Этапы репликации:
Инициация – формирование репликативной вилки при участии ДНК-хеликазы и ДНК-топоизомераз, в итоге происходит разделение цепей ДНК, а приссоединенные SSB-белки препятствуют повторному соединению цепей. Молекула ДНК очень велика, поэтому инициация происходит в нескольких точках – точках инициации или ориджины репликации. Единица репликации эукариот - репликон – участок между соседними ориджинами.
Элонгация – синтез новой цепи ДНК, она начинается праймазой, которая синтезирует олигорибонуклеотиды – праймеры. Далее синтез дочерней цепи ДНК происходит за счет полимеразы от 5` к 3` концу. Новые цепи синтезируются неодинаково. На 1ой цепи ДНК 5`- 3`цепь растет непрерывно, быстро и называется лидирующей. На другой нити ДНК новая цепь синтезируется в виде фрагментов Оказаки – эта цепь называется отстающей.
Терминация – удаление праймеров и завершение формирования отстающей цепи ДНК. Праймеры удаляются эндонуклеазой, а на их месте ДНК-полимераза достраивает ДНК. Сшивание фрагментов происходит за счет ДНК-лигазы. В итоге на каждой матричной ДНК формируется 2 дочернии копии ДНК.
1
– хеликазы; 2 – дестабилизирующие белки;
3 – лидирующая цепь ДНК; 4 - синтез
фрагмента Оказаки; 5 – затравка заменяется
нуклеотидами ДНК и фрагменты сшиваются
лигазами; 6 – ДНК-полимераза; 7 –
РНК-праймаза, синтезирует РНК-затравку;
8 – РНК-затравка; 9 – фрагмент Оказаки;
10 – лигаза, сшивающая фрагменты Оказаки;
11 – топоизомера, разрезающая одну из
цепей ДНК.
43. Биосинтез рнк (транскрипция). Условия и этапы транскрипции.
Транскрипция
– синтез
РНК из ДНК, в итоге бразуются первичный
транскрипты мРНК, тРНК, рРНК. Транскрипции
подвергается только участок ДНК, в
процессе используется матричная нить
и кодирующая. Единица транскрипции у
эукариот – транскриптон, у прокариот
– оперон.
Катализирует синтез РНК фермент РНК-полимераза. Транскрибируемый участок ДНК ограничен со стороны 3’-конца промотором, – участком с которым связывается РНК-полимераза, со стороны 5’-конца – терминатором – участком, в котором прерывается синтез РНК.
В составе пре-иРНК могут содержаться интроны (неинформативные участки) и экзоны (информативные участки).
Условия транскрипции:
Матрица
Рибонуклеозидтрифосфат НТФ (УТФ, ГТФ,ЦТФ,ТТФ)
Ферменты:
ДНК-зависимая РНК-полимераза
РНК-полимераза 1→ рРНК
РНК-полимераза2→мРНК
РНК-полимераза3→тРНК
РНК-полисмеразы – олигомеры, состоящие из нескольких субъединиц: 2α,β,β`,σ.
Этапы Транскрипции:
Инициация начинается с активации промотора белком – ТАТА-фактор. Этот белок взаимодействует с нуклеотидной частью промотора, который называют ТАТА-бокс. ТАТА-фактор облегчает взаимодействие промотора с РНК-полимеразой и расплетение ДНК. В результате образуется Транскрипционная вилка.
Элонгация. Факторы элонгации увеличивают активность РНК-полимеразы, происходит синтез РНК. Синтез молекулы РНК осуществляется от 3` к 5` концу ДНК т.о. сама нить РНК растет от 5` к 3` концу.
Терминация. Когда РНК-полимераза достигает терминирующего сайта транскрипция останавливается. Первичный транскрипт – премРНК отделяется от матрицы с помощью фактора терминации.
