1.По происхождению и составу:

•скопления вирионов вирусов;

•комплекс клеточных структур и компонентов формирующегося вириона (т. н. фабрики);

• клеточные структуры, в которых вирионы не обнаруживаются;

2. По локализации:

•ядерные

•цитоплазматические

3. По отношению к разным красителям:

• ацидофильные

• базофильные

Титрование вирусов по инфекционной активности. ЭД вируса, методика титрования и статистическая обработка результатов титрования (метод Кербера)

За инфекционный титр вируса принимают ЭД50 в 1мл вируссодержащем материале.

1ЭД50- количество вируса которое при введении четкому количеству жс вызывают эффект. Действия у половины тест-обьектов.

Инфекционный титр зависит от вида жс в которой вирус титруют, от эффекта действия по которой вирус титруют

Методика титрования:

1 этап- готовят последовательные 10 кратные разведения вирусов

2 этап- ставят биопробу на жс: для этого каждым разведением титруемого вируса заражают четное количество тест-обьектов, не менее 4. Эффект это летальность.

3 этап-результат бипробы: есть летальность или нет

4 этап-определяем титр инфекционности : а)сначало определяем в каком разведении 1 эд б)титр равен числу во сколько раз развели вирус, чтобы в полученном разведении содержалось 1 эд

Титрование вирусов по гемаглютинирующей активности. ГАЕ вируса, методика титрования и определение титра вируса

За титр примем количество вируса в мл. вируссодержащем материале.1ГАЕ=ткое количество вируса которое вызывает гемагглютинацию не менее чем на 2 креста или 50% эффект.

Методика титрования:

Реакцию ставят микрометодом в 96луночной полистерольной пластине с v-дном

1.в чистые лунки вносят разбавитель по 50 мкр

2.готовят последовательные двукратные разведения вируса

3.к каждому разведению добавляют равный оббьем 1% суспензии эритроцитов

4.одновременно ставят контроль эритроцитов на спонтанную ГА

5.реакцию ставят на контакт 20 минут, 20 градусов

6 учет результатов ГА

7 определение титра

А)Тга сначало определяют наибольшее изменение вируса с 1 ГАЕ(++)

Б)титр га равен числу восколько раз разведен вирус, чтобы в полученном разведении содержалось ед. на ГАЕ

Получение вторичного патматериала при лабораторной диагностике. Изоляция вируса, живые системы, признаки репродукции

Идентификация выделенного вируса: определение, методы РПД: признаки, задачи, компоненты, достоинства и недостатки

Серологические реакции как метод идентификации выделенного вируса: принцип, компоненты, учет результатов. РИФ: принцип, варианты, задачи, компоненты, достоинства и недостатки

Все серологические реакции различаются только по способу выявления образовавшегося комплекса

[Аг + Ат]

Антигены — это вещества, которые стимулируют иммунную систему организма к синтезу против них антител.

•К антигенам относятся в первую очередь органические полимеры (белки, пептиды, полисахариды), а также ряд других веществ.

Антитела — иммуноглобулины — содержатся в глобулиновой фракции крови. Антитела циркулируют в кровяном русле и секретируются клетками слизистых оболочек.

В результате реакции взаимодействия антигена с антителом происходит формирование иммунохимического комплекса. Необходимым условием успешного проведения анализа является полнота связывания реагентов.

Характеристика антител, определяющая прочность связывания Fab -фрагмента антитела с антигенной детерминантой, получила название аффинности.

Индикация комплекса [Аг + Ат]

•В РДП – это полоса преципитации

•В РТГА – это «пуговка»

•В РНГА – это «зонтик»

•В РСК – это гемолиз эритроцитов

•В РН – это отсутствие изменений в

живой системе

•В РИФ – свечение

•В ИФА – изменение окраски

субстратной смеси

Определение серотипа вируса ящура в РСК: принцип, задачи, компоненты, учет результатов

Современные методы идентификации вирусов на примере ИФА: принцип, варианты, задачи, компоненты, учет результатов

Методы индикации и идентификации гемагглютинирующих вирусов. РАГ,РТГА:принцип, задачи, компоненты, учет результатов

Эритроцитарные диагностикумы в диагностике вирусных инфекций : название, этапы производства, в какой реакции используются, принцип реакции, задачи, компоненты, учет результатов

Приготовление вирусных диагностикумов имеет свои особенности.

Диагностические антигены готовят, используя органы зараженных животных, то есть в таком случае речь идет об органных антигенах.

Если такие антигены готовят с использованием культур клеток, то получают культуральные антигены.

Основным их недостатком является содержание в своем составе балластных белков, в том числе белков других вирусов, которые могут быть в исходном сырье. Это влияет на специфичность и активность антигенов.

Эталонная серологическая реакция в диагностике вирусных болезней: принцип, задачи, компоненты, учет результатов, достоинства и недостатки

Определение индекса нейтрализации в РН: цель, принцип,компоненты, учет и статистическая обработка результатов

Методы индикации и идентификации гемадсорбирующих вирусов: РГАд, РТГАд: принцип, задачи, компоненты, учет результатов

ПЦР: принцип, задачи, компоненты, достоинства и недостатки, учет результатов

Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

ПЦР является наиболее чувствительным методом. Реакция обнаруживает вирусные НК. Реакция открыта в 1985 году в США.

Сутью метода является амплификация, т.е. увеличение числа копий строго определенных фрагментов молекул ДНК in vitro. ПЦР основана на амплификации ДНК при помощи ДНК-полимеразы, которая осуществляет синтез взаимо-комплементарных цепей ДНК начиная с 2-х праймеров (затравок)

Primer – фрагмент ДНК из 20-30 нуклеотидов. Синтезированный искусственно. Праймеры комплементарны противоположным цепям ДНК. Обычно при ПЦР ставят от 25 до 40 циклов в зависимости от возбудителя. Каждый цикл состоит из трех этапов.

1. Денатурация. 92-95 градусов С, 20-60 секунд. Происходит разрыв водородных связей цепей ДНК.

2. Отжиг – присоединение праймеров. 50-60 градусов С, 40-60 секунд. Происходит забрасывание праймеров, нуклеотидов и ДНК-полимеразы.

3. Элонгация – достраивание цепей ДНК. 68-72 градуса С, 40-60 секунд. Число цепочек ДНК удваивается. Образовавшиеся в первом цикле цепочки ДНК служат матрицами для последующих циклов и т.д. Таким образом в каждом цикле идет удвоение числа копий амплифицируемого участка, что позволяет за 25-40 циклов наработать 2²⁵-2⁴⁰ участков ДНК, что позволяет обнаружить их методом электрофореза.

В ПЦР используют праймеры из консервативных участков ДНК вируса, которые имеют уникальную последовательность для каждого возбудителя.

Методика постановки.

Из исследуемого материала выделяют НК, которую помещают в чистую пробирку и добавляют амплифицирующую смесь, которая состоит из:

• Буфера

• ДНК-полимеразы

• Раствора 2-х видов праимеров

• 4-х видов нуклеотидов

• Магний-хлорного катализатора

• Крезолового красного для визуальной оценки

• Доливают деионизированной воды.

• Сверху капают минеральное масло.

Пробирки помещают в програмируемый термостат-амплификатор и проводят амплификацию в автоматическом режиме по заданной программе для соответствующего вида возбудителя (2-3 часа). Одновременно ставят положительный и отрицательный контроль.

Регистрация результатов – детекция амплификонов. Проводят методом электрофореза в 1-2% агаровом геле в присутствии бромистого этидия, который соединяется с фрагментами ДНК и высвечивается в виде полосок при УФО (трансилюминатор).

Этапы ПЦР-анализа: цель, методика, компоненты каждого этапа(см. выше)

Амплификация: принцип, компоненты, оборудование

Доказательства этиологической роли выделенного вируса как этап лабораторной диагностики вирусных болезней: исследуемый материал, методы, учет результатов

Патологическим материалом следует считать материал, полученный от больных или павших животных, в котором предположительно находится воз-будитель (вирус), который вызвал заболевание, или антитела, как результат иммунного ответа.

Патологический материал отбирают с учётом следующих правил:

 от больных животных в острый период болезни на фоне выражен-ных клинических симптомов, от павших и вынужденно убитых - не позднее од-ного - двух часов с момента гибели или убоя («правило времени»);

 из тех органов, где развивался патологический процесс, с учётом тропизма вируса («правило место»);

 с соблюдением правил асептики и антисептики (используют одно-разовый или стерильный инструментарий, контейнеры с этикетками, на кото-рых указывают вид материала и вид или инвентарный номер животного, растворы антибиотиков широкого спектра действия и противогрибковых препара-тов);

 доставляют в лабораторию с нарочным и сопроводительным пись-мом не позднее 4-х часов после взятия в термосе со льдом или хладагентом, а также можно использовать консервирующие растворы (например, 50% раствор глицерина на физ.растворе) для кусочков органов и тканей. В сопроводитель-ном письме указывают хозяйство, ферму или отделение, вид животных, пред-варительный диагноз, вид и количество патматерила, какие исследования сле-дует провести, дату и фамилию ветеринарного врача, направившего патматери-ал. Патматериал, доставленный в лабораторию, условно считают первичным, т.е. полученным непосредственно от больных или павших животных подозри-тельных на вирусную болезнь.

От больных животных, подозрительных в заражении вирусом, отбирают различные виды патологического материала:

 Смывы, соскобы берут ватно-марлевым тампоном или жёстким од-норазовым зондом со слизистых оболочек носа, конъюнктивы глаз, ротовой по-лости, задней стенки глотки, половых органов, прямой кишки, клоаки у птиц (например, при подозрении на вирусные пневмоэнтериты КРС, трансмиссив-ный гастроэнтерит свиней, грипп птиц и др.) и помещают во флакон с транс-портной средой (физиологический раствор, рН 7,0-7,2) с антибиотиками.

 Поражённые участки кожи и слизистых оболочек (например, при подозрении на оспу – стенку папул или корочки; на ящур – стенку афт; на кож-ную форму чумы плотоядных - стенку папул или пустул).

 Фекалии непосредственно из прямой кишки (например, при подоз-рении на ротавирусную или коронавирусную инфекции и др.).

 Кровь цельная для выделения вируса (например, при подозрении на лейкоз КРС и др.).

 Кровь для получения парных проб сыворотки крови для обнаруже-ния и определения титра антител (первую пробу берут в острый период болезни (в начале болезни), вторую – через две недели в период выздоровления), кото-рые исследуют в лаборатории одномоментно после доставки второй пробы.

От трупов, подозрительных в заражении вирусом отбирают кусочки различного патологического материала весом не более 5-10 грамм:

 паренхиматозных органов (печень, селезёнка, почки);

 региональных лимфоузлов

 изменённых органов и тканей;

 органов и тканей, в которых можно обнаружить вирус (например, при инфекционном ринотрахеите КРС – абортплоды, плодные оболочки; при болезни Ауэски и ньюкаслской болезни – головной мозг; при бешенстве – го-лова целиком; при классической и африканской чуме свиней – лёгкие и т.д.);

Блок 3

Вирус бешенства

РНК-сод. Остро протекающая болезнь теплокровных животных, хар-ся пораж ЦНС. От места внедрения (обычно укуса) вирус движется к гол.мозгу по нерв. стволам. Это движение занимает от 10 дн. до неск.мес.в завис. от места внедрения, чем определ..большой инкуб.период. 3 ст: 1)продормальный - ↑чувств.к шуму, свету, прикосновениям, извращенный ап., напуш. зрения, ↑t (12ч-3дн). 2)возбуждение – буйство, ярость, судороги, парезы жеват. Мышц и м.глотки, сужение зрачка. 3)ст. параличей: ↓бол.чувств, наруш.деят. ц. дых. и кровообр, ↓t. Бывают тихие формы.

Пат.изм:при бешенстве неспецифичны.

Пат.мат:голова павшего животного если животное мелкое, - труп целиком. Лаб.диагн:.1-РИФ, РДП, световая микроскопия – тельца бабеша –негри., ИФА, ПЦР, биопроба, 2,3- бел.мыши – клиника. 4 – РИФ, РДП, свет.микроскопия (+ИФА, ПЦР). Профилактика: живая и инактивир.вакц., напр, Нобивак

Вирус болезни Ауески

Болезнь Ауески (псевдобешенство, зудящая чума, бешеная чесотка, инфекционный бульбарный паралич) – остро протекающая болезнь всех видов сельскохозяйственных животных, пушных зверей и грызунов. Характеризуется признаками поражения головного и спинного мозга, сильным зудом и расчесами.

Особый ущерб БА приносит в свиноводстве и пушном звероводстве. У пушных зверей это острая кормовая инфекция. Причиной является пища, которой нередко служат боенские отходы и субпродукты, полученные от больных животных или животных вирусоносителей.

Клиника. Инкубационный период – 1,5 суток – 10-12 дней в зависимости от метода заражения, вирулентности вируса и устойчивости животного. Вирус пантропен.

У свиней клиника протекает без признаков зуда. Тяжело болеют сосуны и отъемыши. Болезнь носит септический характер. Поросята обычно погибают через 4-12 часов. У поросят от 10 дней до 3-х месяцев первые признаки болезни – лихорадка (40-42), угнетение, слизистые истечения из носа. Позднее появляются признаки поражения ЦНС: беспокойство, манежные движения, потеря ориентации, судороги, прогиб спины, параличи глотки, гортани, конечностей, отек легких, слюнотечение. Болезнь длится от нескольких часов до 3-х дней. Летальность: 70-100%

У свиноматок проявляется в виде гриппоподобного синдрома с выздоровлением через 3-4 дня.

У КРС повышается температура до 42 С, прекращается жвачка, сильный зуд в областе ноздрей, губ, щек, отказ от корма, вялость, беспокойство, страх, учащенное дыхание, потливость, судороги жевательных и шейных мышц. Смерть наступает при нарастающей вялости через 1-2 суток. Выздоровления крайне редки.

У плотоядных животных наблюдается отказ от корма, пугливость, беспокойство, сильный зуд. Иногда у собак и кошек проявляются признаки бешенства. Потом наступает паралич глотки. Смерть через 2-3 суток. Животные не являются источником вируса и не выделяют его, являясь экологическим тупиком.

Применятся живая вирусвакцина ВГНКИ, инактивированная культурная вакцина – иммунитет на 6-10 месяцев.За рубежом используются субъединичные и рекомбинантные вакцины.

Вирус ящура

Поксвирусы – большая группа вирусов, поражающая позвоночных и насекомых. Вирион представляет собой овальную или прямоугольную частицу размером 220-450 на 140-260 нм. Частица имеет сложную структуру. Она состоит из центральной части – нуклеотида, овальных тел и наружной оболочки. Нуклеотид имеет двояковогнутую форму. Наружная оболочка состоит из липидов и трубчатых белковых структур.

Геном представлен двухспиральной молекулой ДНК. ДНК не обладает инфекционностью. С нуклеотидом связанно более 15 ферментов. Состав вириона по массе: белки – 88%, ДНК – 5%, липиды – 4%, углеводы – 3%.

Размножение идет в цитоплазме, затем вирус выходит из клетки, разрушая ее, а так же в результате экзоцитоза – без разрыва клеточной стенки. Вирус передается аэрогенно, механически и посредством членистоногих.

Вирус чумы плотоядных

1. Сем. парамиксовирусы.

2. Вирус в естественных условиях слабоустойчив. При температуре -10^С1С он выживает в течение нескольких месяцев, при температуре -76 С- неограниченное время. В организме больньгх животньгх вирус в высоких титрах находят в экскрете из носовой полости, в крови, селезенке, костном мозге, лимфоузлах, в экссудатах грудной и брюшной полостей. Вирус обладает гемаггютинируюищим свойством. Размер вирионов - 115-160 нм. Вирус имеет преципитируюший, гемагглютинирующий и комплементсвязывающий антигены.

3. Чума плотоядных (болезнь Карре) - остропротекающая контагиозная болезнь собак, волков, лисиц, шакалов, норок, соболей, енотов, хорьков и других плотоядных, характеризующаяся лихорадкой, острым катаром слизистых оболочек, пневмониями, кожной экзантемой и поражением нервной системы. Распространена повсеместно. Инкубационный период - от нескольких дней до 3 нед. Снмнтомы: повышается температура тела до 39-40^|)С: при легочной форме развивается ринит; при кишечной форме чумы наблюдают рвоту, запоры, сменяющиеся поносом, при кожной форме на бесшерстных участках кожи живота и бедер появляется пустулезная сыпь; при нервной форме наблюдается угнетение, пугливость, раздражительность, клонические судороги мышц, могут быть и параличи.

При вскрытии наблюдают мелкие кровоизлияния в сердечной мышце. Слизистая оболочка дыхательных путей гиперемирована, покрыта слизисто-гнойным экссудатом, легкие имеют уплотненные участки. Слизистая оболочка желудка и кишечника катарально воспалена, с кровоизлияниями и язвочками. Увеличены брыжеечные лимфатические узлы. Селезенка - без изменений или слегка увеличена. Наблюдают точечные кровоизлияния на слизистой оболочке мочевого пузыря, Вещество головного мозга отечно, количество субдуральной жидкости повышено.

4. Многообразие симптомов затрудняет диагностику. Диагноз на чуму плотоядных ставят комплексно: на основании эпизоотологических, клинических и патологоанатомических данных и лабораторных исследований.

В лабораторию направляют кровь для ретроспективной диагностики, секреты: носовые, конъюнктиву, слюну, фекалии для вирусологических исследований. Посмертно: мозг, кусочки селезенки, печени, их применяют в качестве антигена в серологических реакциях.

Экспресс-методы - РИФ, РСК, РГА, РЗГА, тельца-включения.

Вирусологические методы: выделение вируса (культура клеток, КЭ, лабораторные животные); идентификация вируса (РН, РДП, РСК).Ретроспективные методы - РСК, РЗГА.

5. У переболевших животных наступает практически пожизненный иммунитет. Щенята от иммунных матерей, а также подсосные щенята невосприимчивы в течение 2-3 мес. Для профилактики чумы плотоядных применяют сухие культуральные вирус-вакцины из аттенуированных штаммов 668-КФ, ЭПМ, ВАКЧУМ.

Вирус чумы крс

Вирус инфекционного ринотрахеита крс

ИРТ (красный нос, контагиозная бронхопневмония) – остропротекающая контагиозная болезнь КРС, характеризующаяся преимущественно катарально-некротическими поражениями дыхательного тракта, лихорадкой, общим угнетением и коньюнктивитом, а так же развитием пустулезного вульвовагинита, при попадании вируса в половые органы животного и абортами.

Болезнь распространена повсеместно. Экономический ущерб за счет снижения удоев на 50-60%, яловости коров и выбраковки слепых телят.

Клиника. Болезнь проявляется в 5-ти формах:

• Поражение верхних дыхательных путей – респираторная форма. Внеззапное повышение температуры, гиперемия слизистой оболочки носа, носоглотки и трахеи, угнетением, сухим болезненным кашлем, обильными серозно-гнойными истечениями из носа и пенистым слюноотделением. При тяжелом течении отмечают асфиксию.

• Вагиниты.

• Энцефалиты. Отмечается психическое расстройство, нарушение равновесия, угнетение, конвульсии, слюнотечение. В основном заболевают телята 2-6 месячного возраста.

• Артриты.

• Коньюнктивиты.

Локализация вируса – тропизм к клеткам органов дыхания и размножения, кроме того, наблюдается тропизм к клеткам пищеварительного тракта. В больших количествах вирус обнаруживают в прямой кишке телят.

Источник – больные животные и латентные вирусоносители. Особенно опасны быки производители. Переболевание сопровождается появлением стойкого и длительного иммунитета, который может передаваться потомству с АТ молозива. Большим разнообразием отличаются живые вакцины (в СНГ – Бивак – от ПГ-3 и ИРТ), используются инактивированные вакцины (из штамма 4016), субъединичные вакцины.

Вирус аденовирусной инфекции крс

1. Сем.: аденовирусы.

2. Вирус - РНК-содержащий: имеет капсид двадцатигранной формы, состоящий из капсомеров; размер вируса - около 70-90 нм; он обладает гемагглютининами; имеются антигенные разновидности; цито-патогенный вирус; довольно устойчив к физическим и химическим факторам.

3. Болеет КРС, чаще всего телята от 2-недельного до 1-4-месячного возраста, инфекция широко распространена во многих странах; поражаются органы дыхания, пищеварения и зрения: повышение температуры тела достигает 41,5°С, характерны слезотечение, серозное истечение из носа, кашель, затрудненное дыхание, тимпания, колики, диарея.

Патологоанатоминеские изменения с признаками геморрагического катарального гастроэнтерита, очагового уплотнения, ателектаза, эмфиземы легких.

В результате исследований в эндотелиальных клетках сосудов печени, почек, селезенки, слизистой оболочки желудка и кишечника находят внутриядерные включения.

4. Диагноз основан на анализе эпизоотологических, клинических. патологоанатомических изменений и результатов лабораторных измерений.

Взятие патматериала происходит так же, как при инфекционном ринотрахеите. Лабораторная диагностика включает обнаружение антител в патологоанатомическом материале (мазках-отпечатках, срезах), полученном от больных животных, в РИФ и РСК; выделение возбудителя из патологического материала в культуре клеток тестикул бычка (ТБ), ПЭК или ЛЭК и его групповая идентификация в серологических акциях: РСК, РДП и РИФ; выявление антител в сыворотке крови больных и переболевших животных (ретроспективная диагностика) в серологических реакциях: РСК, РНГА, РДП.

5. Переболевшие и вакцинированные телята приобретают иммунитет к заражению вирусом гомологичного типа. Пассивный иммунитет создают аденовирусные антитела молозива матери. Применяется инактированная вакцина из штаммов двух серологических групп аденовирусов.

Вирус диареи крс

ВД-БС – инфекционная контагиозная болезнь КРС, преимущественно молодых животных, характеризующаяся эрозивно-язвенным поражением слизистых оболочек пищеварительного тракта, ринитом, увеличением лимфоузлов, высокой лихорадкой, общим угнетением, лейкопенией, постоянной или перемежающейся диареей, эрозивным и язвенным стоматитом с обильным слюнотечением, появлением слизисто-гнойных истечений из носовой полости. Впервые обнаружена в штате Нью-Йорк в 1946г. Инфицирует 173 вида домашних жвачных животных и 11 видов свиней. Болезнь зарегистрирована во всех странах мира.

Клиника. Зависит от вирулентности вируса, состояния и чувствительности животного. В естественных условиях болеют телята 5-6 месячного возраста. Среди взрослых животных до 90% имеют специфические АТ. Различают острое, подострое, хроническое и латентное течение.

• При остром течении – лихорадка (39,5-42,2 С), тахикардия, учащенное дыхание, потеря аппетита, появление эрозий и язв на слизистых ротовой полости и всего пищеварительного тракта. Возможна генитальная форма, если сперма контаминирована возбудителем. Смерть может произойти в острой фазе болезни, но чаще через 3-10 дней. На 7-9 день появляется диарея, продолжающаяся 1-4 недели. Животные сильно худеют, возможно выпадение волос. Снижение молочной продуктивности, аборты, гибель телят от гнойной или фибринозной пневмонии, гибель взрослых животных от диареи с поражением кишечника, обезвоживания.

• Подострое течение характеризуется внезапностью, подъемом температуры на 1-2 С, тахикардия и учащенное дыхание, потерей аппетита, поражение слизистых, кашель, кратковременная диарея.

• Хроническое течение возникает после острой вспышки. Характерны длительная диарея и кахексия.

• Латентная форма не имеет внешних проявлений, переболевание определяется по наличию АТ.

Семейство Birnaviridae.

Бирнавирусы – небольшая группа вирусов, поражающая позвоночных, беспозвоночных и насекомых. Вирионы представляют собой сферические частицы диаметром 60 нм. Они состоят из сердцевины, содержащей РНК и белок и икосаэдрического капсида, построенного и 92 капсомеров. Вирионы содержат 90% белка, 10% РНК, липидов нет. Геном представлен двумя фрагментами 2-спиральной линейной РНК. Семейство состоит из трех родов:

• Aquabirnavirus – поражает рыб,

• Entomobirnavirus – вирус Х дрозофилы,

• Avibirnavirus – вирус инфекционной бурсальной болезни (ИББ)

Вирус лейкоза крс

Вирус классической чумы свиней

1. Сем.: тогавирусы (от лат. toga - плащ).

2. Вирус - РНК-содержащий, имеет кубический тип укладки капсомеров, которые покрыты суперкапсидной оболочкой, чувствителен к эфиру, размером до 40 нм, гемагглютининов не имеет. Пантропный. Антигенные разновидности не выявлены.

Вирус малоустойчив к физическим и химическим факторам.

3. Болеют свиньи всех возрастов, распространение болезни повсеместно на всех континентах, передается путем прямого контакта больных со здоровыми, с кормом и водой.

Инкубационный период болезни длится от 3-7 дн. до 3 кед. Чума свиней может протекать сверхостро, остро, подостро и хронически.

КЧС - острая инфекционная болезнь, характеризуется лихорадкой (40,5-41°С). крупозным воспалением легких и крупозно-дифтерическим воспалением кишечника.

Болезнь сопровождается угнетением, отказом от корма, рвотой, запором (затем понос), кровоизлияниями в кожу (при надавливании пальцем не бледнеют), иногда наблюдаются парезы. Смертность -80-100%.

Из патологоанатомических признаков характерны кровоизлияния в лимфатические узлы, селезенку, почки; слизистые оболочки желудка и кишечника катарально воспалены, в толстом кишечнике - ''бутоны".

4. Диагноз ставят по эпизоотологическим данным (болеют только свиньи, летальность - 100%), клиническим симптомам и патолого-анатомическим изменениям.

Материалом для лабораторного исследования служат: кровь, взятая от больных животных в острый период болезни, селезенка, небные миндалины, подчелюстные лимфатические узлы и поджелудочная

железа.

Экспресс-дигностика включает в себя проведение РИФ с цельювыявления вирусного антигена в патматериале.

При проведении вирусологических исследований ставят биопробу на 4 подсвинках (30-40 кг), два из них активно или пассивно иммунизируют против чумы. Затем всех заражают подкожно или внутримышечно исследуемым материалом. Неиммунные поросята погибают.

Идентификация вируса осуществляется в ходе серологических реакций РИФ, РДП, РНГА, РСК.

Ретроспективная диагностика болезни заключается в выявлении в сыворотке крови реконвалесцентов специфических антител при помощи РСК, РДП, РНГА

5. Переболевшие животные приобретают стойкий иммунитет, продолжающийся несколько лет. Пассивный иммунитет (после введения противочумной сыворотки) непродолжительный-10-12 дн. Применяют живую вакцину для иммунизации свиней против чумы.

Иммунитет образуется напряженный и продолжительный (3-4 г.), невосприимчивость .свиней к болезни наступает через 3-5 дн.

Живые вакцины представлены штаммом К, репродуцированным в организме кроликов (АСВ), в культуре клеток почки эмбриона свиньи ВГНКИ) и тестикулов ягнят (ЛК-ВНИИВВ и М).

Для пассивной иммунизации и лечения применяют иммунную сыворотку.

Вирус африканской чумы свиней

1. Сем.: иридовирусы.

2. Вирус - ДНК-содержащий, сферической, формы, размером до 200 нм, гемагглютинины отсутствуют, пантропный. Репродукция осуществляется в ядре клеток.

Вирус очень устойчив к высушиванию и гниению; при температуре 60°С инактивируется в течение 10 мин.

3. Болеют только свиньи (домашние и дикие). Вирус исключительно заразительный и легко передастся любыми путями, включая передачу врез кровососущих насекомых. АЧС имеет распространение в Африке, но иногда ее завозят в Европу и Америку. По клиническим симптомам и патологоанатомическим изменениям эта болезнь сходна с класической чумой свиней и отличается от нее отсутствием "бутонов" в кишечнике и увеличением селезенки в 3-4 раза. АЧС - острая, очень контагиозная болезнь, характеризуется явлениями острого токсикоза, некрозом клеток лимфоидной ткани, появлением в органах тромбозов, кровоизлияний. Летальность при АЧС до 99 %.

4. Предварительный -диагноз на АЧС может быть поставлен на основании анализа клинико-эпизоотологических данных и патологоатомических исследований. Основанием для подозревания АЧС

может служить возникновение болезни с быстрым течением и высокой

смертностью среди свинопоголовья, привитого против КЧС. В лабораторию направляют кровь больных или селезенку, печень, сердце, легкие и др.

Экспресс-диагностику производят путем проведения РИФ по обнаружению антигена в патологическом материале.

Вирусологические методы включают в себя заражение культур клеток костного мозга или культур лейкоцитов свиней, а также подсвинков 2-4-месячного возраста, которые иммунны к КЧС.

Идентификация выделенного вируса осуществляется серологическими реакциями - РИФ, РСК, РЗГА (реакция задержки гемадсорбции),РДП.

Ретроспективная диагностика сводится к выявлению специфических антител в сыворотке крови РИФ, РЗГА, РСК. Она позволяет выявить жнвотных-вирусоносителей. а также судить о количестве хронических и субклинических случаев болезни.

5 Средства специфической профилактики АЧС не разработаны. При возникновении АЧС всех свиней убивают, трупы уничтожают, свинарники и инвентарь дезинфицируют. Ввоз на ферму свиней производят через 6 мес после ликвидации животных.

Вирус инфекционного гастроэнтерита свиней

1. Сем.: коронавирусы.

2. Вирус - РНК-содержащий, его поверхность усыпана булавовидными выступами, напоминающими солнечную корону, размер вируса до 160 нм, имеет гемагглютинины. Вирус малоустойчив к физическим и химическим факторам.

3. Инфекционный гастроэнтерит - остропротекающая высококонтагиозная болезнь, главным образом, поросят до 3-недельного возраста, восприимчивы к болезни и собаки. Болезнь широко распространена.

Инкубационный период очень короткий (1-3 сут). Клинически болезнь проявляется в снижении аппетита, повышении жажды, лихорадкой, рвотой и сильной диареей. У поросят до 10-дневного возраста летальность достигает 70-100%. Поросята старших возрастов переболевают без летального исхода. Из патологоанатомических признаков характерны: кишечник расширен и наполнен жидкостью и газами, стенки тонкого кишечника имеют вид пергамента и в просвете его содержится непереваренное молоко, желудок переполнен, мезентериальныс сосуды инъецированы.

4. Предварительный диагноз ставят по эпизоотологическим данным, клиническим симптомам и патологоанатомическим изменениям.

Окончательный диагноз устанавливают по данным лабораторных исследований. С этой целью в лабораторию направляют тонкий кишечник и мезентериальные лимфатические узлы, а также кусочки легкого, печени, селезенки, почек, головного мозга. Экспресс-диагностика включает проведение РИФ для выявления специфического антигена в патматериале.

Для проведения вирусологических исследований проводят заражение первичных культур клеток кожи, легких, щитовидной железы и в перевиваемых клетках тестикул поросенка, не вызывая в первых пассажах ЦПД. Цитопатическое действие адаптированного вируса проявляется в образовании синцития и бляшек. В исключительных случаях ставят биопробу на поросятах.

Для идентификации выделенного вируса проводят постановку РИФ, РН, РТГА, РДП. Ретроспективная диагностика связана с исследованием парных сывороток, в которых выявляют специфические антитела и их титр в серологических реакциях.

У переболевших свиней иммунитет сохраняется до двух лет. У поросят он слабый и непродолжительный. Невосприимчивость к вирусу достигается путем вакцинации супоросных свиноматок, которую проводят за 40 дн. до опороса.

Для специфической профилактики применяют живые вакцины: 1) из аттенуированного штамма Римс ГДР; 2) вирус-вакцину ВГНКИ из штамма №5. Эти вакцины вводят в молочную железу супоросным свиноматкам.

Респираторно-репродуктивный синдром свиней

Вирус инфекционной анемии лошадей

1. Относится к неклассифицированным вирусам.

2. РНК-содержащий вирус, округлой формы, размером 80-120 нм. Штаммы вируса ИНАН, выделенные в различных местах, в антигенном отношении идентичны. Вирус интенсивно размножается в костном мозге и крови, вызывая угнетение эритропоэза и гемолиз части эритроцитов во время приступа лихорадки. Обладает гемагглютинирующим свойством. Вирус устойчив к высушиванию и гниению. При температуре 0...-2*С вирус сохраняется до двух лет, в глицерине - 7 мес, в стерильной воде -169 дн,

3. Инфекционной анемией болеют лошади всех возрастов и пород, а также ослы и мулы. Передается вирус кровососущими насекомыми, с молозивом или внутриутробно. Заболевание большого количества лошадей наблюдается, главным образом, в пастбищный период (жаркое время).

Различают сверхострое (септицемическое), острое, подострое и хроническое (латентное) течение болезни. Основные клинические признаки - рецидивирующая лихорадка, расстройство сердечной деятельности, слабость, признаки анемии во время лихорадки, исхудание. Нередко бывают колики, понос (с кровью), слизистые оболочки приобретают желтушность.

При вскрытии трупов обнаруживают дистрофические изменения паренхиматозных органов и признаки геморрагического диатеза. Лимфатические узлы увеличены, гиперемированы, селезенка увеличена, наполнена кровью, печень увеличена, кровь водянистая, светло-красного цвета. При хроническом течении картина более сглажена.

4. Диагноз на ИНАН ставят комплексно: учитывают эпизоотологические особенности болезни, клиническую картину, данные гематологических и лабораторных исследований, патологоанатомические и гистологические изменения.

В лабораторию направляют для серологического исследования 5-6 мл сыворотки крови, для гематологического исследования -10-12 мл крови с добавлением антикоагулянта, для гистологического исследования - кусочки печени, селезенки, сердца, лимфоузлов от павших животных и 300-500 мл крови от подозрительных или больных для постановки биопробы. Для получения антигена направляют селезенку.

Используют серодиагностику РДП, РСК. РТГА, РИФ; иммуноферментный метод.

5. Иммунитет при ИНАН изучен недостаточно. У хронически больных лошадей наблюдается нестерильный иммунитет. За рубежом разработаны инактивированные и живые вакцины. В нашей стране вакцинацию лошадей против ИНАН не проводят.

Вирус ринопневмонии лошадей

Вирус ньюкасловской болезни

1. Сем.: парамиксовирусы.

2. Возбудитель болезни Ньюкасла является РНК-содержащим вирусом, его размер -100-200 нм, форма вириона может быть сферической, овальной или нитевидной. Вирус локализуется в паренхиматозных органах, костном и головном мозге, мышцах, трахеальной слизи, толстом и тонком кишечниках. Большинство полевых и вакцинных штаммов вируса в антигенном и иммунобиологическом отношениях сходно. Однако антигенный анализ с помощью РН позволил сгруппировать все вирусы в пять антигенных подтипов. Установлен тропизм вируса к нервной, легочной и висцеральным тканям. Вирус обладает гемагглютинирующей активностью. Вирусы чувствительны к эфиру, хлороформу, кислой среде, сравнительно быстро инактивируются при температуре 20-37'С.

3. Болезнь Ньюкасла - широко распространенная, остропротекающая, высококонтагиозная болезнь кур, индеек и некоторых видов диких птиц. В типичных случаях болезнь проявляется слабостью, затрудненным дыханием, кашлем, часто отмечают понос, поражение ЦНС (круговые движения, шаткость походки, парезы и параличи ног, крыльев, шеи). У 60-70 % взрослых кур, павших от этой болезни, обнаруживают точечные кровоизлияния при переходе железистого желудка в мышечный, некротическое воспаление кишечника (бубоны), имеет место атипичное и даже бессимптомное течение болезни.

4. Диагноз основан на анализе эпизоотологических, клинических данных, патоморфологических изменений и результатов лабораторных исследований. В лабораторию направляют свежий труп птицы или трахею, легкие, селезенку, печень, головной мозг (или голову). Основой лабораторной диагностики является выделение вируса на 9-10-дневных КЭ, культуре клеток, постановка РГА и идентификация вируса в РТГА, РН, РСК, РИФ и др. Ретроспективный диагноз и определение напряженности иммунитета проводят в РТГА, РН и др.

5. Птица, переболевшая в естественных условиях, приобретает пожизненный иммунитет. Для специфической профилактики болезни Ньюкасла применяют живые вакцины из штаммов В1, Ла-Сота, Н и БОР-74.

Вирус гриппа кур

-острая контагиозная вир.болезнь, хар-ся общим угнетением , отеками, пораж.орг. дых.и пищеварения. Сем-во-orthomyxoviridae. РНК-вир. Трубчатый тип. Путь:воздушно-капельный. 1)Депрессия, потеря чувчтв, синюшность слизистых. Отек подкожной клетчатки в обл.гол. и шеи. М.б.диарея. 2)М.б. в виде респиратор.болезни(гибель 1-70%): сонливость, чихание, хрипы. Пат.изм: 1)кровоизл.в серозных покровах, паренхим.орг.,ЖКТ. Катары ЖКТ. Некрозы в печени, почках, селезенке и ЦНС. Венозный застой и цианоз. 2)катар. конъюнктивит, ринит, синусит, трахеит, катарально-геморрагич.энтерит и нефрит. Пат.мат: целиком труп или все внутр.орг. парные сыв. Лаб.диагн:1-ИФА, РИФ, ПЦР, КЭ. 2,3-КЭ(алант.п-ть)-РГА, КК-ЦПД, РГА,РГАд; цыплята-гиб.через 36-72ч. 4-РТГА, ИФА. 5-РТГА с парн.сыв; 6-РТГА, ИФАн. Профилактика – инактивир. вир.вакц

Вирус болезни Марека

Сем-во herpesvirida. ДНК-сод. Передается горизонтально. Летальность до 30%. Инкуб.пер.2нед. 2ф: 1)птичий паралич- пораж.ЦНС и переферич.н.с. Хромота, парезы, дегидратация, истощение, м.б.кож. опухоли. 2)острое теч. – гибель через 2 нед с признаками опух. Пат.изм: утолщение нервов в 3-5р, сероват.отенком, отечные. В гол.мозге- негнойный диф.энцефалит. опухоли Пат.мат: Кровь, перья с бедра, кожа с бедра; селезенку, печень, яичники, лимф.узлы, седалищн. нерв и опухолевые образования. Лаб.диагн: 1- РДП, биопроба, гистолог. Мазки 2,3-КЭ – ХАО-пролиферация, узелки; желт.мешки – пролиф. ↑печени, селезенки 4- РДП, 5-РДП 6-РДП, ИФАн Профилактика жив.вакц. из гетерологич.штаммов вир. Герпеса индеек

Вирус миксоматоза кроликов

Вирус катаральной лихорадки овец

Вирус парвовирусной инфекции собак и панлейкопении кошек

Вирус лейкимии кошек

Болезнь Тешена.

1. Сем.: пикорнавирусы.

2. Вирус - РНК-содержащий, имеет кубический тип уклада капсомеров, мелкий - размером до 40 нм. гемагглютинины отсутствуют, репродукция в цитоплазме. Нейротропный. Антигенные разновидности вируса не выявлены. Вирус малоустойчив к физическим и химическим факторам.

3. Болеют только свиньи. Болезнь распространена в Западной Европе и нашей стране. Характеризуется развитием негнойного энцефаломиелита и появлением параличей.

Болезнь проявляется клиническими признаками поражения ЦНС: судорожные сокращения различных групп мышц, непроизвольные движения, шатающаяся напряженная походка. параличи конечностей, мышц, шеи, глотки.

Существенные патологоанатомические изменения находят только в ЦНС, наблюдается гиперемия мозговых оболочек и их серозная инфильтрация.

Репродукция вирионов.

Под адсорбцией принято понимать первичный контакт вируса с клеткой. Часто этот контакт сначала бывает очень слабым - обратимая адсорбция. Затем прочность контакта возрастает - необратимая адсорбция. Термин «проникновение» ошибочен потому, что он подразумевает активное воздействие на атакуемую клетку определенной части вириона, что не было доказано. Более вероятно, что во многих случаях на самом деле имеет место совсем другой процесс - прикрепление вируса к клетке вследствие физико-химической комплементарности между поверхностью вируса и молекулами рецепторов, находящихся на поверхности клетки, индуцирует в клетке изменения, необходимые для проникновения в нее вируса. Процесс начинается со случайных столкновений множества вирионов с поверхностью клетки. Участок связывания на поверхности вириона, непосредственно взаимодействующий с рецептором клетки, может состоять из индивидуального структурного вирусного белка, а может и представлять собой мозаику из нескольких белков капсида (по-видимому, именно так обстоит дело у пикорнавирусов). Рецептором во всех случаях служит расположенный на поверхности клетки белок или гликопротеид. На поверхности клетки имеются различные рецепторы, каждый из которых специфичен для своего вируса. Специфичность этих рецепторов не абсолютна, что приводит к возможности группировки вирусов по этому свойству в своеобразные «семейства». Следует подчеркнуть, что сам факт адсорбции вируса на клетке еще никоим образом не означает инициации вирусной инфекции. Связи, образующиеся при адсорбции между вирусом и клеткой, могут быть «слабыми»,, а адсорбция «обратимой», т.е. вирион может покидать поверхность клетки. Однако некоторые из адсорбировавшихся на клетке вирионов связываются с ней более прочными «необратимыми» связями. Следующий этап после прочного прикрепления вириона к поверхности чувствительной клетки - это проникновение внутрь клетки всего вириона или его части и начало синтеза вирус-специфического белка или вирусной м РНК. Проникновение вирионов в клетку и активация вирусного генома могут происходить у разных вирусов по-разному. Ясно, что вирусы с оболочкой и «голые» вирусы должны проникать в клетку в результате разных физико-химических процессов. Уже давно предполагали, что в основе проникновения в клетку вирусов с оболочкой, вероятно, лежит процесс, в какой-то мере подобный «плавлению мембраны», или процесс «слияния». Что же касается таких относительно больших белковых структур, как голые вирионы, то для них известен только один механизм проникновения в клетку - это фагоцитоз, и уже давно предполагается, что такие вирусы проникают в клетки в результате варианта фагоцитоза, названного «виропексисом». ДНК большинства ДНК-содержащих вирусов синтезируется в ядре клетки. Напротив, белки всех без исключения вирусов синтезируются в цитоплазме. Заражение клеток вирусами в принципе может привести к двум последствиям. Зараженная клетка может либо погибнуть, образовав при этом большое количество вируса (литический тип взаимодействия вирусов с клетками), либо продолжать жить и делиться, синтезируя небольшие количества вируса. Многие вирусы лизируют клетки очень редко, и обычно в зараженных клетках устанавливается состояние устойчивого равновесия - образуется персистентно инфицированная культура клеток. Установлено, что при успешной литической инфекции в зараженных клетках происходит пять четко отличающихся друг от друга событий, реализуемых функционально активными вирус-специфическими белками. Это следующие события: 1) подавление вирусом ряда клеточных функций; 2) синтез вирусных м РНК; 3) репликация вирусного генома; 4) морфогенез вирионов; 5) освобождение вирионов из клетки.

7-13. Работа с вирусным материалом.

Требования к работе:

1. Не допускать рассеивания вируса в окружающую среду.

2. Не допускать контаменации (загрязнения) вирус содержащего материала бактерия ми и грибами.

3. Личная безопасность.

Летальный исход при вирусном заболевании происходит если:

- заболевание выражено пантропным вирусом, который поражает все виды клеток.

- Если вирус поражает клетки жизненно важных органов.

- Если на фоне вирусного заболевания идет вторичное бактериальное осложнение.

Методы борьбы.

1. Профилактика. Специфическая (вакцинирование, серопрепараты)

Не специфическая (соблюдение правил зоогигиены)

2. Лечение – нет

4. Диагностика.

- предварительный диагноз

- окончательный диагноз

Правила взятия патологического материала.

1. Материал берется АСЕПТИЧЕСКИ.

2. Количество материала 10-20 грамм.

Охлаждающие смеси.

1. СО2 – сухой лёд ( -71 С)

2. Жидкий азот (-196 С)

3. Снег или лёд + NaCl (-18 С)

При транспортировке вирус содержащего материала в целях безопасности необходимо наличие дезинфектантов.

- фенол

- формалин (10%)

При наличии особо опасного материала вирус транспортируют 2 человека.

Лабораторные исследования.

I. Индикация вируса в патологическом материале.

1. Обнаружение – световая микроскопия крупных вирусов (Poxviridae), электронная микроскопия.

2. Обнаружение телец-включений. (тельца Бабе-Шенегри при бешенстве)

3. Обнаружение вирусных антигенов: серологические реакции.

4. Обнаружение вирусных НК (ДНК-зонды и ПЦР – полимеразно-цепная реакция).

5. Обнаружение активной формы вируса путем биопробы (лабораторные животные, куриные эмбрионы, культура клеток).

6. Обнаружение гемаглютининов у гемаглютинирующих вирусов (в настоящее время практически не используется по причине наличия более точных методов).

II. Изоляция (выделение) вируса из патологического материала.

Проводится не менее трех слепых пассажей, делается биопроба.

А) Лабораторные животные (клиника, гибель, пат. изменения)

Б) Куриные эмбрионы (гибель, пат. изменения, РГА)

В) Культура клеток (ЦПД, РГАд, метод бляшек)

III. Идентификация выделенного вируса – серологические реакции.

IV. Доказательство этиологической роли.

Иногда требуется доказать этиологическую роль выделенного вируса. Для этого используют парные сыворотки крови в серологических реакциях. Вкачестве АГ используют выделенный вирус, а в качестве АТ – парные сыворотки. Повышение титра антител во второй сыворотке в 4 и более раз свидетельствует о этиологической роли выделенного вируса.

Индикация вирусов при помощи лабораторных животных.

Применение живых систем.

- Для обнаружения вируса – биопроба.

- Для выделения вируса и получения вирус содержащего материала от положительной биопробы.

- Для поддержания вируса в лаборатории, т.е. для сохранения его в активной форме в течении многих лет. Это достигается путем чередований пассажей и хранений в консервирующих условиях. Пассаж – заражение живого объекта с последующим получением новой популяции вируса.

- Для накопления вирусной массы с целью исследования вируса и получения вакцин.

- Для титрования вирусов.

- Как тест-объект в реакции нейтрализации.

1. Гибель в характерные для данного вируса сроки.

2. Характерные патологоанатомические изменения.

3. Характерные клинические признаки.

Цели вскрытия:

- обнаружить характерные для данной вирусной патологии изменения во внутренних органах.

- взять материал для последующих пассажей (материал берется в зависимости от тропизма вируса).