- •1. Предмет и задачи Биотехнологии.
- •2. Отличие современной биотехнологии от традиционных микробиологических производств.
- •3. Значение Биотехнологии, основные тенденции и перспективные направления науки в Беларуси.
- •4. Использование микроорганизмов (дрожжей, бактерий, грибов, водорослей) в биотехнологии.
- •5.Производство кормового белка.
- •7. Требования к продуцентам:
- •8.Выделение и селекция микроорганизмов-продуцентов бав.
- •9. Использование микробных почвоудобрительных препаратов.
- •10. Методы рекомбинантных днк.
- •11. Клонирование и экспрессия генов в различных организмах.
- •12. Ферменты,использум в биотех. Рекомб.
- •15. Получение трансгенных растений.
- •16. Применение методов генет-кой инженерии для улучшения аминокислотного состава запасных белков растений.
- •18. Устойчивость растений к фитопатогенам и насекомым вредителям, гербицидам, абиотическим стрессам.
- •19. Использование генетической инженерии в животноводстве.
- •20 Требования, предъявляемые к питательным субстратам, использующимся в биотехнологических процессах.
- •22. Сырьевая база биотехнологии.
- •23.Питательные среды для ферментационных.
- •24. Природные сырьевые материалы.
- •25.Отходы производства как потенциальные субстраты для культивирования биолог-х объектов.
- •26. Устройство и основные конструкторские детали ферментеров и биореакторов.
- •27. Системы пеногашения, теплообмена, аэрирования и перемешивания, асептики и стерилизация, используемые в ферментерах.
- •29. Хемостаты и турбидостаты.
- •32.Кривая роста популяции клеток, хар-ка отдельных фаз и получение целевых продуктов.
15. Получение трансгенных растений.
Генно-инженерные методы, позволяют создавать новые генотипы и, следовательно, новые формы растений гораздо быстрее, чем классические методы селекции. В сельскохозяйственные растения можно ввести гены устойчивости к стрессовым факторам, фитопатогенам, гербицидам и пестицидам, гены скороспелости, а также можно расширить круг культурных растений, способных к симбиотической фиксации азота и т.д.
Генетическая трансформация заключается главным образом в переносе чужеродных или модифицированных генов в клетки эукариот и получении растений из трансформированных клеток при регенерации. Получение растений с новыми свойствами (трансгенных растений) из трансформированных клеток возможно благодаря их свойству тотипотентности, т.е. способности клеток развиваться в целое растение.Перенос генов в растительные клетки, и их встраивание в геном растений (трансформация) осуществляются благодаря специфическим векторам-переносчикам, сконструированным на основе плазмид, вирусов, хлоропластной и метохондриальной ДНК и др.Наиболее широкое применение получили векторы на основе Ti-плазмид, выделенных из некоторых видов агробактерий. Агробактерии заражают двудольные растения, вызывая образование опухолей — корончатых галлов. Способность агробактерий к образованию опухоли связана с большой внехромосомнойплазмидой, получившей название Ti-плазмида.
Ti-плазмиды — это естественные векторы, обладающие всеми функциями, необходимыми для переноса, стабильного включения и экспрессии генетической информации в растениях. Они имеют широкий круг хозяев и различаются по типу кодируемых опинов — белков, которые используются бактериями в качестве источников азота и углерода. Различают два типа опинов: либо октопин (октопиноваяплазмида), либо нопалин (нопалиноваяплазмида).Кроме плазмид в качестве векторов применяют ДНК-содержащие вирусы растений. Наиболее изученный представитель группы вирусов с двухцепочечной ДНК — вирус мозаики цветной капусты. Как потенциальные векторы вирусы имеют ряд положительных характеристик: малый размер генома, позволяющий легко манипулировать вирусной ДНК, высокая копийность в клетках растений, наличие сильных промоторов, позволяющих обеспечить высокую эффективность экспрессии чужеродных генов. Однако вирусные векторы обладают небольшой емкостью.
Существуют так же методы прямого переноса генов в растения. К ним относятся:
1. Трансформация растительных протопластов. Осуществляется благодаря комбинации методик кальциевой преципитации ДНК и слияния протопластов. 2. Культуру протопластов на начальной стадии ее роста заражают агробактериями, которые используют в качестве векторов. 3. Микроинъекции ДНК. Аналогичен методу микроинъекций животных клеток. 4. Метод электропорации. Основан на повышении проницаемости биомембран за счет действия импульсов высокого напряжения. В результате молекулы ДНК проникают в клетки через поры в клеточной мембране.5. Упаковка в липосомы: один из методов, позволяющих защищать экзогенный генетический материал от разрушения нуклеазами растительной клетки.