Культивирование

Сибиреязвенный микроб по способу дыхания относят к факультативным анаэробам: он хорошо размножается в обычных атмосферных условиях и в условиях пониженного содер­жания кислорода.

Бацилла антракса нетребовательна к условиям питания и хорошо растет на универсальных средах (МПБ, МПА, МПЖ, картофеле, мо­локе). Кроме того, может расти на различных растительных субстра­тах: настоях соломы, сена, экстрактах гороха, сои, вики, ломтиках вареного картофеля, свеклы, моркови и др.

Оптимальная температура роста культуры 35...37 "С; при темпе­ратуре ниже 12 и выше 45 °С она не растет; оптимум рН среды 7,2...7,6.

На поверхности МПА в аэробных условиях при 37 °С первые признаки роста появляются уже через 6,..8 ч после посева, 17...24-

часовые культуры имеют вид серовато-беловатых колоний с не­ровными краями и шероховатой поверхностью диаметром 3...5 мм. От их краев отходят завитки. Под лупой или малым увеличением микроскопа колонии имеют локонообразную структуру. Такие ко­лонии характерны для типичных вирулентных штаммов, образую­щих R-форму.

В МПБ и других жидких средах сибиреязвенная бацилла (R-форма) через 16...24 ч образует на дне пробирки рыхлый белый осадок, сам бульон остается прозрачным, при встряхивании оса­док разбивается на мелкие хлопья. Некоторые штаммы растут в виде нежных мелких хлопьев, взвешенных в столбике бульона, ко­торые через 48 ч оседают на дно. Отдельные штаммы на 3...4-е сут­ки дают рыхлое пристеночное кольцо, пленка на поверхности сре­ды не образуется.

Весьма характерный рост отмечают в столбике желатина при посеве уколом. По ходу укола на 2...5-е сутки появляется се­ровато-белый стержень, от которого под прямым углом радиально отходят нежные боковые отростки — более длинные по мере при­ближения к поверхности среды и постепенно укорачивающиеся по направлению вниз. Такая культура напоминает елочку, пере­вернутую верхушкой вниз. Постепенно верхний слой желатина начинает разжижаться, принимая сначала форму воронки, затем

мешочка.

В молоке В. anthracis размножается быстро, вырабатывает кислоту и через 2...4сут оно свертывается с последующей пептонизацией сгустка. На картофеле образует обильный, сухой, серо-белый налет, иногда с кремовым оттенком. Агаровые и буль­онные культуры некоторых штаммов интенсивно окрашиваются в светло-коричневый цвет вследствие окисления тирозина.

Биохимические свойства

В. anthracis вырабатывает следующие ферменты: липазу, диастазу, протеазу, желатиназу, дегидразу, цитохромоксидазу, пероксидазу, каталазу и др. Некоторые штаммы образуют сероводород, особенно это свойство проявляется в сре­дах, богатых пептонами; выделяют аммиак. Ферментирует с обра­зованием кислоты без газа глюкозу, мальтозу, медленно сахарозу, трегалозу, фруктозу и декстрин. На средах с глицерином и сали­цином возможно слабое кислотообразование. Арабинозу, рамнозу, галактозу, маннозу, рафинозу, инулин, маннит, дульцит, сор­бит, инозит не сбраживает. Утилизирует цитраты, образует ацеталметилкарбинол и вследствие этого дает положительную реак­цию Фогеса—Проскауэра. Синтезирует лецитиназу и медленно коагулирует растворы желтка куриного яйца. Редуцирует метиленовый синий и восстанавливает нитраты в нитриты. Вырабатыва­ет желатиназу, а также протеазу и достаточно быстро гидролизует желатин и свернутую сыворотку.