Д. Основные дифференциальные признаки стрептококков группы а и стрептококков группы d (энтерококки)

Признаки	Стрептококки
	группа А	группа D (энтерококки)
1. Форма	круглая	чаще овальная
2. Взаиморасположение	цепочки	парами, короткие цепочки
3. Температурные пределы роста	25-38 °С	10-45 °С
4. Рост на средах с рН 9,6	–	+
5. Pост на средах, содержащих 6,5% NaCl	–	+
6. Рост на среде с 40% желчи	–	+
7. Рост на молоке, содержащем 0,1% метиленового синего	–	+
8. Гиалуронидазная активность	+	–
9. Терморезиствнтность (при 60°С в течение 30 мин.)	–	+

З А Н Я Т И Е 4

Дата ______________

Тема: Микробиологическая диагностика гнойно-воспалительных заболеваний (пневмококки, менингококки, гонококки)

План занятия:

1. Бактериологическое исследование гноя (продолжение). Макро- и микроскопия колоний, выросших при посеве гноя.

2. Определение патогенности стафилококка. Обнаружение плазмокоагулазы, гемотоксина (демонстрация). Фаготипирование стафилококков (демонстрация). Определение чувствительности культуры к антибиотикам методом дисков и Е-тестом.

3. Исследование микрофлоры зева. Макро- и микроскопия колоний, выросших на кровяном МПА.

4. Изучение морфологических и культуральных свойств пневмококка (демонстрация).

5. Менингококк. Демонстрация готовых препаратов-мазков из ликвора.

6. Гонококк. Микроскопия мазков из гноя больного гонореей.

7. Демонстрация лечебно-профилактических и диагностических препаратов, применяемых при кокковых инфекциях (вакцины, анатоксины, антибиотики, фаги).

Методические указания

1. На чашках с посевами найти колонии стафилококка: небольшие, выпуклые, с ровными краями, непрозрачные, с гладкой и блестящей поверхностью. Обратить внимание на наличие пигмента на молочном МПА и гемолиза на кровяном МПА. Промикроскопировать мазок из колонии и зарисовать в тетрадь.

2. Для определения чувствительности стафилококка к антибиотикам взять петлей колонию, размешать ее в пробирке с МПБ, чтобы получилось заметное помутнение бульона. 2-3 капли полученной эмульсии нанести в центр чашки с МПА и тщательно растереть по всей поверхности агара. Разделить дно чашки с тыльной стороны карандашом на 4 сектора, надписать на секторах названия антибиотиков и положить в центр каждого сектора прокаленным и остуженным пинцетом диск с соответствующим антибиотиком.

Измерить и записать в таблицу диаметр зоны задержки роста стафилококка каждым антибиотиком. Сформулировать и записать вывод о степени чувствительности выделенной культуры к различным антибиоти­кам.

Регистрация чувствительности к антибиотикам выделенной культуры стафилококка

Антибиотик	Пенициллин	Стрептомицин	Левомицетин	Тетрациклин
Диаметр зоны задержки роста (в миллиметрах)

Вывод: ______________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

3. Просмотреть чашки с посевами материала из зева. Обратить внимание на наличие мелкоточечных колоний с зоной полного или зеленоватого гемолиза. Промикроскопировать и зарисовать препарат, приготовленный из подозрительной колонии (окраска по Граму).

6. Готовые препараты-мазки из отделяемого уретры больного гонореей окрасить метиленовым синим или по Граму. При микроскопии необходимо отыскать в препарате лейкоцит с заключенными в нем диплококками, имеющими форму кофейного зерна.

Микроскопия колонии из посева гноя	Микроскопия колонии из посева слизи	Пневмококк Streptococcus pneumoniae
Гонококк в отделяемом уретры больного гонореей:
Менингококк Neisseria meningitidis	окраска по Граму окраска метиленовым синим Neisseria gonorrhoeae