Иммуноферментный метод:

• Суть та же, что и радиоаллергического теста.

• Разница: At к Ig Е метят не радиоактивной меткой, а пероксидазой.

• К смеси добавляют бесцветный субстрат (хромоген),

• который под действием пероксидазы окрашивается в голубой цвет.

• Оценку Ig Е осуществляют оптическим сканированием интенсивности окраски конечного продукта.

• Тест позволяет оценить наличие аллергии (Ig E) количественно.

Билет № 12

1. Анафилаксия(термин, понятие, виды, этапы):

Анафилаксия

Термин анафилаксия происходит от греческих слов «ана» – отсутствие и «филаксис» - защита. Анафилаксия – специфически повышенная чувствительность организма к повторному парентеральному введению чужеродного аллергена.

По механизму развития это аллергическая реакция преимущественно I типа (реализуется с участием Ig E), но может быть и II, и III типы. Особенности: аллерген является белком или гаптеном; аллерген попадает в организм парентеральным путем (в кровь), то есть практически это или лекарство, или яд насекомых.. По временному признаку это всегда немедленный тип (клиника развивается через несколько секунд или минут после введения разрешающей дозы аллергена в сенсибилизированный организм. Анафилаксия характеризуется наследственной предрасположенностью (контролируется несколькими генами). Предрасположенные индивиды синтезируют Ig E более интенсивно.

Различают общую и местную анафилаксию. Общая анафилаксия – генерализованная реакция в виде анафилактического шока. Местная анафилаксия – кожные проявления (кожная анафилаксия).

Анафилактический шок – тяжелая генерализованная анафилактическая реакция на повторное парентеральное введение в сенсибилизированный организм чужеродного аллергена.

Аллергены:

а) лекарственные вещества (антибиотики, сульфаниламиды, местные анестетики, витамины, НПВС и др.);

б) чужеродные сыворотки;

в) яды насекомых (ос, пчел, шершней, шмелей).

Клинические проявления развиваются быстро, иногда молниеносно («на игле»):

1. бронхоспазм,

2. отек гортани,

3. падение АД (из-за расширения сосудов),

4. спастические боли в животе, спастические сокращения матки,

5. рвота, понос,

6. потеря сознания, судороги,

7. кожные проявления и др.

Течение тяжелое. Летальность высокая. Как правило, требуются реанимационные мероприятия. Смерть от полиорганной недостаточности.

Местная анафилаксия – анафилактическая реакция в коже (воспаление, некроз, геморрагический отек) при неоднократном введении лекарственного препарата в одно и то же место. (так называемые «ягодичные реакции»).

Анафилаксию (общую и местную) можно воспроизвести в эксперименте.

Анафилактический шок в классическом эксперименте воспроизводится у морских свинок, сенсибилизированных лошадиной сывороткой. Пик сенсибилизации наступает через 2 недели. При введении разрешающей дозы Ag (в 5-10 раз превышающей сенсибилизирующую дозу) развивается тяжелая генерализованная реакция, которая заканчивается смертью животного через 5-10 минут. Клиника анафилактического шока у морских свинок схожа с таковой у человека. Тяжесть и скорость развития симптомов обусловлена внутривенным введением Ag и быстрым распространением по кровеносному руслу. Если животное не погибает, то в течение определенного времени введение аллергена не вызывает аллергической реакции, то есть развивается состояние десенсибилизации. Отсутствие реакции обусловлено отсутствием At, «истраченных» в стадию анафилактического шока (наличием блокирующих At класса G).

Таким образом, этапами экспериментального воспроизведения анафилаксии явлются: сенсибилизация, анафилактический шок, десенсибилизация.

Местная анафилаксия в эксперименте называется феноменом Овери и может быть воспроизведена в 2 вариантах: а) активном и б) пассивном.

Активный феномен Овери: сенсибилизированной чужеродным белком морской свинке вводят разрешающую дозу Ag внутрикожно сместе с красителем (синий Эванса). В месте введения развивается воспаление, ткани при этом окрашиваются в синий цвет (из-за повышения проницаемости стенки сосудов и выхода красителя). Активным его называют потому, что свинка активно вырабатывает At в стадию сенсибилизации (активная сенсибилизация).

Пассивный феномен Овери: свинка несенсибилизирована (интактна). Ей одновременно вводят чужеродный белок (Ag), сыворотку другой свинки (сенсибилизированной к данному белку) и значит, содержащую специфические At, и краситель. Результат (местные изменения) – тот же. Пассивным этот вариант называют потому, что нет активной выработки At в организме подопытной свинки, ей вводят готовые At.

2. Патогенез лихорадочных реакций:

Первичные пирогены взаимодействуют с лейкоцитами, эндотелиоцитами и др. клетками организма, стимулируя в них выработку вторичных пирогенов. Вторичные пирогены (пирогенные цитокины) с током крови достигают нейронов центра терморегуляции (преоптической зоны переднего гипоталамуса) и активируют фосфолипазу А_2, входящую в состав их мембраны. Фосфолипаза А₂ расщепляет фосфолипиды нейрональных мембран, вследствие чего образуется арахидоновая кислота. Из нее при участии фермента циклооксигеназы образуются простагландины Е₁ и Е₂. Эти медиаторы снижают активность фосфодиэстеразы, что ведет к увеличению содержания цАМФ в нейронах. В результате нейроны теряют Са ²⁺, нарушается обмен и функция нейронов.

К чему это приводит? Прежде:

Однако нейроны центра терморегуляции неоднородны в функциональном отношении. Различают термочувствительные и термонечувствительные нейроны.

Термочувствительные, в свою очередь, делятся на холодочувствительные и теплочувствительные. Их функция – воспринимать информацию от периферических (поверхностных и глубоких) терморецепторов.

Термонечувствительные нейроны – «глухие» к колебаниям температуры. Функция этих нейронов – генерировать эталонные сигналы (электрические импульсы строго определенных характеристик), которые служат сигналами сравнения для термочувствительных нейронов при оценке информации, поступающей с периферии. Параметры этих сигналов определяют установочную точку центра терморегуляции, то есть нормальный уровень температуры тела.

Существует 2 гипотезы относительно влияния вторичных пирогенов на центр терморегуляции. Согласно первой, при действии вторичных пирогенов происходит изменение функции нейронов термоустановочной точки, вследствие чего они начинают генерировать искаженные эталонные сигналы и, значит, меняется (повышается) точка температурного гомеостаза.

Согласно второй гипотезе, вторичные пирогены меняют активность термочувствительных нейронов: активность теплочувствительных снижается, а активность холодочувствительных – повышается. Как следствие, понижается порог чувствительности центра терморегуляции к холоду, и нормальная температура тела воспринимается как пониженная. Дезориентированный центр терморегуляции «дает команду» согреться и повышает точку температурного гомеостаза.

В любом случае, происходит временное запрограммированное активное разогревание организма в соответствии с новой установочной точкой. Реализуется оно за счет физиологических (неизмененных) механизмов терморегуляции (тех же, что и в норме: теплоотдача и теплопродукция) и длится, столько, сколько времени вырабатываются вторичные пирогены.

3. Местные признаки воспаления. Механизм образования. Связь местных и общих признаков