Методика колицинотипирования при помощи колициногенных штаммов

Определение спектра чувствительности культур Зонне к колицинам проводят при помощи эталонных колициногенных штаммов Фредерика:

Наименование штамма		Тип продуцируемого колицина
E. coli	Ca-18	B
E. coli	Ca-23	D
E. coli	Ca-38	E + I
E. coli	Ca-42	F
E. coli	Ca-46	G
E. coli	Ca-53	I
E. coli	Ca-62	J + I
E. coli	Ca-235	K
E. coli	Ca-7	V
E. freundii	Ca-31	A
S. boydii	p-1	S1
S. dispar	p-15	S4
S. dispar	p-14	S5
S. sonnei	p-9	S3 + 1

Колицинотипирование, т.е. определение спектра чувствительности культур Зонне к колицинам, определяют следующим образом.

Свежие эталонные колициногенные штаммы Фредерика, выросшие на среде Ресселя, сеют уколом петли в соответствующие квадраты чашки с 1,5%-ным МПА, подкрашенным генцианвиолетом, и инкубируют при 37ºC в течение 24 часов. Выросшие колонии бактерии убивают парами хлороформа, и поверхность агара заливают 2,5 мл расплавленного 0,7%-ного МПА, содержащего 2 капли 6-часовой испытуемой бульонной культуры шигелл Зонне. После 20-часового роста при 37°C производят учет результатов опыта. При наличии чувствительности к колицинам испытуемого штамма бактерии Зонне вокруг колоний колициногенных культур образуются зоны задержки роста подобно зонам задержки роста вокруг дисков с антибиотиками. Культура считается чувствительной к колицину, если ширина задержки роста бактерий более 2 мм.

Результаты регистрируют плюсами: + - зона задержки 2 мм; ++ - зона задержки 2-5 мм; +++ - зона задержки 5-10 мм; ++++ - зона задержки более 10 мм.

Б. Вирулентность дизентерийных бактерий обусловлена наличием у них факторов адгезии и колонизации, инвазии. (Эти факторы патогенности контролируются главным образом плазмидами). Кроме того, шигеллы способны вырабатывать 2 типа экзотоксинов: цитотонины (термолабильный и термостабильный) и цитотоксины (способностью вырабатывать цитотоксины шигеллу наделяют конвертирующие умеренные фаги).

Патогенность шигелл определяется с помощью кератоконъюнктивальной пробы на морской свинке.

В. Факторы патогенности диареегенных e. Coli

Факторы	Международное название
	Полное	Символы
Термостабильный энтеротоксин	Heat-stable enterotoxin	ST
Термолабильный энтеротоксин	Heat-labile enterotoxin	LT
Цитотоксины:	Cytotoxin Shiga-Like toxin	CT SLT
Шигаподобный токсин
Vero - токсин	Verotoxin	VT
Инвазивность٭	Invasiveness	-
Факторы колонизации٭	Colonization factor	CF
Фактор адгезии энтеропатогенных E. coli к клеткам Hep-2	Enteropathogenic E. coli adherence factor to Hep-2 cells	EAF
Адгезия к клеткам Henle-407	Adhesion to Henle-407 cells	Adhesion Henle-407

٭ - имеются в виду CFA/I, CFA/II, CFA/III, CFA/IV.

Известны и другие факторы адгезии и колонизации.