Свойства дифтерийной палочки и близких к ней коринебактерий

Вид	Сахароза	Глюкоза	Крахмал	Проба Пизу	Проба на уреазу	Токси-генность
Дифтерийная палочка
Дифтероид
Ложнодифтерийная палочка

Обозначить знаками + или -.

Знак + означает наличие признака. Знак – означает отсутствие признака.

4. Исследованию подвергаются слизь или пленка из зева, носа, носоглотки, миндалин. Реже исследуется материал с конъюнктивы глаза, со слизистой оболочки половых органов или с поверхности ран. Материал берут стерильным тампоном. Тампон погружают в стерильную пробирку с этикеткой, на которой указаны фамилия, имя, отчество, возраст больного и из какого места (полости) взят материал. Пробирки с материалом помещают в металлические пеналы и с нарочным отправляют в лабораторию для доследования. Разбор методики взятия материала из зева, носа и других мест и посева его при дифтерии.

5. С помощью стерильного ватного тампона произвести друг у друга забор материала со слизистой зева или носа и сделать посев на сывороточную среду с теллуритом.

Произвести макро- и микроскопическое изучение выросших подозрительных колоний. Препараты окрасить синькой Леффлера, по Граму и по Нейссеру. Результаты зарегистрировать в тетради. При обнаружении коринебактерий сделать посев на среды с глюкозой, сахарозой, цистином и мочевиной. Одновременно сделать посев для определения токсигенности бактерий.

6. Методика определения токсигенных свойств возбудителя дифтерии преципитацией в агаре заключается в следующем. Полоски фильтровальной бумаги размером 1,5x8 см, простерилизованные в автоклаве, смачивают антитоксической противодифтерийной сывороткой, разведенной стерильным физиологическим раствором до содержания 500 АЕ в 1 мл. Смоченную сывороткой бумажку стерильным пинцетом переносят на поверхность питательной среды в чашку Петри. Чашку подсушивают в термостате 15-20 минут. Испытуемые культуры засевают бляшками по обе стороны от фильтровальной бумажки. На одну чашку засевают несколько штаммов, один из которых заведомо токсигенный и служит контролем. Чашки с посевом помещают в термостат при температуре 37°С. Результат учитывают в течение 48 часов. В месте взаимодействия антитоксина с токсином образуется линия преципитации. Если исследуемая культура образует токсин, то ее линия преципитации сливается с линией преципитации контрольного штамма, образуя сплошную белую полоску. При неспецифической преципитации линия, образуемая исследуемым штаммом, пересекает или имеет тенденцию к пересечению с линией контрольного штамма.

Демонстрация чашек с культурами токсигенной и нетоксигенной дифтерийной палочки. Зарисовать схему определения токсигенных свойств возбудителя дифтерии.

Определить токсигенные свойства дифтерийной палочки можно также методом биопробы. Для опыта берут двух морских свинок, накануне одной из них вводят 500-1000 АЕ антитоксической противодифтерийной сыворотки. Затем свинкам вводят подкожно (0,2 мл) или внутрикожно (0,1 мл) исследуемую культуру. Если испытуемая культура токсигенна, то при подкожном введении опытная свинка через 2-5 дней погибает. При вскрытии обнаруживается отек в месте введения культуры, экссудат в брюшной и грудной полостях и в перикарде. Особенно характерным симптомом является увеличение и гиперемия надпочечников. Контрольная свинка остается живой. При внутрикожном введении токсигенной культуры у опытной свинки в месте инъекции наблюдается покраснение, отечность, а в дальнейшем - некроз. У контрольной морской свинки никаких изменений не отмечается.

7. Промикроскопировать готовые препараты-мазки из культуры коклюшной палочки с окраской по Граму и зарисовать.

Ознакомиться с ростом коклюшной и паракоклюшной палочек на средах Борде-Жангу, казеиново-угольной и средах "пестрого ряда". Демонстрация.

8. Разбор методов микробиологической диагностики коклюша: бактериологического и серологического. Дифференциация коклюшной и паракоклюшной палочек.

9. Знакомство с иммунопрепаратами: адсорбированный дифтерийный анатоксин, противодифтерийная сыворотка, адсорбированный дифтерийно-столбнячный анатоксин, адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина и др.

Окраска по Нейссеру	Окраска метиленовым синим
Corynebacterium diphtheriae
Схема определения токсигенных свойств дифтерийных бактерий реакцией преципитации в агаре	Bordetella pertussis Окраска по Граму

Контрольные вопросы

Какие микробиологические методы применяются для диагностики дифтерии?

Какой материал берется для исследования при подозрении на дифтерию и при обследовании на бактерионосительство?

Какие морфологические признаки присущи дифтерийной палочке?

Каковы тинкториальные особенности возбудителя дифтерии?

По каким признакам дифференцируют типы гравис, митис и интермедиус?

По каким биохимическим признакам отличают дифтерийную палочку от дифтероидов?

В чем заключается сущность пробы Пизу?

Какими методами и как определяют токсигенность возбудителя дифтерии?

Каковы пути и способы заражения дифтерией?

Какова роль дифтерийного батерионосительства в эпидемиологии дифтерии?

Как используют РПГА для обнаружения в сыворотке детей антитоксина?

Почему для микробиологической диагностики дифтерии необходимо выделение чистой культуры возбудителя и изучение его свойств?

Какие бактерии откосятся к группе гемоглобинофильных и почему они так именуются?

Каковы морфологические, тинкториальные, кулътуральные и биохимические признаки коклюшной палочки?

По каким отличительным признакам дифференцируют коклюшную палочку от паракоклюшной?

Какие методы микробиологической диагностики применяют при коклюше?

Как проводится бактериологическая и серологическая диагностика коклюша?

Какие иммунопрепараты применяют для специфической профилактики дифтерии и коклюша?

Какими факторами патогенности обладает возбудитель дифтерии?

Каковы способы и пути передачи возбудителя дифтерии?

Что поражает (какие органы и системы органов) дифтерийный токсин?

Каковы особенности генетического контроля синтеза токсина у возбудителя дифтерии?

Каковы природа и структура дифтерийного токсина?

Каков молекулярный механизм действия дифтерийного токсина и какой процесс в клетке он блокирует?

Каким образом осуществляется активация дифтерийного токсина?

Каким образом возможно превращение нетоксигенной дифтерийной бактерии и токсигенную?

Каковы особенности современной классификации дифтерийных бактерий, и какие критерии с этой целью используются?