- •1. Порядок приготовления питательных сред.
- •2. Задачи и цели биотехнологии.
- •3. Методы сохранения посевного материала.
- •4. Этапы подбора необходимых для культивирования форм микроорганизмов с заданными свойствами.
- •5. Принципы действия биореактора.
- •6. Три группы энтомопатогенных препаратов
- •7. Методы стерилизации оборудования, питательных сред и воздуха биореакторов.
- •8. Получение посевного материала и приготовление питательных сред при глубинном методе культивирования биообъектов.
- •9. Производственное культивирование при глубинном методе.
- •10. Метод ткани-няньки.
- •11. Методы получения каллуса фасоли из изолированных кончиков корешков
- •12. Охарактеризовать гемицелюлозу как субстрат
- •13. Основные методы стерилизации органов растений при приготовлении каллусов
- •14. Классификация антибиотиков, их роль в с/х и пищевой промышленности
- •15. Перечислить и охарактеризовать стадии очистки ферментных препаратов
12. Охарактеризовать гемицелюлозу как субстрат
Гемицеллюлозы, основным компонентом которых служит ксилан (полимер, построенный из остатков ксилозы и небольшого количества арабинозы и глюкуроновой кислоты), это не только отход, отделяемый при гидролизе растительного сырья, но они имеют и самостоятельное значение в качестве биотехнологического сырья. Ксилан - второй по распространенности растительный биополимер. Химический гидролиз ксилана происходит с образованием веществ, токсичных для микроорганизмов. В связи с этим необходимо освоение ферментативного гидролиза ксилана.
Помимо применения растительных отходов создаются биотехнологические цепочки, когда отходы или побочные продукты одного биотехнологического процесса используются как дешевое сырье для другого. На отходах, остающихся при микробиологическом получении этанола, можно выращивать кормовые дрожжи. Разработан способ получения биомассы, при котором на гидролизатах растительного сырья выращивают дрожжи, а фильтрат культуральной жидкости затем идет на синтез грибного белка. Возможно производство дрожжевой массы на фильтратах культуральной жидкости грибов. Предполагают использовать биомассу одного вида организма как субстрат для культивирования другого.
13. Основные методы стерилизации органов растений при приготовлении каллусов
|
Метод |
|||
Ткань |
Престерилизация |
Стерилизация |
Постстерилизация |
Посадка на агар и получение каллуса |
Семена |
Погрузить материал в абсолютный этанол на 10 сек. или в раствор NaOCl (1-1,5% активного хлора) на 15 минут. Промыть в стерильной дистиллированной воде. (Вымачивать в течение ночи в стерильной дистиллированной воде для изолирования корешка и др. органов) |
Отобрать семена с интактными семенными оболочками. Погрузить в NaOCl (1-1,4% активного хлора) на 20 мин. Другими стерилизующими агентами могут служить 10% (масса к объему) бромированная вода. Желательно использовать 0,05% детергент (например, типол), особенно для семян с ше-роховатой поверхностью |
Промыть три раза в стерильной дистиллированной воде |
1. Очень мелкие семена для индукции каллуса или проращивания могут быть посажены целиком на поверхность агаризованной среды. 2. Семена могут быть проращены на смоченной стерильной водой стерильной фильтровальной бумаге или на культуральной среде без регуляторов роста. Это дает хороший исходный стерильный корень, побег или лист для получения каллуса |
Листья и стебли |
|
|
|
3.У более крупных семян можно отсечь кончики зародышевого корешка или зародышевой почки и непосредст- |
|
|
|
|
венно перенести их на среду для индукции каллуса. Посадить вертикально в агаризованную среду для индукции каллуса |
Запасающие органы (например, клубни картофеля или артишока) |
Отмыть дочиста под струей водопроводной воды |
Погрузить в NaOCl (1-1,4% активного хлора) на 30 мин |
Промыть три раза в стерильной дистиллированной воде |
Стерильным скальпелем удалить кожуру. Изолировать мелкие диски ткани с помощью пробкобура или скальпеля. Для индукции каллуса поместить их на поверхность агаризованной среды лицевой стороной вниз |