1. Порядок приготовления питательных сред.

В настоящее время выпускают несколько типов готовых сред (Уайта, МС, Хеллера) в виде сухих порошков, содержащих все необходимые компоненты, за исключением регуляторов роста сахарозы и агара. Они дороги, а их применение ограничено для исследований, в которых необходимо варьирование компонентов сред.

Большинство сред из отдельных компонентов готовят так же, как, например, модифицированную среду ШХ.

1.Готовят исходные растворы основных неорганических солей, микроэлементов, витаминов и регуляторов роста растений.

2.Для приготовления 1 л. жидкой среды в стакан объемом 1 л., стоящий на магнитной мешалке, пипеткой переносят необходимый объем каждого из исходных растворов.

3.Добавляют сухие мезоинозит и сахарозу; полностью растворяют их, добавляя при необходимости немного воды.

4.Дистиллированной водой доводят объем до 950 мл.

5.Доводят рН до 5,8-5,9 с помощью 5м NaOH.

6.Переносят среду в мерный цилиндр или колбу объемом 1 л. и доводят до метки дистиллированной водой.

7.Переносят среду обратно в колбу и перемешивают на мешалке до полного растворения.

8.Разливают среду порциями (75-100 мл.) в чистые конические колбы объемом 250 мл, закупоривают ватными пробками, накрывают сверху алюминиевой фольгой и автоклавируют в течение 15 мин при 120 ⁰С (1,06 кг/см ²).

Необходимо помнить, что растворы неорганических веществ могут храниться в течение 1 месяца при + 4⁰С, тогда как витамины следует разлить порциями по 10 мл и хранить в замороженном состоянии при – 20 ⁰С.

Минимальное время, необходимое для стерилизации среды способом автоклавирования, зависит от объема среды в колбе. Например, для объемов 250-500 мл автоклавирование проводят в течение 25 минут при 120 ⁰ С. регуляторы роста – зеатин из цитокининов и гиббереллины термолабильны, их нельзя автоклавировать. Готовят среду без них. После того как колба остынет (для агаризованных сред до 40 ⁰ С), добавляют раствор термолабильного компонента.

Перед стерилизацией необходимо осветлить раствор, пропустив его через фильтр из пористого стекла № 3.

Для приготовления полутвердых сред агар в готовую среду вносят перед автоклавированием. Нужно растворить его в воде с подогревом до внесения остальных компонентов среды.

Чтобы убедится в отсутствии в среде бактериального заражения, ее оставляют примерно на 4 дня при 25 ⁰С. При необходимости хранят при 4 ⁰С.

2. Задачи и цели биотехнологии.

Биотехнология – это новая, сравнительно недавно получившая широкое развития наука о практическом использование различных биологических (генов, клеток, тканей, микроорганизмов, растений и животных ) с целью получения антибиотиков, ферментов, кормовых белков, биоудобрений, безвирусных растений новых сортов растений и животных, переработки сырья, промышленных и сельскохозяйственных отходов, очистки сточных вод и газовоздушных выбросов и так далее.

Основная цель биотехнологии – промышленное использование биологических процессов и агентов на основе получения высокоэффективных форм микроорганизмов, культур клеток и тканей растений и животных с заданными свойствами. Биотехнология возникла на стыке биологических, химических и технических наук.

К первоочередным задачам современной технологии относятся - создание и широкое освоение:

1) новых биологически активных веществ и лекарственных препаратов для медицины (интерферонов, инсулина, гормонов роста, антител);

2) микробиологических средств защиты растений от болезней и вредителей, бактериальных удобрений и регуляторов роста растений, новых высокопродуктивных и устойчивых к неблагоприятным факторам внешней среды гибридов сельскохозяйственных растений, полученных методами генетической и клеточной инженерии;

3) ценных кормовых добавок и биологически активных веществ (кормового белка, аминокислот, ферментов, витаминов, кормовых антибиотиков) для повышения продуктивности животноводства;

4) новых технологий получения хозяйственно–ценных продуктов для использования в пищевой, химической, микробиологической и других отраслях промышленности;

5) технологий глубокой и эффективной переработки сельскохозяйственных, промышленных и бытовых отходов, использования сточных вод и газовоздушных выбросов для получения биогаза и высококачественных удобрений.