Лектиновый путь активации системы комплемента

Инициируется маннозосвязывающим белком – лектином крови, структурным аналогом С1q. Маннозосвязывающий белок с маннозой поверхности микробной клетки с последующим расщеплением С4, С2 компонентов комплемента и образованием С3-конвертазы классического пути (С4вС2в).

Белки-ингибиторы

Их классифицируют по месту их действия:

1. ингибиторы жидкой фазы С1, С3в;

2. ингибиторы внеклеточного матрикса;

3. клеточные ингибиторы, среди которых выделяют рецепторы компонентов комплемента (CR1, CR2): на фагоцитах, эритроцитах и других клетках. Они участвуют в удалении компонентов системы комплемента.

Биологическое значение системы комплемента

1. Выполняет эффекторные функции в гуморальном звене иммунитета, вызывая цитолиз по комплемент-АТ-зависимому пути.

2. АТ не только вызывают цитолиз, но и опсонизацию АГ – объектов фагоцитоза (опсонины С3в, С4в и т.д.).

С 3в

АГ

фагоцит

3. Комплемент участвует в элиминации ЦИК через С3в в составе ЦИК и CR1, которые присутствуют на эритроцитах.

4. Комплемент участвует в инициации воспаления. Главное значение принадлежит С3а, С4а, С5а – это анафилотоксины, прикрепляющиеся к тучным клеткам и вызывающие их активацию, дегрануляцию. Они же являются еще и хемоаттрактантами – привлекают к себе лейкоциты. Тучная клетка выделяет гистамин – провоспалительное вещество. Лейкоциты выделяют: ПГ, ЛТ, АФК, провоспалительный цитокины (TNF, ИЛ1, ИЛ6).

Лабораторные методы оценки системы комплемента

1. Определение общей активности комплемента по СН50 (норма 60-80 единиц).

2. По показаниям можно определить содержание или активность каждого из компонентов системы комплемента с помощью ИФА.

Иммунологические реакции второго поколения

Среди них выделяют РСК и реакцию иммунного лизиса.

Реакция иммунного лизиса

Принцип реакции иммунного лизиса: при любом взаимодействии АГ и специфических АТ в среде, где присутствует сложная система сывороточных белков, называемая комплементом, происходит обязательное связывание комплемента, что феноменологически проявляется уменьшением содержания свободного комплемента в среде и лизисом АГ, если последний является клеткой. Такой вариант реакции называется реакцией иммунного лизиса. Если АГ неклеточный (вещество), то хотя связывание комплемента происходит, и количество его уменьшается в среде, видимых изменений не происходит.

Обязательным неспецифическим условием реакции иммунного лизиса является присутствие комплемента в достаточном количестве. Чаще всего в качестве комплемента используют сыворотку крови морской свинки, которая содержит большое количество комплемента. В отдельных случаях применяют кровь кролика, человека (IV).

АГ	АТ	Неспецифические условия	Феномен	Технические варианты	Примеры
Клеточ-ный	Ig A, M, G (цитолизи-ны)	Наличие комплемента	Лизис АГ клеточного характера	Ин виво Ин витро: в жидкой фазе В лунках планшета Ин витро в геле	Реакция Исаева-Пфайфера для идентификации холерного вибриона (исследуема культура вибриона + диагностическая сыворотка вводится в брюшную полость морской свинки) Учет под микроскопом по цитолизу вибриона Реакция гемолиза: исследуемые эритроциты + сыворотка, содержащая АТ к эритроцитам + комплемент. Положительная реакция – «лаковая» кровь. Определение HLA АГ (лимфоцитов): исследуемые лимфоциты+ диагностические сыворотки+ комплемент + эозин. Учет реакции микроскопический. Реакция Йерне для определения АТ-продуцирующих клеток в эксперименте. Реакция радиального гемолиза для диагностики краснухи. Эритроциты, сенсибилизированные вирусными АГ, и комплемент вводят в гелевую среду, исследуемую сыворотку вносят в лунки в толщу агара, появляются зоны гемолиза

Реакцию радиального гемолиза ставят в лунках геля из агара, содержащего ЭБ и комплемент. После внесения в лунки геля гемолитической сыворотки (АТ против ЭБ) вокруг них в результате радиальной диффузии АТ, образуется зона гемолиза. Таким образом, можно определить активность комплемента и гемолитической сыворотки, а также АТ в сыворотке крови у больных гриппом, краснухой, клещевым энцефалитом. Для этого на эритроцитах адсорбируют соответствующие АГ вируса, а в лунки геля, содержащего данные эритроциты, добавляют сыворотку крови больного. Противовирусные антитела (АТ) взаимодействуют с вирусными антигенами, адсорбированными на эритроцитах, после него к этому комплексу присоединяются компоненты комплемента, вызывая гемолиз. Например, Ig G против вируса краснухи обнаруживают по лизису эритроцитов, связанных с антигеном вируса краснухи и суспендированных с комплементом в агарозном геле.

Реакция связывания комплемента

Предложена Ж.Бордэ и О.Жангу в 1901 году. Используют для серодиагностики бактериальных инфекций. Антиген неклеточной природы. Компоненты реакции: АГ+АТ+комплемент+индикаторная система (ЭБ в качестве АГ, в качестве АТ – стандартная гемолитическая сыворотка, содержащая АТ к ЭБ).

Реакция связывания комплемента заключается в том, что при соответствии друг другу антигенов и антител они образуют иммунный комплекс, к которому через Fс-фрагмент антител присоединяется комплемент (С), т. е. происходит связывание комплемента комплексом антиген-антитело (рис. 2.22).

Если же комплекс антиген-антитело не образуется, то комплемент остается свободным (рис. 2.23). РСК проводят в две фазы: 1 -я фаза - инкубация смеси, содержащей антиген + антитело + комплемент; 2-я фаза (индикаторная) - выявление в смеси свободного комплемента путем добавления к ней гемолитической системы, состоящей из эритроцитов барана и гемолитической сыворотки, содержащей антитела к ним. Если в 1-й фазе реакции при образовании комплекса антиген-антитело происходит связывание им комплемента, то во 2-й фазе гемолиз сенсибилизированных антителами эритроцитов не происходит (реакция положительная). Интенсивность задержки гемолиза оценивается по 4-ех крестной системе, при этом полное отсутствие гемолиза обозначается ++++. Если антиген и антитело не соответствуют друг другу (в исследуемом образце нет антигена или антитела) и комплемент остается свободным, то во 2-й фазе он присоединяется к комплексу эритроцит - антиэритроцитарное антитело, вызывая гемолиз (реакция отрицательная). РСК применяют для диагностики многих инфекционных болезней, в частности сифилиса (реакция Вассермана).