81. Косвенный флуоресцентный анализ.

Флуоресцентный метод может быть использован для прямого и косвенного количественного анализа. В косвенном флуоресцентном анализе флуоресценция служит индикатором, указывающим окончание процесса определения данно­го иона или вещества. Такие флуоресцентные индикаторы могут ис­пользоваться во всех методах объемного анализа и особенно широкого иона или вещества. Такие флуоресцентные индикаторы могут использоваться во всех методах объемного анализа и особенно широко в методе нейтрализации и окислительно-восстановительного титрования. Основное преимутщество флуоресцентных индикаторов – возможность титровать непрозрачные или окрашенные растворы, а так­же более узкий, чем у обычных индикаторов, интервал перехода Ок- раекй : Достаточно широко применяется на практике крисгаллофосфорная методика анализа, основанная на том, что при спекании соединений типа А_ІІВ_ΥІ(СаО, ZnS, CdS, ZnSe,Cd, Se и др.), А_ІІ,В_Υ (Ga, As, и др.), щелочногалоидных солей и других с соединениями, со­держащими Ag, Сu, Mg, редкоземельные элементы образуются т. н. кристаллофосфоры – соединения, которые могут давать люминесцентное свечение при возбуждении светом, электрическим полем и другими методами. Интенсивность свечения кристаллофосфора пропорциональиа содержанию в основе (А_ІІВ_ΥІ, А_шВ_У и т.п.) активатора (Ag, Си, Mg, Т1 и тд.). Чувствительность таких определений для некоторых ионов очень велика. Например, чувствительность определения сурьмы с окисью кальция в качестве основы (флюса) 10^-6 мкг, в то время как чувствительность флуоресцентного определения сурьмы с моримом – 1 мкг. Для висмута нет чувствительной флуоресцентной реакции, а кристаллофосфорным методом с СаО можно обнаружить Bi при его содержании до 10^-4 мкг. Правда, для определения с применением кристаллофосфоров необходимо значительно больше времени, чем с использованием ф1ryоресцентных реакций, т. к. получение кристаллофосфоров гре6ует очень тонкого измельчения, тщательного перемешивания и сплавления.

Важную роль играет хемилюминесцентный анализ, основанный на измерении свечения, возникающего в результате окислительно -восстановительных реакций органических веществ, например люми­нола, люцигенина и др., с катионами переходных металлов, например Fe (IІ), Со (II), Си ,(II), Ni _-(II), Мп (II). При этом можно определить количественное солфжание по изменению интенсивности свечения. Предел обнаружения 5 х 10^-7 %.

82Аппаратура и практическое применение люминесцентного анализа.

Изучение явлений фотолюминесценции, а также проведение люминесцентного анализа происходит с помощью специальных приборов фосфороскопов, фотометров, флюорометров, люминоскопов. Фосфороскопы, люминоско­пы -это простейшие приборы , включающие источник возбуждающего излучения и набор светофильтров. Оценка интенсивности люми­несценции производится визуально, как правило, методом стандартных серий. Фотометры, флюорометры имеют практически те же ос­новные конструктивные узлы, что и все спектральные приборы:

- источник света;

- монохроматизатор света;

- кюветы с исследуемым веществом;

- узел определения интенсивности излучения

Люминесценцию используют в иммунохимическом анализе для определения антител, гормонов, ле­карственных препаратов, вирусных и бактериальных антител. При этом флуоресцирующее вещество, например редкоземельные элементы, присоединяют непосредственно к антителу и проводят измерение интенсивности люминесценции. Чувствительность метода - до 10^-14 моль/л.

Флуоресцентный метод может быть использован для прямого и косвенного количественного анализа.