- •1.Задачі сучасної біотехнології. Основні етапи біотехнологічного процесу.
- •2. Використання досягнень біотехнології в рослинництві, тваринництві, медицині.
- •3.Реалізація генетичної інформації прокаріот, модель оперона, конститутивні мутанти.
- •4. Реалізація генетичної інформації еукаріот, ділянки, що забезпечують регулювання роботи генів (аутенуатори, енхансери, тата-бокс, гц-бокс).
- •5. Види точкових мутацій, мутації типу зсуву рамки зчитування, генетичні наслідки точкових мутацій.
- •6. Ферменти генетичної інженерії, їх властивості.
- •7. Методи визначення нуклеїнової послідовності: хімічне і ферментативне секвенування.
- •9. Методи конструювання рекомбінантних днк.
- •10. Методи визначення клонів, що містять необхідну послідовність днк: скринінг за допомогою днк-зонду, за активністю білку, імунологічний скринінг.
- •11. Вектори, типи векторів, вимоги до векторів.
- •12. Трансформація, компетентність клітин, шляхи її підвищення.
- •13. Плазміди і кон’югація, процес мобілізації плазмід.
- •14. Бактеріофаги, їх види, життєвий цикл фага, трансдукція, метод упакування днк фага в зрілий капсид in vitro.
- •15. Транспозони, види транспозицій.
- •16. Інтерферони, способи їх синтезу, гібридні інтерферони.
- •17. Шляхи синтезу інсуліну.
- •18. Соматотропін, його активні центри, особливості створення кДнк, шляхи регулювання синтезу соматотропіну в організмі тварин.
- •19. Лікарські засоби проти- віл-інфекції у людини, що створені за допомогою методу рекомбінантних днк.
- •20. Вакцини нового покоління, методи генної інженерії для їх створення.
- •21. Живі вакцини, шляхи їх створення, використання вірусу вісповакцини (ввв).
- •22. Методи введення трансгену у геном тварини: використання ретровірусних векторів, метод мікроін'єкцій днк, основні його етапи.
- •23. Методи введення трансгену у геном тварин: використання модифікованих ембріональних стовбурових клітин, генетичний нокаут.
- •24. Методи введення трансгену у геном тварин: використання сперматозоїдів у якості векторів трансгену, балістична трансфекція.
- •25. Трансгенні тварийи зі збільшеною швидкістю росту та стійкістю до захворювань.
- •26. Трансгенні тварини з покращеним складом молока та м'яса.
- •27. Трансгенні тварини - тварини біофармініу.
- •28. Шляхи створення трансгенних риб.
- •29.Гмо, агрономічно важливі характеристики рослин; змінені поживні властивості та склад гм-продуктів.
- •30.Природа ризиків для здоров'я людини та навколишнього середовища, пов'язані з гмо.
- •31.Особливості культивування клітин тваринного походження, гіпотези, що пояснюють старіння і загибель клітин.
- •32.Поведінка клітин в культурі, причини, що викликають втрату властивостей клітин при вирощуванні в культурі.
- •33.Гібридизація соматичних клітин, схема злиття одноядерних клітин, відбір синкаріонів, клітини-ауксотрофи.
- •34.Гібридомна технологія, схема отримання гібридом.
- •35.Моноати, їх переваги та недоліки, шляхи використання моноатів.
- •36.Основні етапи проведення трансплантації ембріонів. Вимоги до корів-донорів і реципієнтів ембріонів, стимуляція суперовуляції.
- •37.Способи вилучення і пересадки ембріонів, оцінка ембріонів за морфологічними ознаками.
- •38.Способи кріоконсервації ембріонів, кріопротектори внутрішні і зовнішні.
- •39.Способи розділення ембріонів, перспективи використання генетично подібних тварин; роль прозорої оболонки при пересадженні половинок і чвертей ембріонів під час їх кріоконсервації.
- •40. Методи оцінки повноцінності ембріонів великої рогатої худоби, оцінка якості половинок ембріонів.
- •41.Способи дозрівання ооцитів in vitro, капацитація сперматозоїдів.
- •42.Методи запліднення яйцеклітин ссавців in vitro.
- •43.Ембріональне клонування шляхом пересадження ядра раннього зародка, основні етапи клонування.
- •44.Ембріональне клонування при використанні ядер ембріональних стовбурових клітин (eck).
- •45.Соматичне клонування при використанні ядер соматичних клітин дорослого організму.
- •46.Методи попереднього відбору гамет за статтю.
- •47.Ознаки диференціації статі у ссавців: тільце Барра, н-y-антиген.
- •48.Імунологічні методи визначення статі ембріонів, використання днк-зонду, полімеразної ланцюгової реакції (плр).
- •49.Партеногенез, види зародків, що створюються при партеногенезі, методи активації партеногенезу.
- •50.Химерні тварини, методи створення химерних зародків, використання химерних ембріонів для клонування зародків з використанням ембріональних стовбурових клітин (eck).
- •51.Основні стадії біотехнологічного виробництва, накопичувальні та чисті культури мікроорганізмів, вимоги до мікроорганізмів.
- •52.Силосування, як спосіб консервування кормів, шляхи його покращення.
- •53.Інтенсифікація процесів травлення в рубці жуйних.
- •54.Методи переробки і консервування харчових продуктів.
- •55.Бродіння як спосіб переробки і консервування їжі.
- •56. Отримання харчових продуктів з відходів лігноцелюлози, м'ясного і молочного виробництва.
- •57.Ферменти харчової промисловості, іммобілізація, нові властивості ферментів при їх іммобілізації.
- •58.Способи іммобілізації ферментів, продукти, що отримують за допомогою іммобілізованих ферментів.
- •59.Біотехнологічна деградація вуглеводнів (нафтова плівка, забруднені ґрунти).
- •60.Біогаз, схема виробництва біогазу.
30.Природа ризиків для здоров'я людини та навколишнього середовища, пов'язані з гмо.
Для кращого розуміння природи ризиків, пов'язаних з генно- інженерними організмами, доречно коротко нагадати, що з себе представляють генетично модифіковані організми і чим вони відрізняються від звичайних, «немодифікованих». У Картахенськом ротоколі по біобезпеці міститься наступне їх визначення: «живий змінений організм» означає будь- який живий організм, що володіє новою комбінацією генетичного матеріалу, що отримана завдяки використанню сучасної біотехнології (Картахенський протокол по біобезпеці.
Таким чином, який-небудь трйнсгенний сорт рослини відрізняється від початкового лише тим, що в його генетичному матеріалі до 25-30 тисяч існуючих генів доданий відносно невеликий фрагмент ДНК, в якому записана інформація про один-два нових гена та їх регулюючі елементи. Активність цих доданих генів в організмі виражаєтьсяв біосинтезі одного- двох нових для організму протеїнів (ферментів або структурних білків). Оскільки генетична інженерія може оперувати будь-якими генами, що існують в природі, а не лише генами від організмів, що знаходяться в еволюційній спорідненості, як це здійснюється в традиційній селекції, то продукти привнесених генів (ферменти, протеїни) можуть виглядати в генетично модифікованому організмі як незвичайні, невластиві, чужорідні для даного виду, які в природі у нього не зустрічаються. Відповідно саме продукти трансгенів являються найбільш суттєвими, відчутними факторами ризиків, пов'язаних з генно-інженерними організмами.
Друга основна група ризиків пов'язана з самим фактом вставки трансгенів в генетичний матеріал організму. Є підстави вважати, що вбудовування трансгенів відбувається випадковим чином, тобтовони можуть вбудуватися практично в будь-яку область молекул ДНК, що міститься в трансформованій клітині: у будь-яку хромосому, будь-яку частину хромосоми, якщо йдеться про вищих організмах. До чого це може призвести?
Перш за все до того, що привнесений ген може зачепити області ДНК, які кодують структуру або регулюючі елементи якого-небудь гена організму, що модифікується. Якщо ген, якого торкнулися, виконує будь-яку важливу функцію в організмі, то відсутність його продукту може привести до втрати або зниження життєздатності. Таким чином до рівня комерційного сорту генотипи з пошкодженими генами дійти не можуть в принципі.
Нарешті, третя основна група ризиків, пов'язаних з генно-інженерними організмами, заснована на несприятливих ефектах, викликаних перенесенням трансгенів іншим організмам: вертикальним перенесенням генів від ГМО диким родичам культурного йигляду або горизонтальним перенесенням генів, наприклад селективних генів стійкості до антибіотиків від генетично модифікованої рослини мікроорганізмам травного тракту. Тут все зрозуміло: гени і їх продукти, нешкідливі в ГМО, можуть виявитися дуже небезпечними в іншому генетичному і екологічному середовищі. Так, надбання хвороботворними бактеріями в травному тракті стійкості до антибіотиків може істотно ускладнювати лікування хвороб, які вони здатні викликати..
Вірогідність перенесення селективних генів з ДНК продуктів харчування, отриманих з генетично модифікованих організмів, до мікроорганізмів травного тракту украй низька (вона оцінюється приблизно як 10"17). Розгляд наслідків перенесення трансгенів або селективних генів в ДНК клітин людини також неможливий: тривалість життя клітин епітелію травного тракту близько семи днів, жодного контакту їжі із статевими клітинами людини не може бути в принципі.
Серед потенційних ризиків для здоров'я людини, пов'язаних з використанням генно-інженерних організмів, розглядають наступні:
синтез нових для реципієнтного організму білків — продуктів трансгенів, які можуть бути токсичними і/або алергенними;
Можливі наступні несприятливі ефекти ГМО на навколишнє середовище:
руйнівна дія на біологічні співтовариства і втрата цінних біологічних ресурсів в результаті засмічення місцевих видів генами, перенесеними від генетично модифікованих організмів;
При перенесенні окремих трансгенних ознак, що перш за все мають адаптивне значення в навколишньому середовищі (стійкість до холоду, жари, посухи, засолення), від культурних сортів до їх диких родичів можлива ситуація, при якій останні можуть придбати додаткові переваги в боротьбі за існування. А це може призвести до зміни того самого балансу між видами, що існує в природі. Наслідки можуть бути сумні: збільшення чисельності одних видів може супроводжуватися зниженням чисельності інших і навіть їх втратою.
створення нових паразитів, перш за все бур'янів, і посилення шкідливості тих видів, що вже існують, на основі самих ГМО або в результаті перенесення трансгенів іншим видам;
З одного боку, завдяки таким трансгенам небезпечними бур'янами можуть стати деякі культурні рослини, які за своєю природою не сильно відрізняються від диких видів (пасовищні трави, рапс, люцерна і ін.). З іншого боку, існує ймовірність перенесення трансгенів від культурних видів до їх диких родичів, які можуть бути бур'янами. Не випадково тому при оцінці ризиків несприятливих екологічних ефектів ГМО обов'язково аналізується сама трансгенна ознака на предмет її адаптивності, а також ймовірність її перенесення диким родичам.
утворення речовин - продуктів трансгенів, які можуть бути токсичними для організмів, що живуть або харчуються на генетично модифікованих організмах, і не є мішенями трансгенних ознак (наприклад, бджіл, інших корисних або видів, що охороняються);
Вживання трансгенних сортів з інсектицидними властивостями (завдяки Вї-гену) відразу ж породило питання: чи не вплинуть негативно ці сорти на біологічну різноманітність, впливаючи на комах, які не є «мішенню» трайсгенної ознаки? Маються на увазі перш за все такі корисні комахи, як бджоли, сонечка, златоочки. На щастя для природи, Ек-протеїни відрізняються високою вибірковістю своєї дії. Проте можливі негативні ефекти, пов'язані з нецільовою дією ГМО на інші організми, обов'язково ретельно зважуються при проведенні оцінки їх біобезпеки.
- несприятлива дія на екосистеми токсичних речовин, похідних неповного руйнування небезпечних хімікатів, наприклад гербіцидів (значна кількість створюваних в сьогодення ГМО - форми, стійкі дЬ гербіцидів).
Оскільки ефективність контролю забур'янення за допомогою
комбінації ГМО і відповідного гербіциду вища, ніж у звичайній практиці вживання хімікатів, то спільний обсяг гербіцидів, внесених на поля з генетично модифікованими сортами, виявляється нижчим звичайного.