3. Проба на наличие сульфитов

Метод: использование коммерчески доступного показателя уровня сульфитов (например, Merckoquant 10013, фирмы Merck, г. Дармштадт, Германия); ! свежая моча.

Проба на содержимое сульфитов разрешает распознать повышение уровня их экскреции с мочой, что может быть маркером первичного дефицита фермента сульфитоксидазы или его кофактора - молибдена. Дети с одним из этих нарушений страдают от тяжелой формы эпилептической энцефалопатии, которая манифестирует в неонатальном периоде или в детстве. Тест на наличие сульфитов в моче должен быть составной частью основных исследований у любого ребенка с невыясненной задержкой психомоторного развития, в особенности в сочетании с тяжелой формой эпилепсии. В том случае, если используются несвежие пробы мочи, тест может иметь ложно отрицательный результат.

4. Днфг-тест (тест с динитрофенилгидразином)

Метод: 0,5 мл мочи + прибавить 0,5 мл 0,2% раствора динитрофенилгидразина (ДНФГ).

ДНФГ вступает в реакцию с 2-оксикислотами, такими, как оксикислоты с разветвленной боковой цепью. Через 5 минут наблюдается выпадение смеси в осадок. Слабое помутнение указывает на следовое количество 2-оксикислот. Наличие вяжущего осадка, который имеет желтый, оранжевый или красный цвета, указывает на положительный результат. ДНФГ-тест можно использовать для постановки диагноза болезни «кленового сиропа» у грудных детей в состоянии метаболической декомпенсации. Так как ДНФГ вступает также в реакцию с физиологическими кетоновыми телами, может возникнуть необходимость в удалении их с помощью нагревания мочи. Другой причиной ложно положительного результата может быть глюкозурия.

5. Тест на наличие восстанавливающих (редуцирующих) веществ в моче.

Метод: использование технически доступных тестовых таблеток (например, таблетки фирм Clinitest, Bayer, Leverkusen, Германия).

Повышенную экскрецию сахаров и других восстанавливающих веществ вызывают большое количество нарушений обмена. Их перечень приведен в таблице 1. Они легко распознаются с помощью технически доступных тестовых таблеток, которые в присутствие восстанавливающих веществ меняют цвет от желтого к красному.

Альтернативный метод: к 0,5 мл мочи прибавить 5 мл реактива Бенедикта. Смесь нагреть на протяжении 5 минут на кипящей водяной бане. Охладить 5-7 мин.

При наличии сахаров появляется зеленая, желтая или красная окраска жидкости с осадком на дне пробирки. Исходя из полученной интенсивности окраски реакция Бенедикта оценивается по шкале от 0 к ++++. Проба положительна при количестве глюкозы свыше 0,05 г% (Таблица 2):

Принцип метода основан на редуцирующих свойствах альдегидной группы глюкозы в щелочной среде. Как окислитель используют сернокислую медь, которая при восстановлении образовывает окрашенное соединение. Стабилизатором в пробе служит лимоннокислый натрий или калий. Реактив Бенедикта: в мерную колбу емкостью 1 литр прибавляют 300 мл дистиллированной воды, 173 г лимоннокислого натрия Na₃C₆H₅O₇ х 11H₂O (Na₃C₆H₅O₇ х 5H₂O – 132г; Na₃C₆H₅O₇ х 5,5 H₂O – 137г), 100 г безводного или 2-х кристаллического углекислого натрия Na₂CO₃ (Na₂CO₃ * 10H₂O – 266,6 г). Нагревают до растворения. Отдельно растворяют 17,3 г сернокислой меди (CuSO₄) в 100 мл дистиллированной воды. Смешивают оба раствора, непрерывно помешивая, и, после охлаждения, доливают до 1 литра дистиллированной водой.

Таблица 1.

Восстанавливающие вещества мочи.

Вещество		Нарушение / причина
Галактоза		Классическая галактоземия, дефицит галактокиназы, тяжелое заболевание печени (вторичная непереносимость галактозы)
Фруктоза		Неснпереносимость фруктозы, идиопатическая фруктозурия
4-ОН-фенилпируват		Тирозинемия I и II типов
Гомогентизиновая кислота		Алкаптонурия
Ксилоза		Пентозурия
Глюкоза		Сахарный диабет, цистиноз (синдром Абдергальдена-Фанкони)
Щавелевая кислота		Гипероксалурия
Салицилаты, аскорбиновая кислота		Лекарственные препараты
Мочевая кислота		Гиперурикурия
Гиппуровая кислота		Лечение гиперамониемии с помощью бензоата натрия
Лактоза	Во время лактации, в последнем триместре беременности
Креатинин	Высокие концентрации

Таблица 2.

Интерпретация теста на редуцирующие вещества в моче

Цвет пробы	Количество глюкозы, г%	Оценка реакции
Голубой	0	Отрицательный
Зеленый	0,25	Следы
Оливковый	0,5	+
Желто-зеленый	0,75	++
Желто-коричневый	1,0	+++
Оранжевый (красный)	2,0 и более	++++