Виділення елективної культури маслянокислих бактерій з ґрунту

Хід роботи

Заняття І. (1 день). У колбу з молоком внести грудочку землі, молоко прогріти у киплячій водяній бані 30 хв для знищення супутніх термонестійких спорових і вегетативних клітин. Колбу витримати у термостаті за температури 40 °С протягом 24 год.

Заняття 2. (2 день). І Описати культуральні властивості вирощених бактерій: відзначити присутність у колбі розірваного згустку казеїну молока у результаті накопичення продуктів маслянокислого бродіння (С0₂ і Н₂), а також різкий запах масляної кислоти.

2. Утворення масляної кислоти довести за допомогою якісної реакції: у пробірку відібрати піпеткою 5 см³ збродженого субстрату (рідини, у якій знаходиться згусток казеїну), додати 2 см³ 5% хлорного заліза і нагріти. У присутності масляної кислоти утвориться маслянокисле залізо, яке дає коричневе забарвлення середовища.

3. Вивчити морфологічні властивості культури:

а) з придонного шару приготувати 2 препарати "роздушена крапля" - нативний, для вивчення рухливості;

б) Приготувати також фіксований препарат, забарвлений простим способом (фуксином). Відзначити переважання у препараті спороутворюючих паличкоподібних бактерій. Спори виглядають незабарвленими пустотами.

Доволі просто отримати накопичувальну культуру маслянокислих бактерій з картоплі. Для цього сиру неочищену картоплю нарізати дрібними шматочками, які помістити у широку мікробіологічну пробірку (на ¼ об’єму). Після цього додати 1/3 чайної ложки крейди, на 2/3 об’єму залити водою і поставити на водяну баню на 80 ºс протягом 10 хв. Після пастеризації пробірку перенести у термостат на 35 ºС і через 2-3 доби відбудеться розвиток маслянокислих бактерій. У процесі бродіння утворені гази можуть піднімати догори шматочок картоплі.

Питання для самоконтролю

1. Що розуміють під поняттям «елективна культура» ? Хто розробив вчення про елективні культури ?

2. Як отримати елективну культуру сінної палички, вульгарного протею?

3. Охарактеризуйте представників гнильних бактерій, що таке гниття? Які компоненти мають входити у елективне середовище для виділення таких бактерій?

4. Як отримати елективну культуру маслянокислих бактерій?

Лабораторна робота №11

Тема: Виділення елективних культур. Принципи створення елективних умов для молочнокислих бактерій, дріжджів та галобактерій.

Мета роботи. Навчитися створювати елективні середовища для молочнокислих, галофільних бактерій та для дріжджів. На цих дослідах ознайомитися з фізіологічними та біохімічними особливостями цих мікроорганізмів, визначити їх ролі, у харчових виробництвах і у процесах псування харчових продуктів.

Об’єкт та матеріали. Пробірки, чашки Петрі, МЛА, МПБ, цільне молоко, йогурт, кисле молоко, родзинки, ягоди винограду, оселедець, бактеріологічні петлі, колби, спиртівки, водяня баня, термостати.

Завдання

1 Вділити елективну культуру молочнокислих лактококів з кислого молока та молочних паличок з йогурту.

2. Виділити елективну культуру дріжджів з поверхні ягід винограду.

3. Виділити елективну культуру галофілів з оселедця.