Курс	Семестр	Ф.И.О. преподавателя	Оценка за ведение рабочей тетради

Практическое занятие №1 по теме: «Организация работы в биохимической лаборатории» Дата_________________

Биохимические анализы в клинической медицине.

Важнейшим разделом лабораторной медицины являются биохимические методы, позволяющие объективно оценить и охарактеризовать состав сложных биологических систем, какими являются биологические жидкости организма человека.

Биохимические анализы широко используются в медицине для дифференциальной диагностики заболеваний, прогноза, мониторинга и скрининга. Биохимические исследования помогают подтвердить или опровергнуть диагноз, выявить болезнь доклинической стадии, проследить течение болезни и возможные осложнения, оценить эффективность проводимой терапии. Основная задача клинической биохимии – исследование функционирования живых систем с точки зрения процессов, протекающих в клетках и в клеточных структурах. Однако полученные результаты необходимо рассматривать на уровне органов, тканей, всего организма и во взаимосвязи целого организма с окружающей средой.

Изучение любой биологической системы начинают с изучения ее компонентов. Для клинической диагностики представляют интерес: химический состав биологических жидкостей и тканей организма, распределение жидкости и химических компонентов между органами и тканями, процессы превращения веществ в целом организме и различных его органах, а также регуляция обмена веществ с помощью ферментов, гормонов и других биологически активных соединений.

В биохимической лаборатории проводится исследование крови (цельная кровь, плазма, сыворотка), мочи, ликвора, пота, пищеварительных соков, таких патологических жидкостей, как плевральная, асцитическая, перикардиальная, внутрисуставная и др. Наиболее частым биологическим материалом для биохимического исследования являются кровь и ее составляющие (плазма/сыворотка).

Кровь – жидкая ткань организма, осуществляющая транспорт кислорода и различных питательных веществ к органам и тканям, а также обратный ток продуктов метаболизма от тканей.

Правила работы с дозаторами и режимы дозирования.

Основные режимы дозирования: прямое, обратное, многократное дозирование. Прямое дозирование – весь забранный объём жидкости сбрасывается за один полный ход поршня, оно подходит для дозирования водных растворов. Обратное дозирование – в наконечник набирается объём жидкости больший по сравнению с необходимым. По окончании дозирования в наконечнике остаётся остаточный объём жидкости, который нивелирует погрешность, связанную с образованием пены. Этот способ дозирования используется для биологических, вязких и пенящихся жидкостей, а также дозирования очень малых объемов. Многократное дозирование предполагает повторяющиеся операции дозирования идентичных объемов жидкости. В этом случае используют электронные дозаторы, что позволяет повторять дозирование после однократного заполнения наконечника.

Правила работы с дозаторами: дозатор подбирается в соответствии с объемом, указанным в методике; в реактив опускается только наконечник, который используется только один раз; при заборе реагента кнопка дозатора нажимается до первого упора, а выпускается реагент из дозатора нажатием кнопки до второго упора (в случае прямого дозирования).

Правила взятия крови для клинико-биохимических исследований.

• Кровь надо брать утром, натощак (между 8 и 10 часами), до физической нагрузки и проведения диагностических процедур.

• За сутки до взятия крови следует исключить прием алкоголя (прием пищи может быть обычным).

• Накануне утра (после 2-х часов ночи) не следует курить, принимать пищу и жидкость (разрешается выпить стакан воды между 22 и 5 часами).

• Для проведения тестов липидного профиля (холестерин, ЛПВП, ЛПНП, триглицериды) следует сдавать кровь строго натощак, после 12-часового голодания.

• Для определения в крови глюкозы, фолиевой кислоты, сывороточного железа, билирубина, калия, фосфора следует обязательно выдерживать минимум 6-ти часовое голодание.

• Для определения АКТГ, кортизола кровь сдают только до 10:00.

• Для определения уровня мочевой кислоты в предшествующие исследованию дни необходимо отказаться от пищи богатой пуринами (печень, почки), максимально ограничить в рационе мясо, рыбу, кофе, чай.

• При исследовании функции щитовидной железы в период лечения препаратами, содержащими гормоны ЩЖ, исследование проводится через 24 ч. после последнего приема препарата; за 2-3 дня до взятия крови исключить прием препаратов, содержащих йод.

• Непосредственно перед взятием крови пациенту необходимо предоставить отдых в положении сидя в течение 15-30 минут.

• В процессе взятия крови рука пациента располагается под углом 45⁰.

• Лежачим больным взятие крови осуществляется между 7 и 9 часам; при этом рука пациента, лежащего в постели, должна находиться в горизонтальном положении.

• При взятии крови путем венопункции время сдавливания сосудов жгутом должно быть минимальным. Больному не следует сжимать и разжимать пальцы, так как это вызывает местный стаз, гипоксию сдвиги в распределении некоторых веществ (холестерол, калия, натрия, кальция и др.).

• У катетеризированного больного следует проводить флеботомию на другой руке либо производить взятие крови выше места ввода раствора, предварительно временно прекратить подачу раствора (на 1-2 минуты), взять первые 5 мл крови из катетера и утилизировать, взять необходимый объем крови для исследования и продолжить инфузию.

• Для получения сыворотки кровь берут без атникоагулянта. Сыворотка используется для определения общего белка, альбумина, глюкозы^*, холестерола, триглицеридов, жирных кислот, общих липидов, липопротеидов, остаточного азота, мочевины, креатинина, билирубина, мочевой кислоты, ферментов, электролитов, ВИЧ, RW.

* для определения глюкозы используются также специальные пробирки с антикоагулянтом и стабилизатором глюкозы.

• Для получения плазмы в пробирку предварительно добавляют антикоагулянт (антикоагулянт подбирают в зависимости от требуемых лабораторных тестов смотри таблицу 1). Плазма используется в тех случаях, если надо определять концентрацию аналитов в форменных элементах крови, например, электролиты в эритроцитах; для гематологических анализаторов.

• При исследованиях системы гемостаза на фоне приема препаратов, влияющих на свертывание крови, необходимо отметить это в направлении.

• Для исследования системы гемостаза (коагулологические тесты) к взятию крови применяют ряд дополнительных требований:

  • Кровь берут в силиконированные или специальные пластиковые пробирки;

  • В пробирку предварительно добавляют антикоагулянт – цитрат натрия в соотношении 1:9 (1 часть антикоагулянта и 9 частей крови);

  • Первые 5-6 капель вытекающей крови нельзя использовать для коагулограммы, эту порцию крови можно применять для других биохимических исследований;

  • Рекомендуется в процессе взятия крови на непродолжительное время (2-3 секунды) расслабить жгут.

Качество получаемого лабораторией образца существенно зависит от манипуляций процедурной сестры.

Таблица 1

Наиболее часто применяемые антикоагулянты и противопоказания к их использованию для лабораторных исследований.

Антикоагулянт	Лабораторные тесты, определению которых мешает применяемый антикоагулянт
Натрия оксалат (щавелево-кислый натрий)	Электролиты (калий, натрий, кальций), щелочная фосфатаза, альфа-амилаза, рН крови.
Аммония оксалат (щавелево-кислый аммоний)	Аммиак, щелочная фосфатаза, альфа-амилаза, рН крови.
Тринатрийцитрат (лимонноксилый натрий)	Альфа-амилаза.
Этилендиаминтетрауксусная кислота или ее динатриевая соль: ЭДТА – натрий (синонимы: селектон Б, хелатон, версен, трилон Б).	Электролиты (калий, натрий, кальций), остаточный азот, коагулограмма.
Гепарин (с активностью 1000 Ед в 1 мл)	Коагулограмма
Натрия гепаринат или калия гепаринат	Электролиты (калий, натрий), коагулограмма.
Лития гепаринат	Щелочная фосфатаза, коагулограмма.
Аммония гепаринат	Аммиак, коагулограмма.
Цитратно-глюкозная смесь	Электролиты, глюкоза.

Практическое занятие №2 по теме: «Химия углеводов» Дата_________________