делают посев чистой культуры на бульон Хоттингера с мочевиной → 37^оС 24 часа.м 5. Делают посев чистой культуры на среду Симмонса → 37^оС 24 часа. 6. Делают посев чистой культуры в столбик полужидкого агара → 37^оС 24 часа. 7. Проба на чувствительность к антибиотикам → 37^оС 24 часа 8. Проводят серологическую идентификацию культуры путем постановки РА на стекле с монорецепторными коклюшными и паракоклюшными сыворотками к факторам 1 и 14. Серовары коклюшного микроба определяют в РА с монорецепторными сыворотками к факторам 1, 2, 3.

БИЛЕТ26 Фагоцитоз, фазы фагоцитарного процесса. Завершенный и незавершенны фагоцитоз. Фагоцитозом называется явление, при котором особые клетки-фагоциты атакуют, поглощают и уничтожают проникшие в организм (бактерии, токсины) или образовавшиеся в нем (погибшие старые клетки) вредные частицы. Виды фагоцитоза Завершенный – объект переваривается Незавершенный – бактерии не перевариваются Клетки ,способные к фагоцитозу ,получили название фагоциты .Фагоцитоз протекает в 4 стадии: I-стадии положительного хемотаксиса -приближение фагоцита к объекту фагоцитоза (лиганду ),то есть по градиенту хемотаксических факторов ; II-стадия аттракции (окружения)-включает опсонизацию ,распознование и прикрепление фагоцита к объекту фагоцитоза III-стадия поглощения -образования фагосомы; IV-стадия киллинга (убиения) жизнеспособных объектов и их переваривания В зависимости от количества стадий фагоцитоз может быть завершенным и незавершенным Завершенный фагоцитоз протекает в 4 стадии ,заканчивается полным уничтожением фагоцитабельного объекта ,обусловливает высокую неспецифическую резистентность организма к действию инфекционных патологических факторов Незавершенный фагоцитоз протекает в 3 стадии , отсутствует стадия киллинга и переваривания ;не обеспечивает противомикробной защитной функции и способствует генерализации инфекционного процесса. ЗАДАЧА: род Haemophilus, включает 16 видов: 2 вида - патогенные для человека: H. influenzaе - возбудитель воспалительных процессов дыхательных путей, H. ducreyi - возбудитель мягкого шанкра Бактериологическое исследование

Чистые культуры гемофильная бактерий выделяют путем посева исследуемого материала на специальные питательные среды (кровяной агар, кровяной агар с добавлением сердечно-мозгового экстракта, шоколадныйагар). Для подавления кокковой флоры к среде добавляют 15-25 ЕД / мл пенициллина. На простых средах гемофильные бактерии не растут. Спинномозговую жидкость сначала центрифугируют и осадок высевают петлей на одну из плотных сред. При септицемии делают посев 10 мл крови в 100 мл жидкой среды Файддса. Через 24 часа делают высев на агар, где через сутки вырастают маленькие выпуклые прозрачные колонии. На шоколадном агаре колонии появляются через 36-48 ч, они немного больше по размерам и полупрозрачные. На кровяномагаре с добавлением сердечно-мозгового экстракта через сутки вырастают мелкие выпуклые колонии с радужными переливами. Колонии безкапсульних вариантов гемофилов не имеют такого радужного расцвета. Из типичных колоний готовят мазки, окрашивают по Граму и при выявлении грамотрицательных палочек дают предварительное заключение. Н. influenzae первых генерациях может быть в капсульные и безкапсульний форме. Для окончательной идентификации выделенных культур проводят реакцию феномена «набухания капсулы» используют соответствующие агглютинирующие диагностические сыворотки, исследуют на определение потребности для роста X-и Y-факторов. Для выявления исследуемый материал засевают на среду, на поверхность которого затем кладут стандартные диски или полоски, пропитанные X-и Y-факторами. Интенсивный рост бактерий вокруг дисков или полосок подтверждает наличие Н. influenzae. Определяют тесты на каталазную, оксидазную, уреазную, b - галактозидазную, орнитиндекарбоксилазную и гемолитическую активность, ферментацию углеводов, образование индола. Тесты идентификациигемофилов: 1. Проверяют однородность чистой культуры, делают мазок, окрашивают по Граму и микроскопируют. 2. Тест на способность к продукции цитохромоксидазы. 3. Тест на способность к продукции каталазы. 4. Определяют уреазную активность 5. Определяютb- галактозидазнуюактивность 6. Определяюторнитиндекарбоксилазную активность. 7. Определяют способность образовывать индол. 8. Тест на определение потребности для роста X и Y факторов. 9. Реакция определенияфеномена «набухания капсулы». 10. Проба на чувствительность к антибиотикам на среде Мюллера–Хинтона с добавлением 5% дефибринированной крови человека→ 37^оС 24 часа. 11. Проводят серологическую идентификацию культуры путем

постановки РА на стеклес капсульными антигенами (a, b, с, d, е, f)

с соответствующими поли - и монорецепторными диагностическими

сыворотками. Выделенную культуру необходимо дифференцировать

от возбудителей коклюша и паракоклюша.

БИЛЕТ27 Роль микроорганизма в развитии инфекционного процесса. Патогенность и вирулентность, микроорганизмов, факторы вирулентности. Патогенными называют микробы, вызывающие инфекционные болезни. Патогенность – генетически детерминированный признак, но под воздействием факторов окружающей среды она может подвергаться фенотипической изменчивости. Вирулентность – показатель болезнетворной активности штамма, биовара, вида микроорганизма. Патогенность связана также с токсигенностью – способностью бактерии образовывать и сегментировать токсины (эндо - и экзотоксины). Факторы патогенности (вирулентности) Признаки: Адгезия (прилипание) – микробные клетки прикрепляются или прилипают к поверхности эпителия (эта способность определяется специфическими химическими группировками – лигаидами, находящимися на поверхности микробов и рецепторами клеток, которые должны соответствовать друг другу, иначе адгезия не происходит). Адгезины, отвечающие за прилипание возбудителя весьма разнообразны. Их уникальное строение, свойственное определенным видам и даже штаммам, обуславливает высокую специфичность данного процесса. Этим объясняется способность одних микробов прикрепляться и колонизировать преимущественно эпителий дыхательных путей, других – кишечного тракта и т.д. Рецепторы тканей человека также неоднородны по своему составу и их подразделяют на: Нативные – располагаются на эпителиальных клетках, участвуя в адгезии соответствующих бактерий. Индуцированные – образуются только после адсорбции вирусов (например, вируса гриппа) на чувствительных клетках, после чего на них могут адгезироваться стафилококки и др. бактерии. С этим связано возникновение вторичных бактериальных инфекций при первичных вирусных заболеваниях. Приобретенные – появляются при определенных условиях. Представляют собой «мостики», связывающие эпителиальные и бактериальные клетки, которые состоят из Ig разных классов, альбуминов и др. Колонизация – процесс размножения микробов в месте адгезии. Пенетрация – проникновение внутрь эпителиальных клеток, лейкоцитов или лимфоцитов. Инвазия – проникновение через слизистые и соединительнотканные барьеры в подлежащие ткани. Эту способность связывают с продукцией ферментов гиалорунидазы (clostridiumperfringens) и нейтроминидаза (холерный вибрион). С помощью этих ферментов возбудители могут проникать внутрь клеток и распространяться в межклеточном пространстве. ЗАДАЧА:

Выделены M. tuberculosis( микобактерии).

Методы лабораторной диагностики:

1.Бактериологический - основной.

2.Микроскопический.

3.Биологический.

4.Кожно-аллергический.

5.Серологический.

6. ПЦР- диагностика

Наиболее надежным признаком диагностики заболевания туберкулезом является обнаружение Mycobacteriumtuberculosiscomplex (M. tuberculosis, M. bovis, M. africanum, M.microti) в биологических жидкостях и в биоптатах тканей из очага поражения.

Микроскопический метод:1.Бактериоскопия мазков, окрашенных по методу Циля-Нильсена, эффективна только при высокой концентрации микобактерий в исследуемом материале. Так, единичные палочки можно обнаружить в препарате, если их содержание не менее 10⁵ в 1 мл мокроты. Поэтому при небольшом содержании БК в материале применяют методы обогащения - гомогенизации и осаждения, или флотации.

Материал для исследования: мокрота, промывные воды бронхов и желудка, ликвор, моча, экссудат, отделяемое ран, гной, биопсийный и секционный материал.

БИЛЕТ28 Питательные среды бактериологические – это жидкие, полужидкие или плотные субстраты, используемые для выращивания микроорганизмов в лабораторных или производственных условиях. Элективные среды а) сахарный бульон – для стрептококков; б) щелочнойагар – для холерных вибрионов; в) среда Плоскирева – для шигелл; г) среда Леффлера – для коринебактерий; д) КУА – для бордетелл е) ЖСА – для стафилококков ё) среда Китта-Тароцци – для анаэробов и др. Дифференциально-диагностические среды: среды Гисса, среда Клиглера, среда Ресселя, среды Эндо, Левина, Плоскирева, Вильсон-Блера. 4. Среды накопления: селенитовый бульон, магниевая среда, бульон Кауфмана. 5. Среды консервирующие: глицериновая смесь, стерильный физиологический раствор Алгоритм приготовления питательной среды: Варка Установление оптимальной величины рН Осветление (в случае необходимости) Фильтрация Разлив Стерилизация Контроль Требования к пит. Средам: должны быть питательными,иметь оптимальную концентрацию водородных ионов, д.б. изотоничными, прозрачными, стерильными, влажными, обладать окислит.-восстановит. Потенциалом. ЗАДАЧА: материал для исслед.: выявление ботулинического токсина в сыворотке крови (биопробы на мышах с нейтрализацией антитокси­ческими сыворотками) — абсолютное подтверждение ди­агноза,- выделение бактерии ботулизма из рвотных масс, промывных вод желудка, испражнений, использовавших­ся пищевых продуктов (частый источник отравления) так­же подтверждает диагноз. Методы диагностикиОбщеклинические методы диагностики, такие, как анализы мочи, кала, каких-либо особенностей, характерных для ботулизма, не имеют. Учитывая выраженные метаболические нарушения, показан контроль кислотно-основного состояния в динамике. Придифференциальнойдиагностике с нейроинфекциями важное значение при нечёткости клинической картины и не убедительных результатах РН токсина приобретают исследования ликвора (при ботулизме не изменена). Материалом для бактериологического исследования служат фекалии и рвотные массы больного, промывные воды желудка и кишечника, содержимое ран (при раневом ботулизме), подозреваемая пища. Так как сразу поставить диагноз «ботулизм» у взрослого больного сложно, то проводят обнаружение токсина в исследуемом материале. Исследование проводят на белых мышах. Им внутрибрюшинно вводят жидкость, полученную после центрифугирования сыворотки крови больного в смеси с противоботулинической сывороткой типов А, В, Е. Исследование проходит 4 дня. За это время мыши, не защищённые тем типом антитоксина, которым вызвано заболевание у пациента, погибают. Остаются живыми мыши, которым вводили сыворотку, соответствующую типу токсина, циркулирующего в крови больного. Серологических исследований не проводят, так как заболевание не сопровождается выработкой выраженных титров антител, что связано с незначительной дозой токсина, вызвавшей поражение.

БИЛЕТ29 Определение понятия «иммунитет». История становления иммунологии. Виды и формы иммунитета. Иммунитет – это совокупность защитно-адаптационных реакций и приспособлений, направленных на сохранение постоянства внутренней среды (гомеостаза) и защиту организма от инфекционных и других генетически чужеродных для него агентов. Основные этапы развития иммунологии. Иммунология – это наука о строении и функции иммунной системы организма животных, включая человека и растений, или наука о закономерностях иммунологической реактивности организмов и методах использования иммунологических явлений в диагностике терапии и профилактике инфекционных и иммунных болезней. В развитии иммунологии можно выделить несколько этапов: Инфекционный (Л. Пастер и др.), когда началось изучение иммунитета к инфекциям.Неинфекционный, после открытия К. Ландштейнером групп крови и феномена анафилаксии Ш. Рише и П. Портье. Клеточно-гуморальный, который связан с открытиями, сделанными лауреатами Нобелевской премии: И. И. Мечников – разработал клеточную теорию иммунитета (фагоцитоз), П. Эрлих–разработал гуморальную теорию иммунитета (1908 год). Ф. Бернет и Н. Иерне – создали современную клонально-селективную теорию иммунитета (1960). П. Медавар – открыл иммунологическую природу отторжения аллотрансплантантов (1960).Молекулярно-генетический, характеризующийся выдающимися открытиями, которые были удостоены Нобелевской премии: Р. Портер и Д. Эдельман – расшифровали структуру антител (1972). Ц. Мельштейн и Г. Келер – разработали способ получения моноклональных антител на основе созданных ими гибридов (1984).С. Тонегава – раскрыл генетические механизмы соматической рекомбинации генов иммуноглобулинов как основы формирования разнообразия антигенраспознающих рецепторов лимфоцитов (1987). Виды и формы иммунитета. Иммунологические функции осуществляются на двух уровнях. Первый – филогенетически более длинный уровень – составляют неспециализированные защитные механизмы, действующие против любого чужеродного фактора. Эти механизмы действуют постоянно и обеспечивают состояние, получившее название «врожденный, естественный иммунитет, или неспецифическая резистентность». Механизмы неспецифической резистентности функционируют в организме постоянно, обуславливая в случаях массивного микробного или иного дестабилизирующего воздействия воспалительную реакцию, одинаковую при разных возбудителях. Развитие воспалительной реакции способствует возникновению специфического иммунного ответа, который можно рассматривать как развитие второй более эффективной линии обороны против возбудителя инфекционного процесса. Второй уровень иммунологических функций составляют механизмы, определяющие способность организма к избирательному (специфическому) ответу на конкретные чужеродные структуры, именуемые антигенами. Эта способность формируется в каждом организме в ответ на воздействие конкретного антигенного вещества. Данная группа функций получила название приобретенного, или специфического иммунитета Естественный иммунитет обуславливает постоянный уровень резистентности организма к любому чужеродному субстрату, но вследствие однотипного неспециализированного ответа на разные потенциально-опасные для организма агенты менее эффективен, чем приобретенный иммунитет. Врожденный и приобретенный иммунитет реализуется действием клеток и гуморальных факторов, что привело к формированию терминов – клеточный и гуморальный иммунитет. Иммунитет клеточный – иммунитет, основным эффектором которого являются сенсибилизированные лимфоциты и продуцируемые ими лимфокины. В развитии И. к. основная роль принадлежит Т-системе лимфоцитов, в контроле за ним – тимусу. Оценку И. к. проводят постановкой пробирочных и на живом организме иммунологических клеточных реакций И. к., а также определением количества Т-лимфоцитов и их субпопуляций (Т_x, T_к, Т_э, Т_с). Иммунитет гуморальный – иммунитет, основанным эффектором которого являются Аm. В развитии И. г. главная роль принадлежит В-система лимфоцитов, в контроле за ним – костному мозгу. Напряженность измеряют титром и авидностью Аm (свойство молекул Аm и Аг, характеризующее эффективность их специфического взаимодействия), а также количеством В-лимфоцитов в целом и их субпопуляций. Активный иммунитет вырабатывается организмом в результате воздействия антигена на иммунную систему (вакцинация, заболевание). При этом в организме синтезируются специфические антитела, способные нейтрализовать попавший в организм антиген. Пассивный иммунитет формируется в результате введения в организм готовых антител, взятых у другого иммунного организма. Различают несколько видов П. П. И. Постсывороточный П. И. – иммунитет, приобретенный после введения в организм иммунных сывороток, содержащих готовые антитела к какому-то определенному Аг. При этом сам организм не участвует в выработке Аm. Плацентарный П. И. – иммунитет, который передается от иммунной матери плоду через плаценту с кровью или ребенку с ее молоком. По направленности действия иммунитет приобретенный бывает: антитоксический – когда защитное действие иммунитета направлено на обезвреживание бактериальных токсинов (токсинов столбнячной палочки, палочки дифтерийной и др.); антимикробный – иммунитет, направленный против микроорганизмов; антивирусный – П. И. против вирусов; антигрибковый – П. И. против грибов; антипаразитарный – П. И. против простейших; трансплантационный – П. И. против трансплантата (реакция отторжения трансплантата). Антимикробный П. И. по связи с индуцирующим агентом может быть: - стерильным – иммунитет, который формируется в результате перенесенного инфекционного заболевания и сохраняется после освобождения организма от возбудителя болезни; - нестерильным (инфекционным) – иммунитет, который существует только при наличии возбудителя в организме (например, при туберкулезе, сифилисе). Местный иммунитет – неразрывная и соподчиненная часть общего иммунитета, обеспечивающая защиту отдельных областей организма (кожи, слизистых оболочек, тканей, органов) от повреждающего действия веществ антигенной природы. ЗАДАЧА: T.pallidum –возбудитель сифилиса( Трепонема). Материал для исследования: при первичном сифилисе материалом для исследования является отделяемое твердого шанкра и пунктат лимфатических узлов; при вторичном сифилисе – отделяемое слизистых и кожных поражений; во II, III и IV периодах сифилиса материалом являются сыворотка крови, плазма, спинномозговая жидкость. При микробиологической диагностике сифилиса применяются микроскопические и серологические методы исследования. Самым надежным методом микробиологической диагностики сифилиса является обнаружение возбудителя в экссудате или тканевой жидкости из твердого шанкра. Для этого готовят: Препарат “раздавленная капля” и рассматривают в темном поле зрения, основной дифференциальный признак – это характер движения, при обнаружении трепонемы дают ответ (возбудитель обнаруживается в 100% случаев). Тушевый мазок сейчас не используют. Иммунофлюоресцентный метод состоит в обработке мазка из тканевой жидкости или экссудата меченой флюоресцентомпротивотрепонемной сывороткой и микроскопии его в люминисцентном микроскопе. Выявляются типичные спирохеты со светящейся оболочкой. Микроскопия в темном поле и РИФ могут дать положительные результаты и в нелеченных случаях вторичного сифилиса. Серологический метод позволяет поставить диагноз сифилиса, начиная со 2-4-й недели во все периоды болезни, в том числе в латентную фазу. Реакция Вассермана - это качественная РСК, ее проводят с использованием обычной техники, но в одном разведении сыворотки 1:5, в общем объёме 2,5мл, но сразу с двумя Аг – неспецифическим кардиолипиновым Аг для РСК и специфическим трепонемнымАг. Обязателен контроль сыворотки (без Аг) и 3 контроля с заведомо положительной, заведомо слабоположительной и заведомо отрицательной сыворотками. Результат опыта оценивают как отрицательный, слабоположительный, положительный (сравнивают с контролями сывороток). Реакция Вассермана может быть положительной (неспецифической) при беременности , начиная с 8-го месяца, и после родов, при малярии, туберкулезе, Неспецифические положительные RW при повторных исследованиях, которые производят двукратно или троекратно через 10-15 дней, становятся отрицательными. Реакция микропреципитациис кардиолипиновым антигеном для постановки реакции микропреципитации (методику ее постановки будем изучать на практическом занятии). Количественная РСК – проводится по общей схеме постановки РСК. РИТ- (тест Вильсона - Майера) – принцип в том, что сыворотка больного сифилисом в присутствии комплемента угнетает движение бледных трепонем.