Обнаружение вирусного антигена с помощью серологических реакций
Реакцию иммунофлуоресценции используют для быстрой индикации вируса. При исследовании в РИФ отпечатков головного, спинного мозга, легких и селезенки больных животных антиген обнаруживают с 3-4го дня после заражения. Приготовление препаратов и их окрашивание проводят по общепринятой методике.
Реакция непрямой гемагглютинации с применением эритроцитарного иммуноглобулинового диагностикума антиген вируса болезни Ауски в РНГА можно выявить за 1-3 дня до появления клинических признаков болезни, в период болезни и после переболевания.
Реакция иммуноосмофореза-ускоренный метод обнаружения вирусного антигена в материале.
Антигенная активность.
Вирус продуцирует образование вируснейтрализующих, комплимент связывающих и преципитирующих антител, которые можно обнаружить с помощью реакции нейтрализации, реакции связывания комплимента и реакции диффузной преципитации.
Специфические КС-антитела появляются через 3 дня после заражения, титр их не снижается до 30-4- дней. Вируснейтрализующие антитела появляются к 6-8 дню и достигают максимума через 3-4 недели.
Гемагглютинирующие и гемадсорбирующие свойства не установлены.
Культивирование. Вирус болезни Ауески пассируется на кроликах, белых мышах, в первичных культурах клеток куриного эмбриона, почек КРС, обезьян, ягнят, свиней, перевариваемых клетках, вызывая образование некротических фокусов-бляшек, число которых пропорционально титру вируса. В культуре куриных фибробластов вирус образует бляшки под агаровым покрытием через 48 часов после заражения. Установлена связь между ЦПД, морфологией бляшек и вирулентностью штамма. Штаммы, высоковирулентные для свиней и КРС, обладают способностью вызывать образование синцития в культуре клеток.
Помимо культуры клеток, вирус удается культивировать в развивающихся куринных эмбрионах при инокуляции на хорион-аллантоис, иногда после длительного периода адаптации альтернативными пассажами. Наблюдаются специфические фокусы поражения хорион-аллантоиса и генерализованная инфекция. Эмбрионы гибнут через 24-96 часов.
Дифференциальный диагноз
Проводят у всех животных в отношении бешенства, а у свиней — чумы, сальмонеллеза, колибактериоза (отечной болезни), листериоза, гриппа, болезни Тешена, пастереллеза, отравления поваренной солью, авитаминозов, менингитов, энцефалитов различной природы.
Бешенство. Клинические признаки болезни Ауески очень похожи на клинику бешенства. На этом основании в свое время эту болезнь и называли ложным бешенством.
- При бешенстве больные животные весьма агрессивны и набрасываются на других животных и людей, а при болезни Ауески проявляют враждебность только по отношению к сородичам, но никогда не нападают на людей и не кусают их.
- У животных, пораженных болезнью Ауески, не бывает паралича, нижней челюсти и водобоязни, что всегда имеет место при бешенстве.
- Бешенство характеризуется выделением тягучей слюны, а болезнь Ауески — пенистой.
- Болезнь Ауески среди поросят и подсвинков может быстро распространиться на большое количество поголовья, тогда как бешенством заболевают обычно единичные животные. Взрослые свиньи сравнительно редко поражаются нервной формой заболевания, в то время как при бешенстве нервные симптомы обнаруживаются вне зависимости от возраста.
- У павших от бешенства животных обнаруживаются в мозге внутриядерные включения в виде телец Бабеша-Негри, чего не наблюдается при болезни Ауески. Постановка биопробы на кроликах или кошках является решающим критерием дифференциальной диагностики этих заболеваний.
При чуме свиней наблюдается, как и при болезни Ауески,
- серозно-слизистое воспаление соединительных оболочек глаза,
- истечение из носа,
- температура тела повышается до 41—42°,
- иногда возникает рвота,
- нервные явления, проявляющиеся в припадках судорог, шаткой походке, парезах и параличах конечностей, сильном возбуждении, напоминающем бешенство.
Нервная форма чумы наблюдается в основном только у поросят 3—6-месячного возраста при содержании их в антисанитарных условиях и недостаточном кормлении.
Остальные инфекционные и незаразные болезни следует дифференцировать путем проведения комплексного эпизоотологического исследования, включая анализ кормов и лабораторную диагностику. Окончательный диагноз во всех случаях устанавливают на основании результатов биопробы.