3.3.2.Метод определения электропроводимости тканей.

С помощью разработанного нами прибора, состоящего из мил аА, батарейки на 4,5 В и двух электродов, закрепленных на плекс лы определяли электропроводимость (электросопротивляемость) азличных расстояниях в радиальных направлениях от нее, кот лектропроводимостью ткани здоровой лапы (табл.3.3.1.3).

3.3.3. Микробиологическое исследование.

У животных с проникающими ранениями на четвертые сутки после предварительного промывания раны теплым физиологическим раствором от крови и раневого детрита мы брали мазок с раневой поверхности, который помещали в сахарный бульон. После переноса микробной флоры на среды обогащения определялся микробиологический пассаж (табл. 3.3.1.1, 3.3.1.2, 3.3.1.3).

3.3.4.Исследование тканей животных на содержание газа с8 (динитрилортохлорбензальмалоновой кислоты).

С целью изучения динамики распространения газа С8 в тканях организма животного использовалась специально разработанная нами методика хромотографического определения данного вещества.

ИССЛЕДОВАНИЕ ТКАНЕЙ ЖИВОТНЫХ НА СОДЕРЖАНИЕ ГАЗА С8

(ДИНИТРИЛОРТОХЛОРБЕНЗАЛЬМАЛОНОВОЙ КИСЛОТЫ)

Представленные образцы;

1. Мышечная ткань правой задней лапы кроликов (2 штуки), взятая из области раны через 3 суток после отстрела, и мышечная ткань левой задней лапы этих же животных, взятая в аналогичных условиях в качестве контроля.

2. Мышечная ткань правой задней лапы кроликов (3 штуки), взятая из области раны через 6 суток после отстрела, и мышечная ткань левой задней лапы этих же животных, взятая в аналогичных условиях в качестве контроля.

3. Мышечная ткань собаки, взятая немедленно после выстрела газовым пистолетом с соответствующим контролем (интактная ткань другой лапы).

Подготовка пробы

1. Ткани гомогенизировали в стеклянном гомогенизаторе с тефлоновым пестиком в фосфатном буфере с рН=7,3. В гомогенате определяли белок биуретовым методом.

2. К 1 мл гомогената добавляли 1 мл высаливателя насыщенный раствор МаС1) и проводили 3-кратную жидкофазную экстракцию пятью мл смеси хлороформ-изопропанол (9:1) в течение 5 минут при 60 С. Экстракт обводняли безводным сульфатом натрия и выпаривали при 80 С досуха.

3. У собаки и одного из кроликов, умерщвленного через 6 суток после нанесения травмы (с открытой раной), исследовали не только гомогенат, но и высушенные образцы тканей, которые подвергали обработке, описанной в п.2.

Хроматографическое определение газа СS

Определение СS проводили на газовом хроматографе "Хром-5" (Чехословакия) с колонкой из нержавеющей стали (2м Х Змм), заполненной Хроматоном МА\У- ОМС8 (обработанный кислотой и силанизированный) с нанесенной неподвижной жидкостью полиметилсилоксанового олигомера в количестве 15%.

При определении С8 в тканях животных был разработан следующий режим хроматографического определения:

Температуры испарителя, детектора 320 С и 325 С соответственно. Расходы газа-носителя, воздуха, водорода 45 мл/мин.,255 мл/мин., 30 мл/мин. соответственно. Хроматографирование проводили при режиме программирования температуры от 160 С до 210 С при градиенте температуры 20 С/мин.

Детектор ПИЦ.

Детектирование проводилось с помощью системы хроматографического анализа, разработанной в Самарском техническом университете.

Качественную информацию об анализируемом веществе получали из абсолютных и относительных величин удерживания (время удерживания и удерживаемый объем).

Количественную обработку сигнала проводили методом внутреннего стандарта. В качестве внутреннего стандарта использовали раствор нафталина в хлороформе с концентрацией 0,02 г/мл.

Кроме того, для СS были рассчитаны абсолютные, относительные и интерполяционные хроматографические величины, а также линейные и логарифмические индексы удерживания относительно углеводородов ряда алкана.

Количество СS в ткани рассчитывали на мг белка гомогената или на 1 г сухой ткани (табл.3.3.4.1.)

Результаты хроматографического исследования Таблица 3.3.4.1.
	Вид, номер, серия	Время взятия материала	Содержание газа в тканях
			мг СS/мг б/гомог.	Мг СS/1г сух. Ткани
	1 кролик контр.образец	6 суток	0,19* 10-2	-
	1 кролик опытн.образец	6 суток	1,7510-2	-
	2 кролик контр.образец	3 суток	4,42*10"2	-
	2 кролик опыта, образец	3 суток	6,71*10
	3 кролик контр.образец	3 суток	0,37*10
	3 кролик опытн.образец	3 суток	5,13*10
	5 кролик контр.образец	6 суток	0,12*10
	5 кролик опытн.образец	6 суток	1,01*10
	6 кролик контр.образец	6 суток	0,32*10	0,139
	6 кролик опытн.образец	6 суток	0,92*10	- 1,024
	собака контр.образец	1,5 часа	0	-
	собака опытн.образец	1,5 часа	4,885	-
	собака опыт. Образец	1,5 часа	-	4,885