
- •Правила взятия крови для клинико-биохимических исследований.
- •Лабораторная работа №1 «Обнаружение моно, ди и полисахаридов».
- •Реакция №1. «Проба Биаля (обнаружение пентоз)»
- •Реакция №2. «Проба Велька (обнаружение лактозы и мальтозы)»
- •Реакция №3. «Проба Селиванова (обнаружение фруктозы)»
- •Реакция №4. «Обнаружение крахмала»
- •Лабораторная работа №2 «Реакции на выявление свойств углеводов».
- •Реакция №1. «Реакция Троммера»
- •Реакция №2. «Реакция Ниландера»
- •Практические занятия по теме: «Химия липидов» Дата_________________
- •Определение концентрации общих липидов в сыворотки крови.
- •Клинико-диагностическое значение определения общих липидов:
- •Лабораторная работа №5 «Обнаружение липидов»
- •Реакция №1 « Акролеиновая проба (обнаружение глицеринсодержащих липидов)»
- •1. Реакция Сальковского.
- •2. Реакция Либермана-Бурхардта.
- •Лабораторная работа №6 «Определение β-липопротеинов сыворотки крови турбидиметрическим методом»
- •Протокол лабораторной работы №4 «Определение общих липидов»
- •Протокол лабораторной работы №6 «Определение β-липопротеинов сыворотки крови турбидиметрическим методом»
- •Практические занятия по теме: «Химия белков» Лабораторная работа №7 «Цветные реакции на белки и аминокислоты»
- •Реакция №1 «Биуретовая реакция на пептидную связь»
- •Реакция №2 «Нингидриновая реакция»
- •Реакция №3 «Ксантопротеиновая реакция»
- •Реакция №4 «Реакция Адамкевича»
- •Реакция №5 «Реакция Фоля»
- •Протокол лабораторной работы №7 «Цветные реакции на белки и аминокислоты».
- •Современные методы анализа аминокислотного состава белков и пептидов.
- •Лабораторная работа №8 «Реакции осаждения и денатурации белков»
- •Необратимое осаждение
- •Реакция №3 «Осаждение концентрированными минеральными кислотами»
- •Протокол лабораторной работы №8 «Реакции осаждения и денатурации белков».
- •Протокол лабораторной работы №9 «Разделение альбуминов и глобулинов яичного белка методом высаливания».
- •Лабораторная работа №10 «Обессоливание растворов белков».
- •Протокол лабораторной работы №10 «Обессоливание растворов белков»
- •Метод распределительной хроматографии.
- •Метод распределительной хроматографии на бумаге.
- •Лабораторная работа №11 «Разделение смеси аминокислот методом радиальной хроматографии на бумаге».
- •Клинико-диагностическое значение определения аминокислот в сыворотке крови и моче
- •Протокол лабораторной работы №11 «Разделение смеси аминокислот методом радиальной хроматографии на бумаге».
- •Тема: «нуклеиновые кислоты»
- •Лабораторная работа №12 «Реакции на составные компоненты нуклеопротеинов»
- •Протокол лабораторной работы №12 «Реакции на составные компоненты нуклеопротеинов».
- •Лабораторная работа №13: «Обнаружение действия ферментов»
- •Лабораторная работа №14: «Изучение свойств ферментов»
- •Опыт 1 «Определение специфичности амилазы».
- •Опыт 2 «Определение специфичности сахаразы».
- •Лабораторная работа №15: «Регуляция активности ферментов»
- •Протокол лабораторной работы №13 «Обнаружение действия ферментов».
- •Протокол лабораторной работы №14 «Изучение свойств ферментов».
- •Протокол лабораторной работы №15 «Регуляция активности ферментов».
Лабораторная работа №5 «Обнаружение липидов»
Качественные реакции на липиды дают возможность ознакомиться с некоторыми представителями этих соединений и их свойствами.
Реакция №1 « Акролеиновая проба (обнаружение глицеринсодержащих липидов)»
Принцип: в основе реакции лежит способность глицерина при нагревании терять воду и превращаться в акролеин – ненасыщенный альдегид с резким специфическим запахом.
С помощью этой реакции обнаруживают глицерин, входящий в состав нейтральных жиров и фосфолипидов.
Реакция №2 «Обнаружение лецитина в желтке куриного яйца»
Принцип: лецитины, относящиеся к группе фосфолипидов, не растворяются в воде и ацетоне, но хорошо растворяются в спирте, эфире, хлороформе.
Реакция №3 «Обнаружение холестерина»
Холестерин относится к стеринам и по химической природе представляет собой циклический ненасыщенный вторичный спирт. Холестерин может образовывать эфиры с высшими жирными кислотами.
Принцип: В основе реакций для обнаружения холестерина лежит способность образовывать окрашенные соединения в присутствии серной кислоты и уксусного ангидрида. Этой реакцией пользуются для количественного определения холестерина в крови.
Реактивы: 1) холестерин, 1% хлороформный раствор; 2) серная кислота, концентрированная; 3) уксусный ангидрид.
1. Реакция Сальковского.
Ход определения: в сухую пробирку вносят 10 капель раствора холестерина и осторожно по стенке пробирки наслаивают 0,5 мл серной кислоты. На границе жидкостей появляется красное кольцо.
2. Реакция Либермана-Бурхардта.
Ход определения: в сухую пробирку вносят 10 капель раствора холестерина, 5 капель уксусного ангидрида и 2 капли серной кислоты. Постепенно появляется сине-зелёное окрашивание.
Реакция №4 «Эмульгирование жира»
Для того, чтобы подвергнуться расщеплению под действием ферментов в ЖКТ жиры предварительно должны эмульгироваться. Эмульсия представляет собой дисперсную систему, состоящую из множества мелких капелек нерастворимой жидкости, например – жира, равномерно распределенных в жидкой фазе. Основными эмульгаторами жира в пищеварительном тракте являются желчные кислоты, а также белки, мыла и соли угольной кислоты, содержащиеся в некотором количестве в двенадцатиперстной кишке.
Принцип: взбалтывая жир с водой, можно наблюдать образование расслаивающейся, нестойкой эмульсии. Добавляя поверхностно-активные вещества, можно получить стойкую эмульсию. Эмульгаторы легко адсорбируются на поверхности раздела двух фаз, образуя тончайшую пленку, которая препятствует слиянию капелек эмульсии.
Реактивы: 1) растительное масло; 2) дистиллированная вода; 3) мыло, 1% раствор; 4) желчь; 5) яичный белок, 1% раствор; 6) карбонат натрия (сода), 1% раствор.
Ход определения: в 5 пробирок (предварительно пронумерованных) наливают по 3 капли растительного масла. В 1-ю пробирку добавляют 20 капель дистиллированной воды; во 2-ю пробирку – 20 капель желчи; в 3-ю – 20 капель мыла; в 4-ю – 20 капель яичного белка; в 5-ю – раствор карбоната натрия. Все пробирки предварительно взбалтывают. Через 5 минут оценивают сохранение эмульсии.
Указания к составлению отчета: результаты опыта занесите в таблицу, отмечая, образование эмульсии, её сохранность и степень дисперсности.