7. Методы стерилизации оборудования, питательных сред и воздуха биореакторов.

Метод	Краткая характеристика	Область применения
Термический	Нагревание объекта стерилизации на время, достаточное для гибели всей микробной популяции	Основной метод стерилизации биореактов, питательных сред и добавок, вспомогательного оборудования и фильтров для стерилизации воздуха
острым паром	Пропускание струи пара под высоким давлением в аппарат с питательной средой с помощью барботера или парового инжектора	Стерилизация аппаратов и сред
глухим паром	Пар изолирован от стерилизуемых сред металлическими стенками (пар пропускают по змеевику)	Стерилизация некоторых питательных сред или их компонентов (например, масел)
паром, генерируемым в самом сосуде, подлежащем стерилизации	Используют электронаг-реватели, вводимые в стерилизуемый объем	Стерилизация биореакторов и сред, если последние не пригорают к нагревателю
в автоклаве	Стерилизуемые материалы вносят в автоклав – аппарат, где вода доводится до кипения при повышенном давлении	Стерилизация некоторых лабораторных биореакторов, небольших объемов жидкости, мелких элементов вспомогательного оборудования
Химический	Применяют химические дезинфицирующе агенты (-пропиолактон, окись этилена, окись пропилена), самопроизвольно разлагающиеся в воде без образования токсических продуктов	Стерилизация питатель-ных сред. В основном для лабораторных биореакторов
Фильтрационный	Пропускание газов или жидкостей через мелкопористые или волокнистые фильтры, задерживающие микроорганизмы	Стерилизация поступающего в биореактор воздуха или газа, в меньшей степени используют как мягкий метод стерилизации жидких сред без взвесей
Радиационный	Обработка ультрафиолетовым и радиационным излучением	Не получил распространения

8. Получение посевного материала и приготовление питательных сред при глубинном методе культивирования биообъектов.

Глубинный метод культивирования заключается в выращивании микроорганизмов в жидкой питательной среде. Он технически более совершенен, чем поверхностный, так как легко поддается механизации и автоматизации. Весь процесс должен проводиться в строго асептических условиях, что с одной стороны, является преимуществом метода, нарушение асептики часто приводит к прекращению образования фермента.

Получение посевного материала. Готовят также глубинным способом. Вид посевного материала зависит от продуцента: для грибов и актиномицетов - мицелиальная вегетативная масса, а для бактерий - молодая растущая культура на начальной стадии спорообразования. Постадийное увеличение массы продуцента в четыре ступени: - исходная культура продуцента; - маточная культура, выращенная в колбах на качалке; - посевная культура, выращенная в инокуляторе; - посевная культура, выращенная в посевном аппарате.

Объем посевного материала зависит от физических особенностей продуцента. Он резко возрастает, до 5-20 %, если продуцент размножается только вегетативно, и сокращается до 1 %, если происходит обильное спороношение. Объем посевного аппарата составляет до 10 % от объема промышленного ферментера. При использовании слишком молодой посевной культуры процесс затягивается.

Участок приготовления среды изолируют от других производственных помещений, чтобы загрязненное микроорганизмами сырье не попало в основное производство. На предприятии среды готовят централизованно в отдельном здании.

Методы приготовления питательных сред зависят от состава компонентов. Для некоторых требуется предварительная обработка: измельчение, отваривание, экстрагирование, гидролитическое расщепление. Затем готовые к растворению компоненты подают при постоянном перемешивании через дозирующие устройства в емкость для приготовления среды. Необходимо соблюдать последовательность введения в смесь отдельных компонентов. Емкости и аппараты должны быть антикоррозионными. Передачу жидких потоков осуществляют насосами, самотеком или продавливанием сжатым воздухом.