Лабораторная работа №6 «Определение β-липопротеинов сыворотки крови турбидиметрическим методом»

Принцип: в присутствии хлористого кальция (CaCl₂) и гепарина нарушается коллоидная устойчивость белков сыворотки крови, в связи с чем β-липопротеины выпадают в осадок. Гепарин образует с липопротеинами комплекс, который под действием хлористого кальция выпадает в осадок. По степени мутности судят о концентрации β-липопротеинов в сыворотке.

Реактивы: 1) хлористый кальций: 0,025 М раствор (безводный СаCl₂ растворяют в дистиллированной воде или 28 мл ампульного хлорида кальция доводят в мерной колбе до 500 мл; реактив храниться в холодильнике); 2) гепарин в концентрации 1000 Ед/мл (аптечный гепарин концентрацией 5000 Ед/мл разводят дистиллированной водой: 1 мл гепарина и 4 мл воды).

Ход определения: В химическую пробирку наливают 2 мл хлористого кальция и добавляют 0,2 мл сыворотки, перемешивают. Вносят смесь в кювету (5 мм) ФЭКа, измеряют исходную оптическую плотность (Е₁) против раствора хлористого кальция, длина волны 630-690 нм. Содержимое переносят обратно в пробирку. В эту же пробирку вносят 0,04 мл разведенного гепарина. Ровно через 4 минуты фотометрируют пробу против хлористого кальция (Е₂).

Расчёт: содержание β-липопротеинов в сыворотки крови выражают в мг% или г/л.

(Е₂ – Е₁) х 1165 = мг% или (Е₂ – Е₁) х 11,65 = г/л

Норма: 250 – 600 мг% или 2,5 – 6,0 г/л

Протокол лабораторной работы №4 «Определение общих липидов»

Принцип реакции	Алгоритм исследования	Расчет концентрации	Вывод	Оценка

Проверил преподаватель ____________________________

^(Ф.И.О.)

Замечания: ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Протокол лабораторной работы №5 «Обнаружение липидов».

№

Название реакции

Обнаружение липидов

Принцип метода

Окраска

Вывод/примечание

Оценка

1.

2.

3. «Эмульгирование жира»

Принцип:

Вывод:

Оценка	Вода	Желчь	Мыло	Белок	Сода
Стабильность эмульсии
Степень дисперсности эмульсии

Проверил преподаватель ____________________________

^(Ф.И.О.)

Замечания: _____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________