Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Методика гельминтологических исследований позвоночных животных

.pdf
Скачиваний:
91
Добавлен:
30.05.2014
Размер:
567.6 Кб
Скачать

М И Н И СТ Е РСТ В О О БРА ЗО В А Н И Я РО ССИ Й СК О Й Ф Е Д Е РА Ц И И В О РО Н Е Ж СК И Й ГО СУ Д А РСТ В Е Н Н Ы Й У Н И В Е РСИ Т Е Т

М ЕТ ОД И К А Г ЕЛ Ь М И Н Т ОЛ ОГ И Ч ЕС К И Х И С С Л ЕД ОВ А Н И Й П ОЗВ ОН ОЧ Н Ы Х Ж И В ОТ Н Ы Х

У чебно-метод и ческоепособи ед ля студ ентов по специ альности 011600 - Би ологи я

В оронеж 2003

У тверж д ено научно-метод и чески м советом би олого-почвенного ф акультета, протокол№ 14 от14.05.03

Составители: Ромаш ов Б.В ., Х и цоваЛ .Н .,

Труф ановаЕ .И ., Ромаш оваН .Б.

У чебно-метод и ческоепособи епод готовленосотруд ни ками В оронеж ского

госуд арственного би осф ерного заповед ни ка и

каф ед ры теорети ческой и

мед и ци нской зоологи и би олого-почвенного

ф акультета В оронеж ского

госуд арственного уни верси тета

 

Рекоменд уется д ля студ ентов 2 курсаби олого-почвенного ф акультета

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

СО Д Е РЖ А Н И Е

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

В вед ени е… …

… ..

4

Ц ели и зад ачи …

 

… .

5

Т ех ни капровед ени я гельми нтологи ческого вскры ти я ж и вотного …

 

5

М

етод ы окраски и и зготовлени я гельми нтологи чески х препаратов …

 

12

М

етод ы качественного и коли чественного учетагельми нтов …

 

15

К ратки е свед ени я о наи более часто встречаю щ и х ся гельми нтах

мелки х

 

млекопи таю щ и х У сманского бора…

.…

 

 

 

 

 

18

Т абли цад ля опред елени я семейств и ви д ов гельми нтов, парази ти рую щ и х

 

умы ш еви д ны х гры зунов …

..… .

 

 

 

 

 

 

 

 

19

Т абли цад ля опред елени я семейств и ви д ов гельми нтов, парази ти рую щ и х

 

унасекомояд ны х …

… … … … …

… .

 

 

 

 

 

 

 

 

23

Л и тература…

 

25

П ри лож ени е…

… …

… … … … … … …

… …

26

В В Е Д Е Н И Е

Гельми нты и ли парази ти чески ечерви – ш и роко распространенная сред и беспозвоночны х группаж и вы х органи змов. И зучени ем гельми нтов зани мается гельми нтологи я, которая пред ставляетод и ни з разд елов парази тологи и .

В о время учебно-полевой практи ки

студ ентов по зоологи и уд еляется

сравни тельно мало вни мани я гельми нтам.

Т ем неменееони обнаруж и ваю тся

практи чески у каж д ого позвоночного ж и вотного, особенно оби таю щ его в

при род ны х

услови ях .

Гельми нты

пред ставляю т больш ой

теорети чески й

и

практи чески й и нтерес,

и и х

и зучени ев курсемед и ци нской зоологи и является

вполне оправд анны м. В о-первы х ,

би оразнообрази е гельми нтов вели ко, сред и

беспозвоночны х ж и вотны х

по чи слу ви д ов они

уступаю т ли ш ьнасекомы м.

Гельми нты

относятся

к нескольки м ти пам

ж и вотного ми ра –

плоски м

и

круглы м червям и

акантоцеф алам (скребням),

т.е. являю тся пред стави телями

больш ой

группы

зоологи чески х

объектов.

В о-вторы х ,

гельми нты

и мею т

своеобразную

экологи ю ,

при нци пи ально

отли чную

от

экологи и

свобод нож и вущ и х

органи змов.

П арази ти чески е

черви

относятся

к

естественны м

компонентам при род ны х экоси стем и

вы полняю т,

с од ной

стороны ,

как парази ты , рольрегуляторов чи сленности

х озяев,

с д ругой

троф и ческую

ф ункци ю

во внеш ней

сред е яйца и

ли чи нки

гельми нтов

являю тся и сточни ком пи щ и

д ля

беспозвоночны х

и позвоночны х ж и вотны х .

В -третьи х ,

 

гельми нты

и мею т

больш ое

эпи д еми ологи ческое

и

эпи зоотологи ческоезначени е, являясьвозбуд и телями разли чны х заболевани й у

лю д ей и ж и вотны х . К ак прави ло,

многи е знаю т что-то о гельми нтах , и ли

«гли стах », каки х часто назы ваю т,

но не пред ставляю т, какони

вы гляд ят в

и сслед уемы х матери алах . Гельми нты относятся к наи более

экзоти чны м

объектам летней полевой практи ки , невсегд анаблю д аемы м ви зуально наряд ус млекопи таю щ и ми , пти цами , насекомы ми и т.д . Студ енты -би ологи во время учебного процесса в основном сталки ваю тся с ф и кси рованны ми и ли тотальны ми препаратами и з гельми нтов. Д ля студ ентов пред ставляетбольш ой и нтереспроцесспои скаи и зучени я гельми нтов какж и вы х органи змов.

Д аннoe учебно-метод и ческое пособи е пред усматри вает освоени е студ ентами во время учебно-полевой практи ки метод ов гельми н-тологи чески х и сслед овани й, что является од ни м и з направлени й в лекци онно-практи ческом курсепо программемед и ци нской зоологи и .

Ц

Е Л И И ЗА Д А Ч И

Ц елями учебно-полевой

практи ки в направлени и и зучени я гельми нтов

какобъектов мед и ци нской зоологи и являю тся расш и рени еи углублени езнани й

о би оразнообрази и парази ти чески х

беспозвоночны х ,

освоени и

студ ентами

основны х

и д оступны х

метод ов сбора и и зучени я гельми нтов в полевы х и

лабораторны х услови ях .

 

 

 

 

В зад ачи практи ки вх од ят:

 

 

 

освоени е метод ов

гельми нтологи чески х и сслед овани й

позвоночны х

ж и вотны х ,

при обретени е навы ков

сбора, ф и ксаци и

и пред вари тельного

опред елени я гельми нтов;

 

 

 

обучени е метод и кам окраски и

и зготовлени я временны х и

постоянны х

гельми нтологи чески х препаратов и д альнейш егоопред елени я и опи сани я ви д ов

гельми нтов;

 

 

 

 

 

 

знакомство

с основны ми си стемати чески ми

группами

гельми нтов

(трематод ами , цестод ами и нематод ами );

 

 

 

 

знакомство с ф ауной гельми нтов мелки х

млекопи таю щ и х и сслед уемой

терри тори и ;

 

 

 

 

 

 

освоени еметод ов качественного и коли чественного учетагельми нтов;

разви ти е у

студ ентов

навы ков научно-и сслед овательской

работы и

вы полнени е на этой основе и нд и ви д уальны х

зад ани й и сслед овательского

х арактера.

 

 

 

 

 

 

 

 

Т Е Х Н И К А П РО В Е Д Е Н И Я

 

 

ГЕ Л Ь М И Н Т О Л О ГИ Ч Е СК О ГО В СК РЫ Т И Я Ж И В О Т Н О ГО

 

Н аи более

уд обны м

объектом

д ля

провед ени я

полного

гельми нтологи ческого вскры ти я в услови ях полевой практи ки наби останци и

В ГУ

«В еневи ти ново»

являю тся

мелки е

млекопи таю щ и е:

гры зуны и

насекомояд ны е.

Т уш ки

эти х ж и вотны х могут бы ть получены в

рамках

и сслед овани й

по

зоологи и

позвоночны х .

Д ля

вы полнени я

гельми нтологи ческого

вскры ти я

 

необх од и мо и меть опред еленны й

набор

и нструментов,

оборуд овани я

и

ф и кси рую щ и х

ж и д костей,

а

такж е

квали ф и ци рованно прои звод и тьэти кети ровани е и реги страци ю

полученны х

матери алов.

 

 

 

 

 

 

 

 

О

бору д ован и е и и н ст ру м ен т ари й

 

 

 

 

Н абор оборуд овани я д ля

провед ени я

полного гельми нтологи ческого

вскры ти я зави си тотразмеров и сслед уемого ж и вотного. П ри вскры ти и мелки х

млекопи таю щ и х

д остаточно

и меть несколько небольш и х

чаш ек П етри

(д и аметром 10-11

и 6-7 см.),

стеклянны е стаканчи ки объемом 100-150 мл,

нож ни цы ,

вклю чая глазны е,

пи нцеты

разли чного размера, компрессори й (д ва

толсты х стекла размером 22х 5 см,

соед и няю щ и х ся меж д у собой ви нтами ),

препаровальны еи глы , глазную

пи петку,

проби рки и ли пузы рьки д ля х ранени я

гельми нтов.

 

 

 

 

 

 

Д ля

сбора

мелки х

гельми нтов

и компрессорного

и сслед овани я

паренх и матозны х

органов и спользую тся опти чески е при боры

ти па М БС-9,

М БС-10

с разреш аю щ и м

увели чени ем

от 4х

д о 32х .

Д ля провед ени я

гельми нтологи чески х вскры ти й потребуется

вод а,

а

такж е заранее

при готовленны еф и кси рую щ и еж и д кости и полевой ж урнал,

необх од и мы й д ля

запи си и

эти кети ровани я

получаемы х

в

процессе

гельми н-тологи чески х

и сслед овани й результатов.

 

 

 

 

 

 

Ф и ксац и я и реги ст рац и я гельм и н т ов

 

 

 

 

Собранны егельми нты

ф и кси рую тся и

реги стри рую тся в соответстви и с

при няты ми метод ами . Ф и ксаци я сох раняетпри ж и зненную структуруоргани зма и тканей. В некоторы х случаях ф и ксаци я и зменяеткоэф ф и ци ентпреломлени я морф ологи чески х структур, д елая более эф ф екти вны м и х д альнейш ее ми кроскопи ческоеи зучени е(Роски н, Л еви нсон, 1957; И ваш ки ни д р., 1971).

В качествеф и ксаторов в гельми нтологи ческой практи кенаи болееш и роко

при меняю тся эти ловы й

спи рт (этанол) и ф ормали н. Ф и ксаци я гельми нтов

разли чны х классов осущ

ествляется разли чны ми ф и кси рую щ и ми ж и д костями .

Д ля ф и ксаци и

и х ранени я нематод (круглы е черви ) и спользую т ж и д кость

Барбагалло –

3%-ы й раствор ф ормали на на ф и зи ологи ческом растворе. Д ля

при готовлени я 1 л этого раствораберут 8 гр. очи щ енной поваренной соли и растворяю т в небольш ом коли честве д и сти лли рованной вод ы (400-500 мл). Затем д обавляю т30 мл ф ормали на (40% ф ормальд еги д а). П олученную смесь д оли ваю тд и сти лли рованной вод ой д о объема1 л. Раствор х ранятв банках с

плотны ми

кры ш ками .

Ф и зи ологи чески й

раствор в

составе ф и кси рую щ ей

ж и д кости

под д ерж и вает осмоти ческое д авлени е и

пред ох раняет круглы х

червей отд еф ормаци и .

 

 

 

Т рематод , цестод

(плоски ечерви ) и

скребней ф и кси рую тв 70% спи рте.

Н и ж епри вод и тся табли царазвед ени я спи ртов д о необх од и мой концентраци и

(табл1).

Т абли ца1

Развед ени еспи ртов д о необх од и мой концентраци и

Ч тобы

 

 

Н уж но взятьми лли ли тров

 

 

 

получи ть

 

 

 

 

 

 

 

 

 

96°

 

90°

 

80°

 

 

70°

 

100 мл

спи рта

вод ы

спи рта

вод ы

спи рта

 

вод ы

спи рта

вод ы

спи рта

 

 

 

 

 

 

 

 

 

40°

42

58

44

56

50

 

50

57

43

45°

47

53

50

50

56

 

44

64

36

50°

52

48

56

44

63

 

37

71

29

60°

63

37

67

33

75

 

25

86

14

70°

73

27

78

22

88

 

12

-

-

80°

83

17

89

11

-

 

-

-

-

90°

94

6

-

-

-

 

-

-

-

Д ля сбора и ф и ксаци и гельми нтов и спользую т стеклянны е и ли пластмассовы епроби рки (лучш енебольш и епо размерам, д ли ной 3– 6 см) и ли

пузы рьки

(д ля эти х целей

вполне под х од ят станд артны е пени ци лли новы е

пузы рьки ).

Д ля

ф и ксаци и

крупны х гельми нтов и спользую т больш и е по

объемам сосуд ы .

Гельми нтов, собранны х и з разли чны х органов ж и вотны х -

х озяев, такж е помещ аю т в отд ельную проби рку (пузы рек). П ред почти тельнее каж д ы й ви д гельми нтов и ли во всяком случаечервей од ного класса(трематод , цестод , нематод ) ф и кси роватьв отд ельной проби рке(пузы рьке).

К аж д ая проби рка снабж ается эти кеткой, которая

пи ш ется

просты м

каранд аш ом

на плотной бумаге.

Э ти кетка помещ ается

внутрь проби рки

(пузы рька).

П ри мерны е размеры

эти кетки

– 3х 1.5

см.

Н а од ной

стороне

эти кетки запи сы вается

номер вскры ти я,

которы й

соответствует запи си в

гельми нтологи ческом ж

урнале, ви д ж и вотного-х озяи на, его пол и

возраст,

орган, в котором обнаруж ены гельми нты , ви д и ли болеевы соки й таксон(класс)

гельми нта и коли чество собранны х

червей. Н а обратной стороне эти кетки

указы вается место, д атасборов и ф ами ли я сборщ и ка(ри с. 1).

 

 

 

 

 

 

25. Ры ж ая полевка.

 

У смански й бор

 

 

♀ ad.

 

В еневи ти ново

 

 

тонки й ки ш ечни к

 

д убрава

 

 

Nematoda – 30 экз.

 

10.07.2002

 

 

 

 

И ванов И .И .

 

Ри с. 1. Л и цевая и оборотная сторонаэти кетки .

Д анны еорезультатах гельминтологическоговскры тиязаписы ваю тсявполевой ж урнал (тетрадь), гдеуказы ваетсянаиболееполнонеобходимаяинф ормация. Н иж еприводимф орму таблицы (спримерами), которую мож норасчертитьвф орматедвойного(развернутого)листа тетради (рис. 2).

В том случае, если и сслед овательпрои звод и твскры ти еотд ельногооргана и си стемы органов (неполное гельми нтологи ческое вскры ти е), то соответствую щ ая пометкад елается в 7 и ли послед ней граф етабли цы . Е сли по результатам и сслед овани я ж и вотного гельми нты не обнаруж ены , то об этом такж е в послед ней граф е д елается запи сь («гельми нты не обнаруж ены »). Ч еткость, прави льностьи своевременностьреги страци и в ж урналеполученны х д анны х облегчаети сслед ователю и х д альнейш ую обработку, коли чественны й и качественны й анали з собранны х матери алов.

Техн и ка провед ен и я гельм и н т ологи ческого вскрыт и я . М етод гельми нтологи чески х вскры ти й и меетнесколько мод и ф и каци й (И ваш ки ни д р., 1971). Н а практи ке рассмотри м д ва ви д а: полное вскры ти е ж и вотного и неполноеи ли ф рагментарноевскры ти е.

П олное вскры ти е пред полагает послед овательное и сслед овани е всех органов и тканей ж и вотного и сборвсех обнаруж енны х гельми нтов. Э тотметод

сравни тельно

труд оемок,

но

д ает макси мально

точны е

результаты о

зараж енности

гельми нтами

и сслед ованны х

ж и вотны х . П ри

ф рагментарном

вскры ти и и сслед уется ли ш ьтоти ли и ной орган, си стемаорганов и ли

тканей

(напри мер, ж елуд ок и ки ш ечни к, и ли печень, и ли

мы ш цы

и т.д .).

М етод

ф рагментарного и сслед овани я

при меняю т, как

прави ло,

д ля

пои ска

опред еленны х ви д ов гельми нтов. В первую

очеред ь, д ля реш ени я конкретны х

эпи д еми ологи чески х и эпи зоотологи чески х

проблем.

Н апри мер, д ля пои ска

возбуд и телей опи сторх оза и сслед уется печень, д ля обнаруж ени я три х и нелл – поперечно-полосатая мускулатураи т.д .

Д ата

В и д х озяи наи место

П ол

В озраст,

О рганы , в

 

К оли чество

 

О пред елени е

п/п

 

д обы чи

 

 

масса(г)

которы х

обнаруж енны х

 

гельми нтов,

 

 

 

 

 

 

обнаруж ены

экземпляров гельми нтов

при мечани е

 

 

 

 

 

 

гельми нты

 

по классам

 

 

 

 

 

 

 

 

Trem.

Cest.

Nem.

Ac.

 

25

10.07.

Ры ж ая полевка,

 

ad, 19,5

 

Т онки й

5

30

5 - P. elegans

 

2002

В еневи ти ново, д убрава

 

 

 

ки ш ечни к

 

 

 

 

30 - H. glareoli

 

 

 

 

 

 

 

П ечень

3

2

3 - M. lineatus (larva)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

2 - C. hepatica

26

12.07.

П олевая мы ш ь,

 

ad, 27,5

 

Т онки й

17

10

17 - P. elegans

 

2002

В еневи ти ново, поймар.

 

 

 

ки ш ечни к

 

 

 

 

10 - Nematoda sp.

 

 

У смань

 

 

 

Т олсты й

25+12

25 – G. spumosa

 

 

 

 

 

 

ки ш ечни к

 

 

 

 

12 – S. agraria

27

12.07.

О бы кновенная

 

ad, 9,0

Ж елуд ок

12

C. minuta

 

2002

бурозубка,

 

 

 

 

Т онки й

7

52

75

7 - Plagiorchis sp.

 

 

В еневи ти ново,

 

 

 

ки ш ечни к

 

 

 

 

52 - Cestoda sp.

 

 

ольш ани к

 

 

 

 

 

 

 

 

 

75 - Nematoda sp.

 

 

 

 

 

 

П

и щ евод

3

E. oesophagicola

 

 

 

 

 

 

М

очевой

10

C. incrassata

 

 

 

 

 

 

 

пузы рь

 

 

 

 

 

 

П ри мечани е.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

П ри няты есокращ ени я: Trem. – трематод ы , Cest. – цестод ы , Nem. – нематод ы , Ac. – акантоцеф алы .

 

Ри с. 2. О бразец заполнени я полевого ж урналапо результатам гельми нтологи чески х вскры ти й.