IV. Проведение анализа по исследованию мочи

1. Определение pH

Приготовление рабочего раствора индикатора бромтимолового синего.

Содержимое банки с бромтимоловым синем перенести в фарфоровую ступку и растереть его и добавить 40 мл 96% этилового спирта ректификата, подогретого до температуры 30⁰С, и тщательно перемешать до полного растворения. После охлаждения до комнатной температуры (18-250С) содержимое ступки перенести в мерный стакан или колбу, довести до дистиллированной водой до 200 мл и тщательно перемешать.

1.1. Ход исследования К 1—2 мл свежесобранной мочи добрить 1-5 капли рабочего раствора индикатора бромтимолового синего:

• оранжево-желтый цвет соответствует кислой реакции, рН-5,0;

• желтый цвет соответствует слабокислой реакции, рН 6,0-6,5;

• травянистый цвет соответствует нейтральной реакции, рН-7,0;

• буровато-зеленый цвет соответствует слабо щелочной реакции, рН- 8,0;

• сине-зеленый цвет соответствует щелочной реакции» рН-9,0.

Диапазон измерений рН находится в пределах 5,0-9,0

Примечание: мочу исследуют в первые 2—3 часа после мочеиспускания.

2. Определение содержания белка

2.1. Ход исследования

В две стеклянные химические пробирки внести по 1,0-2,0 мл профильтрованной или от центрифугированной мочи. В одну пробирку (опытную) внести 2-3 капли 0,85 моль/л раствора сульфосалициловой кислоты. Избыток сульфосалициловой кислоты приводит к растворению белка. Вторая пробирка является контрольной.

На темном фоне сравнить прозрачность обеих пробирок: помутнение в опытной пробирке указывает на наличие белка в исследуемой моче (положительная проба). Нижний предел обнаружение белка в моче составляет 0,033 г/л.

Примечание: Если реакция мочи щелочная, то перед исследованием ее следует подкислить 2-3 каплями раствора уксусной кислоты 5,2 моль/л (30%).

3. Количественное определение (метод Брандберга-Робертса-Стольникова в модификации с реактивом Ларионовой) Приготовление реактива Ларионовой

Содержимое банки или пакета с хлористым натрием перенести в стеклянную колбу вместимостью 750 мл, добавить 500 мл дистиллированной воды и растворить при нагревании на водяной бане с температурой 50-70⁰С. Полученный раствор охладить до комнатной температуры и профильтровать; к 490 мл фильтрата добавить содержимое бутылки с азотной кислотой и тщательно перемешать.

3.1.Ход исследования.

В стеклянную химическую пробирки внести 1-2 мл реактива Ларионовой, а затем осторожно по стенке пробирки наслоите 1 - 2 мл профильтрованной мочи или под­слоить реактив Ларионовой под мочу. Включить секундомер.

Появление тонкого белого кольца на границе двух жидкостей между 2-й и 3-й минутами указывает на наличие белкам 0,033 г/л в исследуемой моче.

Если кольцо появляется раньше, мочу следует развести дистиллированной водой и провести повторное определение белка

Степень разведения мочи подбирается в зависимости от вида первичного кольца: ширины, компактности, времени его появления.

При нитевидном кольце, появившемся ранее 2 мин., мочу развести в 2 раза; при широком и рыхлом - в 4 раза; при компактном - в 8 раз и т. д

Количество белка вычислить, умножая 0,033 г/л на степень разведения.

Примечание: Иногда белое или желтое кольцо появляется при наличии в анали­зируемом образце большого количества уратов. В отличие от белкового кольца уратное кольцо появляется немного выше границы между двумя жидкостями и растворя­ется при легком нагревании.