- •1. Порядок приготовления питательных сред.
- •2. Задачи и цели биотехнологии.
- •3. Методы сохранения посевного материала.
- •4. Этапы подбора необходимых для культивирования форм микроорганизмов с заданными свойствами.
- •5. Принципы действия биореактора.
- •6. Три группы энтомопатогенных препаратов
- •7. Методы стерилизации оборудования, питательных сред и воздуха биореакторов.
- •8. Получение посевного материала и приготовление питательных сред при глубинном методе культивирования биообъектов.
- •9. Производственное культивирование при глубинном методе.
- •10. Метод ткани-няньки.
- •11. Методы получения каллуса фасоли из изолированных кончиков корешков
- •12. Охарактеризовать гемицелюлозу как субстрат
- •13. Основные методы стерилизации органов растений при приготовлении каллусов
- •14. Классификация антибиотиков, их роль в с/х и пищевой промышленности
- •15. Перечислить и охарактеризовать стадии очистки ферментных препаратов
3. Методы сохранения посевного материала.
При промышленном культивирование клеток в биореакторах идет процесс постепенного вытеснения менее приспособленных форм более приспособленными, часто менее продуктивными по отношению к вырабатываемым веществам. Он получил название автоселекции. В связи с этим встает проблема длительного хранения клеток без утраты ценных свойств. Это возможно, если резко затормозить все протекающие в них жизненные процессы. Существуют следующие методы хранения:
Лиофильное высушивание (обезвоживание после замораживания при температуре –40 – 600С и ниже). Применяется в отношении продуцентов антибиотиков.
Высушивание на воздухе в стерильной среде (на почве, бумаге, дисках агар – агара и т.д.).
Сохранение спор (пригоден для спорообразующих бактерий рода Bacillus).
Криоконсервация – глубокое замораживание клеток с их последующим хранением в жидком азоте ( - 1960С) или в парах азота ( – 155).
4. Этапы подбора необходимых для культивирования форм микроорганизмов с заданными свойствами.
Подбор необходимых для культивирования форм микроорганизмов с заданными свойствами включает несколько этапов:
Выделение микроорганизмов. Отбираются пробы из мест обитания микроорганизмов (почва, растительные остатки и т.д.).
Получение накопительных культур. Образцы вносят в жидкие питательные среды специального состава, создают благоприятные условия для развития продуцента (температура, PH, источники энергии, углерода, азота и т.д.).
Выделение чистых культур. На плотные питательные среды засевают образцы проб из накопительных культур. Отдельные клетки микроорганизмов на плотных питательных средах образуют изолированные колонии или клоны, при их пересеве получаются чистые культуры, состоящие из клеток одного вида продуцента.
Другой путь подбора микроорганизмов - из имеющихся коллекций. Например, продуцентами антибиотиков чаще являются актиномицеты, этанола – дрожжи.
Клон – культура, полученная из одной клетки, чистая культура – совокупность особей одного вида микроорганизмов, штаммы культуры выделенные из различных природных сред или из одной среды в разное время.
4.Определение способности синтезировать целевой продукт – главный критерий при отборе продуцентов. Микроорганизмы должны:
1). Обладать высокой скоростью роста.
2). Использовать для жизнедеятельности дешевые субстраты.
3). Быть устойчивыми к заражению посторонней микрофлорой.
Одноклеточные организмы характеризуются более высокими скоростями синтетических процессов, чем высшие растения и животные. Интерес представляют фотосинтезирующие микроорганизмы, использующие энергию света, способные к усвоению атмосферного азота. Выгодны термофильные микроорганизмы. Их использование снижает дополнительные затраты на стерилизацию промышленного оборудования. Скорость роста и обмен веществ у этих организмов в 1,5–2 раза выше, чем у мезофилов. Синтезирующие ими ферменты устойчивы к нагреванию, действию кислот, органических растворителей.