4. Качественное определение глюкозы

(проба Гайнеса)

Приготовление реактива Гайнеса

• Приготовление раствора меди (II) сернокислой 5-водной.

Содержимое банки с медью (II) сернокислой 5-водной перенести в стеклянную колбу вместимостью 750 мл, и добавить 400 мл дистиллированной воды и тщательно перемешать до полного растворения.

• Приготовление раствора натрия гидроокиси

Содержимое банки с натрия гидроокисью перенести в стеклянную колбу вмести­мостью 750 мл, добавить 400мл дистиллированной воды и тщательно перемешать до полного растворения.

• Приготовление раствора глицерина

Содержимое бутылки с глицерином перенести в стеклянную колбу вместимостью 250 мл, добавить 200 мл дистиллированной воды и тщательно перемешать.

• Приготовление реактива

В стеклянную колбу вместимостью 1000 мл перенести растворы меди сернокислой и натрия гидроокиси, сразу же добавить раствор глицерина и тщательно перемешать.

4.1.Ход исследования

В химическую пробирку ввести 3—4 мл реактива Гайнеса, прибавить, 8-12 ка­пель мочи, встряхнуть, прокипятить или поставить в водяную баню на 5 минут. В присутствии сахара появляется зеленая, желтая, оранжевая или коричневая окраска жидкости и осадок. Синий цвет указывает на отсутствие сахара.

При необходимости экономии реактива допускается постановка реакции в следу­ющей модификации: 1 каплю мочи и 9 капель, реактива Гайнеса внести в химическую пробирку, довести до кипения или выдержать в кипящей бане 5 минут.

Примечание: моча больных диабетом должна исследоваться в первую очередь, т. к. ферменты бактерий и дрожжевых грибов частично или полностью разлагают глюкозу. То же самое наблюдается при бактериурии.

Нижний предел обнаружения глюкозы в моче составляет 5,55 ммоль/л.

5. Качественное определение билирубина

Приготовление раствора бария хлористого 0,7 моль/л (15%)

75-г бария хлористого перенести в мерную колбу вместимостью 500 мл, добавить 250 мл дистиллированной воды, тщательно перемешать до полного растворения, довести дистиллированной водой до метки и вновь тщательно перемешать.

• Приготовление реактива Фуше

1,35 моль/л (20%) раствор трихлоруксусной кислоты перенести в стеклянную колбу или стакан вместимостью 200 мл, добавить 0,39 моль/л (10%) раствор железа треххлористого и тщательно перемешать.

5.1. Ход исследования

В химическую пробирку внести 10 мл мочи и 5 мл раствора бария хлористого, тщательно перемешать и профильтровать. Хлористый барий осаждает билирубин

Вынутый из воронки фильтр поместить в чашку Петри и на него нанести каплю реактива Фуше. Появление на этом месте фильтра сине-зеленого, голубовато-зеленого или изумрудного пятна свидетельствует о присутствии билирубина в моче.

Примечание: Если реакция мочи щелочная, то необходимо подкислить ее несколькими каплями уксусной кислоты 5,2 моль/л (30%).

6. Качественное определение уробилиноидов (бензальдегидная проба Нейбауэра)

• Приготовление реактива Эрлиха

Содержимое банки с n-диметиламинобензальдегидом перенести во флакон с соля­ной кислотой и тщательно перемешать до полного растворения.

6.1. Ход исследованияВ химическую пробирку внести 1-2 мл свежевыпущенной мочи, охлажденной до комнатной температуры, добавить 1—2 капли реактива Эрлиха из расчета 1 капля реактива Эрлиха на 1 мл мочи, тщательно перемешать и включить секундомер.

Окрашивание мочи в красный цвет в течение 30 сек. после добавления реактива Эрлиха свидетельствует о повышенном содержании уробилиногенов; если окрашива­ние развивается через 60 сек. или вообще не появляется, то концентрация уробилиногенов в моче в норме.

Примечание.1. Если определение уробилиногена проводится в длительно стоявшей моче, то реакция может быть отрицательной из-за окисления уробилиногенов в уробилин.

2. Билирубин может мешать определению уробилиногенов, поэтому, если он обна­ружен, его следует предварительно удалить, осадив раствором хлористого бария; в химическую пробирку внести 10 мл мочи, добавить 5 мл раствора хлористого бария, тщательно перемешать и профильтровать.

Нижний предел обнаружения уробилиноидов составляет 3 ммоль/л.