- •Содержание
- •Глава 1.Обзор литературы....................................................................................5 Введение
- •Глава 1.Обзор литературы
- •1.1 Морфология травяной лягушки
- •1.2. Распространение
- •1.3. Размножение
- •1.3 Строение пояса задних конечностей и свободной задней конечности
- •1.4 Развитие конечностей
- •1.5. Строение и развитие хрящевой ткани
- •1.6. Строение и развитие костной ткани
- •Глава 3. Результаты и их обсуждение
- •Глава 3.1. Материалы и методы
- •Глава 3.2. Морфологические особенности развития головастиков в норме
- •3.3 Морфологические особенности развития головастиков в среде с гормоном
- •3.4 Анатомические особенности развития опорно-двигательного аппарата в среде с тиреоидным гормоном.
- •3.4.1. Влияние начала времени действия тиреоидного гормона на развитие опорно-двигательного аппарата при концентрации гормона 6,3 мкг/л
- •3.4.2. Влияние концентрации тиреоидного гормона на развитие опорно-двигательного аппарата
- •Список литературы
Глава 3. Результаты и их обсуждение
Глава 3.1. Материалы и методы
Сбор материала проводился на территории поселка Цибирино (широта: 57°22′25.38″N (57.373718), долгота: 39°33′28.44″E (39.5579)) Ярославской области в естественном водоеме (озере).
Выклев и развитие головастиков происходили в лабораторных условиях. Время экспозиции 8-21 суток.
Исследования проводились методом лабораторной обработки. Выборка носит случайный характер.
Нами была проведена серия опытов по исследованию влияния тиреоидного гормона на развитие головастиков травяной лягушки (RANA TEMPORARIA).
В качестве источника тиреоидного гормона, нами был выбран один из наиболее распространенных сегодня препаратов – эутирокс, так как он наиболее сходен по действию у холоднокровных с таковым у человека.
Объем выборки составил 279 особи, из них 216 особей подверглись воздействию гормона.
Для исследования нами были выбраны следующие концентрации и время действия.
Исследуемые концентрации тиреоидного гормона
Концентрация, мкг/л |
Начало действия вещества, сутки после выклева |
Стадия головастиков на момент действия вещества |
Объём выборки, число особей |
25(1) |
6 |
34-36 |
38 |
12,5(2) |
6 |
34-36 |
35 |
6,3(3) |
6 |
34-36 |
32 |
0,63(4) |
6 |
34-36 |
26 |
0,063(5) |
6 |
34-36 |
5 |
6,3(6) |
7 |
35-38 |
22 |
6,3(7) |
8 |
35-39 |
16 |
6,3(8) |
9 |
36-39 |
17 |
6,3(9) |
12 |
38-41 |
4 |
6,3(10) |
13 |
38-40 |
20 |
В лаборатории головастики усыплялись эфиром. Фиксированный материал находился в растворе 10%-го формалина. Производился осмотр внешнего строения (жаберной крышки, жабр - если они есть, ротового аппарата, конечностей) исследуемого материала, в ходе которого были определены стадии развития головастиков. Для определения стадий использовали таблицу из книги Астаурова, Детлафа «Объекты биологии развития» . Для стадий 37-49 диагностическими признаками являются строение рта и конечностей.
Часть личинок окрашивалась. Головастики отмывались от формалина 2 суток в большом объёме воды, выдерживались в растворе альцианового синего (20мг альцианового синего + 60мл 100% этанола + 40 мл ледяной уксусной кислоты). Одни сутки головастики отмывались в 100% этаноле, после чего окрашивались в растворе 2% КОН и ализаринового красного. Далее материал проводился через батарею смесей 2% КОН:глицерин в соотношениях 1:1 и 1:3, в каждом - 1 сутки. Затем выдерживались в глицерине до удаления лишнего красителя. Из материала извлекались конечности и их пояса, рассматривались под бинокуляром или микроскопом и фотографировались.
Были сделаны четыре вида замеров головастиков: длина туловища (от начала головы до хвоста), длина хвоста, общая длина тела (от начала головы до кончика хвоста), длина задней конечности.
На основе полученных замеров вычислялась средняя арифметическая для каждой стадии, после чего строились графики. Вычислялся средний прирост величин за одну стадию, и сравнивалась разница между нормой и экспериментом с кадмием и гормоном.
