Определение количества гемоглобина (нь) в крови колориметрическим методом.

Гемометр Сали.

1 — пробирки со стандартным раствором хлорида гематина; 2 — пробирка для оп­ределения количества гемоглобина; 3 — пи­петка для крови; 4 — пипетка для воды; 5 — палочка для размешивания.

Шаг 1 - Определяют уровень НЬ в крови колориметрическим методом (color — цвет), основанном на сравнении цвета исследуемого раствора с цветом стандартного, содержащего известную кон­центрацию вещества. Для этого используется гемометр Сали. Количество НЬ определяют по уровню жидкости в градуированной пробирке. Цифры на средней пробирке гемометра, стоящие на уровне нижнего мениска получен­ного раствора гематина, показывают абсолютное содер­жание НЬ в исследуемой крови.

Шаг 2 - Норма Нв в крови у мужчин: 130 – 160г/л, у женщин: 120 – 140г/л.

№ 7

Определение скорости оседания эритроцитов (соэ) по методу Панченкова.

Шаг 1 - СОЭ определяют с по­мощью прибора Панченкова (рис.). Прибор пред­ставляет собой штатив, в котором в вертикальном поло­жении зажимают толстостенные капиллярные пипетки диаметром 1 мм. Капиллярные пипетки градуированы в миллиметрах от 0 до 100 и имеют 3 метки: «К» (кровь) и «0» (стоят на уровне 100 мм от нижнего конца) и «Р» (реактив — на уровне 50 мм). СОЭ определяется при вертикальном положении трубочек. Нижний конец капилляра прижимают к мягкой резиновой пластинке (проб­ке), чтобы кровь не выливалась. Через 1 ч отмечают высоту образовавшегося верхнего прозрачного слоя плазмы (в миллиметрах). Она определяет величину СОЭ. СОЭ изменяется в течение 1 ч, поэтому нельзя проводить вычисление за какую-то часть от общего времени с пере­расчетом на 1 ч.

Шаг 2 - Норма СОЭ в крови у мужчин: 3 –7мм/ч, у женщин: 4-5 мм/ч.

№ 8

Определение продолжительности кровотечения (уколочная проба по Дюке).

Шаг 1 - Сделать глубокий укол в мякоть пальца. Через каждые 30 с к кровоточащей точке прикасаться последовательно очередным сектором фильтровальной бумаги так, чтобы в каждом секторе был только один отпечаток. Отметить время, когда фильтровальная бумага перестанет впитывать кровь. Прекращение кровотечения обусловлено образованием белого тромба.

Шаг 2 - Нормальная продолжительность кро­вотечения 2—4 мин.

№ 9

Определение резус-фактора [Rh0 (d)].

Шаг 1 - Кровь в течение 3—5 мин центрифугировать. Жидкость сверху над осадком слить, а эритроциты использовать для определения Rh_o(D). Для этого взять 3 пробирки, в пер­вую поместить каплю резус-положительных, во вторую — каплю резус-отрицательных и в третью — каплю исследу­емых эритроцитов. Затем в каждую пробирку добавить по капле стандартной сыворотки антирезус, содержащей агглютинин антирезус.

В первой контрольной пробирке, куда были внесены резус-положительные эритроциты, реакция агглютинации будет всегда, так как эритроциты, содержащие резус-фактор, будут агглютинироваться антирезус-агглютинина­ми. Во второй контрольной пробирке, где находились резус-отрицательные эритроциты, реакции агглютинации не будет.

Шаг 2 - Если в пробирке с эритроцитами исследуемой крови произошла реакция агглютинации, значит кровь Rh+. Если же в пробирке с эритроцитами исследу­емой крови агглютинации нет, значит, кровь Rh—. Эрит­роциты большинства людей имеют Rh_o(D), поэтому реак­ция агглютинации будет наблюдаться в 85% случаев ис­следования крови.

№ 10