3. Виготовлення поживних середовищ для виділення ентеробактерій.

Середовище Ендо використовується для виділення та диференціації ентеробактерій. Механізм дії середовища базується на здатності фуксину утворювати безбарвний комплекс з сульфітом. У процесі ферментації лактози, яка входить до складу середовища, виділяється ацетальдегід який зв'язує сульфіт при чому звільняється фуксин і надає колоніям малинового забарвлення.Середовище перед використанням не стерилізуються. Посів проводять поверхневим методом, культивування ведеться при 37°С, результат оцінюють через 18-24 год.

Середовище Кліглера

Готове середовище завдяки феноловому червоному має червоне забарвлення. Для аналізу середовище розливають по пробіркам та охолоджують під кутом для формування скосу та зони повного стовпчика. Посів на середовище здійснюють поверхневим штриховим методом та проколюванням. Після інкубації при 37°С протягом 24 годин культури які зброджують глюкозу спричиняють пожовтіння стовпчика, а ті що ферментують лактозу – пожовтіння скосу. При цьому синтез сірководню виявляється почорнінням у стовпчику.

Вісмут-сульфіт агар використовують для селективного виділення та диференціації сальмонели. Склад середовища спричиняє пригнічення росту сторонньої мікрофлори, а колонії які виросли мають зеленкувато-коричневий колір. При цьому стимулюється ріст сальмонел, а їх здатність до відновлення вісмуту дозволяє визначити їх за почорнінням колоній та середовища під ними. Посів здійснюється поверхневим методом, інкубація проводиться при 37°С протягом 48 годин.

Середовище Гісса використовується для диференціації мікроорганізмів за здатністю ферментувати цукри та спирти. Індикатор середовища, бромкрезоловий пурпуровий, при ферментації вуглеводу (спирту) та виділенні кислоти змінює забарвлення з фіолетового на жовте, що свідчить про здатність бактерій зброджувати даний вуглевод (спирт). Середовище напіврідке, посів здійснюється методом "проколювання" мікробіологічною петлею. Пробірки інкубують при 37°С протягом 24 годин, після чого оцінюють зміню кольору.

До складу середовища входить лише один певний вуглевод або спирт. Наразі, ТОВ "Фармактив" виробляє 12 найменувань середовища Гісса з наступними складовими:

Арабіноза ,глюкоза ,дульцин ,інозит ,ксилоза ,лактоза ,мальтоза ,манніт ,маноза рамноза ,сахароза ,сорбіт.

Середовище використовують для диференціації сульфітредукуючих клостридій. Готують суспензію зразку, який аналізують, осаджують тверду фазу і вносять над осадову частину суспензії в підготовлене стерильне середовище в пробірках при температурі близько 70°С. Пробірки інкубують при 37°С протягом 24-48 год. Клостридії здатні до відновлення сірки перетворюють сульфіт натрію (який у високій концентрації входить до складу середовища) у сірководень, який в свою чергу реагує з іонами заліза спричиняючи почорніння середовища.

При аналізі відсіюється аеробна мікрофлора, та частина вегетативних клітин які не витримують початкової температури середовища.