Бактеріологічне дослідження крові

При підозрі на менінгококцемію або сепсис проводять бактеріологічне дослідження крові. В якості експрес-методу діагностики рекомендується приготування мазка "Товстої краплі" з крові, взятої з вени або пальця.

У препараті "Товстої краплі" менінгококи мають переважно таку ж морфологію, як в спинномозковій рідині, але частіше розташовуються поодинці, мають більш круглу форму. У мазку, що має блакитний фон, добре видно забарвлені в темно-синій колір лейкоцити і між ними безліч дрібних, темно-синіх, розташованих купками, парно і по-одному, коків. Результати бактеріоскопії негайно повідомляють лікарю у вигляді попередньої відповіді.

Кров, узяту стерильно з вени, засівають на 0,1% напіврідкий агар або рідке живильне середовище в відношенні 1:10, тобто 1 - 2 мл крові можна посіяти в пробірку з 7 - 10 мл напіврідкого агару або 5 - 10 мл крові засіяти у флакон з 50 мл середовища. Після добової інкубації матеріал висівають на сироватковий і "шоколадний" агар в чашки Петрі. При наявності росту готують препарати для мікроскопії. При негативному результаті рекомендується інкубація протягом тижня з висівами через день. Виділення та ідентифікацію гемокультур проводять також, як при дослідженні спинномозкової рідини.

Бактеріологічне дослідження ексудату з петехій

При менінгококцемії іноді вдається виявити менінгококи безпосередньо в ексудаті шкірних петехій.

Для цього спочатку обтирають шкіру навколо петехій 70% спиртом. У разі утворення некрозу в центрі петехії ексудат можна взяти прожареною і остудженою бактеріологічною петлею з некротизованих ділянок. При непошкодженій шкірі ексудат беруть стерильної тонкою голкою, з'єднаною зі шприцом, в якому є 0,1 - 0,2 мл фізіологічного розчину. Фізіологічний розчин вводять в товщу петехії і відсмоктують назад.

Посів ексудату поміщають у чашки Петрі з сироватковим агаром, що містить антибіотики ристоміцин або лінкоміцин для придушення шкірної флори. Із залишку ексудату готують препарати-мазки. Мазки з вмісту петехій можна приготувати у вигляді відбитків. Для цього стерильною петлею обережно скарифікують поверхню петехій, потім прикладають декількома місцями предметне скло (стерильне), фіксують полум'ям пальника, фарбують. На підставі даних мікроскопії можлива видача попереднього відповіді.

Засіяні чашки інкубують при +37 0 С 24 години (у разі відсутності росту - 48 годин); підозрілі на менінгококи колонії відсівається і вивчають за схемою.

Бактеріологічне дослідження носоглоткового слизу на менінгокок

1-й день дослідження

Досліджуваний матеріал - слиз із задньої стінки глотки - беруть натщесерце або через 3 - 4 години після їжі стерильним ватним тампоном, укріпленим на вигнутому дроті.

Матеріал беруть з обов'язковим натисканням шпателем на корінь язика. Тампон вводять кінцем догори за м'яке піднебіння в носоглотку і проводять 2 - 3 рази по задній стінці. При витяганні тампон не повинен торкатися зубів, слизової щік, язика.

Матеріал може бути засіяний на місці його взяття на чашку Петрі з живильним середовищем, або середовищем збагачення, або взятий змоченим тампоном, який потім доставляють в лабораторію. При посіві на чашку матеріал втирають на поверхні невеликого ділянки (1 * 2 см) середовища всіма сторонами тампона, потім цим же тампоном засівають штрихами (з відривом) по всій площі, відведеної для посіву.

Використовують сироватковий агар з додаванням в нього антибіотиків, що пригнічують ріст грампозитивних коків. Для цієї мети застосовується ристоміцин або лінкоміцин в оптимальній концентрації. На одну чашку можна засіяти дві проби. Однак зустрічаються окремі штами менінгококів, більш чутливі до лінкоміцину, тому ті ж проби одночасно засівають на половину чашки з сироватковим агаром без лінкоміцину.

За відсутності лінкоміцину або ристоміцина можна використовувати диски з цими антибіотиками. Диски (не більше 2-х) накладають безпосередньо на поверхню засіяного сироваткового агару. У цьому випадку на 1 чашку сіють тільки одну пробу. Через одну добу навколо диска, в зоні 1 см, ріст грампозитивної флори буде пригнічений, що збільшує можливість виділення колоній нейссерій.

Засіяні чашки доставляють у лабораторію, ретельно захищаючи їх від охолодження, у зимовий час застосовують грілки (+35 - +40 0 С) і негайно поміщають в термостат при +37 0 С.

Тампони з досліджуваним матеріалом, занурені в напіврідке або транспортне середовище, доставляють в лабораторію, також ретельно захищеними від охолодження. Тампони в 0,1% напіврідкому агарі (збагачення) поміщають в термостат для зрощування флори.

Змочені тампони або тампони в транспортному бульйонному середовищі засівають на чашку з сироватковим агаром, позбавленим інгібітора, без попереднього зрощування. Посів роблять віджатим тампоном. Засіяні чашки поміщають в термостат.

При транспортуванні матеріалу на коротку відстань (1 - 2 години їзди до лабораторії) застосування транспортних середовищ не рекомендується. При транспортуванні протягом 2 - 4 годин доречно застосування тампонів, змочених живильним середовищем. При транспортуванні протягом 3-х годин і більше тампони перевозять, зануреними в транспортне середовище.

Напіврідке середовище збагачення може використовуватися незалежно від термінів транспортування.

2-й день дослідження

Оглядають чашки, засіяні напередодні, візуально і під лупою-мікроскопом МБС, підозрілі колонії відсіваються на сектори чашки з сироватковим агаром (не менше 3 - 5 колоній).