17.2. Технология препаратов индивидуальных веществ

Процесс получения препаратов индивидуальных веществ многостадийный и может быть представлен следующей схемой: подготовка сырья и экстрагента, экстрагирование лекарственного сырья, очистка полу­ченного извлечения, выделение суммы индивидуальных веществ (или вещества), стандартизация.

При получении извлечения большое внимание уделяется выбору экстрагента, как и в технологии других экстракционных препаратов. Его подбирают в зависимости от физико-химических свойств выде­ляемых индивидуальных веществ. Для экстрагирова­ния лабильных сердечных гликозидов используют 90—95 % этанол, метанол (при получении иеланида), которые обладают селективной способность^ в отно­шении этих биологически активных соединений, и в то

444

же время инактиЕируют ферменты, содержащиеся наряду с сердчными гликозидами в растительном материале и тем самым исключают гидролитическое расщепление гликозидов; ацетон; смесь метилена хлористого и этанола (в технологии дигитоксина); другие растворители. С целью сохранения нативности биологически активных веществ экстракция комплекса сердечных гликозидов, чувствительных к повышенной температуре, проводится на холоду, при строго регла­ментированном значении рН среды.

Для экстрагирования алкалоидов применяют раз­личные растворители, строго соблюдая определенный режим экстрагирования, обращая особое внимание на значение рН среды, так как от этого зависит степень экстракции алкалоидов. Положение, согласно которо­му алкалоиды экстрагируются органическим раствори­телем только из щелочной среды, справедливо лишь для отдельных представителей этого класса соедине­ний. Большинство алкалоидов экстрагируется из ра­створов как кислой, так и щелочной среды, но для каждого имеется определенная, довольно узкая об­ласть значений рН, при которых он извлекается в максимальных количествах. В качестве органических растворителей используют хлороформ, дихлорэтан, бензол, спирт изоамиловый, спирт изопропиловый, предпочитая последний, как менее ядовитый и деше­вый. Для экстрагирования флавоноидов чаще при­меняют этанол, для кумаринов — метанол.

Экстрагирование проводят дробной мацерацией по принципу противотока, мацерацией с циркуляцией экстрагента.

Иногда перед экстрагированием сырье специально обрабатывают (ферментация при производстве диги­токсина).

Из полученного извлечения экстрагент удаляют упариванием (отгонкой) в роторных испарителях, в которых вытяжка подвергается кратковременному контакту с поверхностью теплоносителя при сравни­тельно большой площади испарения и глубоком вакууме (остаточное давление 1333,22—1999,83 Н/м²). Для уменьшения потерь органического растворителя на всех стадиях упаривания охлаждение паров осуществляют рассолом.

Очистка вытяжек проводится такими же щадящи­ми методами, как при получении максимально очи-

445

щенных препаратов, но все операции повторяются многократно. На первых стадиях очистки извлечения применяют фракционное избирательное осаждение действующих или сопутствующих веществ (часто путем смены растворителей), жидкостную очистку— экстракцию жидкость — жидкостью (в перфораторах), абсорбционную хроматографию (для очистки и раз­деления сердечных гликозидов), ионообменную хро­матографию на смолах КАУ-1, КАУ-2 (для очистки водных вытяжек, содержащих алкалоиды)

Очищенные вытяжки (элюаты) упаривают под вакуумом при остаточном давлении 6666,1 —10665,76 Н/м² и получают, как правило, суммарный препарат, пред­ставляющий собой смесь нескольких индивидуальных веществ.

Для разделения суммы индивидуальных веществ проводят многократную перекристаллизацию до выде­ления из суммы одного вещества.

Стандартизуют готовый продукт по содержанию действующих веществ или активности в ЕД.

В качестве примера приводим технологию препа­ратов гликозидов.

Дигитоксин (Digitoxinum) получают при ферментации листьев, экстрагировании из них дей­ствующих веществ, очистке вытяжки, выделении суммы гликозидов, получении дигитоксина, стандар­тизации.

Предварительная ферментация листьев увеличива­ет выход дигитоксина в 4 раза. С этой целью измель­ченные листья наперстянки замачивают водой (37— 40 °С) и оставляют при этой температуре на 40—48 ч Листья после ферментации помещают в реактор с мешалкой и трижды экстрагируют смесью метилена хлористого и этанола. Полученную вытяжку упарива­ют под вакуумом при температуре 50 °С. Концентри­рованный экстракт обрабатывают формамидом и про­водят очистку (жидкостную экстракцию), обрабаты­вая вытяжку бензолом 5 раз, смесью бензола и хлоро­форма (3:2) до 10 раз. Вытяжку упаривают под вакуумом, остаток растворяют в хлороформе. Хлоро­формный раствор сердечных гликозидов переносят на колонку с алюминия оксидом для их распределе­ния: в верхнем участке — гитоксин, в нижнем—ди­гитоксин.

Дигитоксин элюируют с алюминия оксида мета-

446

нолом под контролем Уф-лампы. Дигитоксин имеет голубое свечение, гитоксин — коричневое. Элюат, со­держащий дигитоксин, упаривают под вакуумом досуха. Остаток растворяют в ацетоне, упаривают под вакуумом, добавляют бензол и оставляют для кристаллизации дигитоксина. Перекристаллизацию повторяют несколько раз при комнатной температуре. Кристаллы промывают этанолом и высушивают на воздухе.

Дигитоксин — белый кристаллический порошок, практически нерастворимый в воде, мало растворим в этаноле и хлороформе, очень мало в эфире. 1,0 г

должен содержать 8000—10 000 ЛЕД, в.р.д. внутрь -

0,0005 г, в.с.д. — 0,001 г Формы выпуска, таблетки по 0,0001 г и свечи по 0,00015 г Хранение по списку А, в прохладном, защищенном от света месте

Ц е л а н и д, д и г о к с и н (Celanidum, Digoxi num) получают из листьев наперстянки шерстистой Дигоксин представляет собой вторичный гликозид. Его получают путем ферментативного и щелочного гидролиза целанида. В качестве экстрагента исполь­зуют 90 % метанол. Вытяжку подвергают многократ ной очистке путем смены растворителя, экстракции жидкость — жидкостью и хроматографирования на алюминия оксиде. Из очищенного раствора на холоду выпадает кристаллический осадок, представляющий собой сумму гликозидов (дигиланиды А, В, С),— тех нический продукт. Его растворяют в этаноле при нагревании с углем активированным и оставляют на холоду для кристаллизации Выпавшие кристаллы представляют собой смесь нативных гликозидов дигиланиды А, В, С Стандартизацию проводят био­логическим путем. 1,0 г препарата должен содержать 14 000 ЛЕД. Это белый кристаллический порошок, мало растворим в воде и этаноле, растворим в метано­ле. Чувствителен к свету Хранят по списку А.

Целанид выделяют из смеси гликозидов методом жидкостной экстракции. Готовят две фазы тяже­лую—с плотностью, равной 1,3150 (дихлорэтан и хлороформ), и легкую — с плотностью 0,9460 (метанол и вода). Смешивают обе фазы в соотношении 1:1 и растворяют кристаллы гликозидов — дигиланидов А, В, С -В тяжелой фазе остаются дигиланиды А и В, в легкую переходит дигиланид С. Эту фазу фильтруют через стеклянный фильтр № 3, промывают холодной

447

водой (5—10 °С) и кристаллизуют, затем многократно перекристаллизовывают из этанола и сушат под вакуумом Целанид в 1,0 г должен содержать 14 000—16 000 ЛЕД. Это белый кристаллический по­рошок, очень мало растворим в воде и этаноле. При приеме внутрь в.р.д. — 0,0005 г, в.с.д. — 0,001 г, внутривенно в.р.д. — 0,0004 г, в.с.д. — 0,0008 г. Формы выпуска: таблетки по 0,00025 г и растворы для инъек­ций 0,02 % и 0,05 %. Хранение по списку А в герме­тически закрытых банках оранжевого стекла.

В настоящее время разработана технология ди токсина Схема процесса близка к таковой для диги-токсина. Получают препарат из предварительно ферментированных листьев экстрагированием смесью метилена хлористого и этанола с последующей очист кой вытяжки и разделением суммы гликозидов хрома-тографированием на алюминия оксиде с последующим щелочным гидролизом продукта.

Дигоксин — белый кристаллический порошок, пло­хо растворим в воде. Лекарственная форма — таблет­ки по 0,00025 г для взрослых и по 0,0001 г — для детей. Хранят по списку А.

Все препараты наперстянок оказывают выраженное кардиотоническое действие и широко применяются в современной медицине. Терапевтическое действие гликозидов наперстянки проявляется гораздо медлен­нее, чем полярных гликозидов типа строфанта. Эф­фективность сердечных гликозидов зависит от степени абсорбции, фиксации их клетками сердечной мышцы, скорости метаболизма и выведения. Плохая раствори­мость гликозидов наперстянки обусловливает их недостаточную абсорбцию, особенно в течение первых часов после приема, отсюда — замедленное терапевти­ческое действие. Кроме того, биологическая доступ­ность плохо растворимых лекарственных веществ зависит от размера частиц, вводимых по типу су­спензии

С целью достижения максимального терапевти­ческого эффекта лекарственные вещества должны находиться в молекулярно-дисперсном состоянии. В связи с этим предложено для получения лекар­ственных форм препаратов наперстянок использовать твердые дисперсные системы, т. е. такие, где лекар­ственное вещество диспергировано в твердом носите­ле (матрице) путем сплавления или растворения.

448

Для улучшения абсорбции дигитоксина и дигокси-на разработана технология твердых дисперсных систем с поливинилпирролидоном.

Установлено, что использование дигоксина в виде твердых дисперсных систем позволяет увеличить скорость его растворения и время наступления тера­певтического действия.

В качестве примера приводим технологию препара­тов алкалоидов.

Эрготамина гидротартрат (Ergotamini hydrotartratis) экстрагируют из рожков спорыньи, вы­тяжку очищают, получают сумму алкалоидов, выде­ляют эрготамина сульфат, эрготамина-бензолкристал-лы, эрготамина-ацетон-кристаллы, эрготамина гидро­тартрат.

Все операции проводятся в затемненном помеще­нии, при красном свете и пониженной температуре.

Измельченные до 0,8—2 мм склероции спорыньи замачивают 5 % раствором аммиака, хорошо пере­мешивают и переносят в экстрактор с мешалкой. Экстракцию проводят дихлорэтаном методом бисма-церации: сначала настаивая 5 ч, затем — 3 ч, перио­дически перемешивая. Полученную вытяжку фильтру­ют через полотно на друк-фильтре. Дальнейшую очистку проводят сменой растворителя — фильтрат обрабатывают 2 % раствором кислоты виннокаменной, затем подщелачивают 25 % раствором аммиака до значения рН 8—9 и извлекают алкалоиды хлорофор­мом. Хлороформный раствор алкалоидов обезвожи­вают, фильтруют и упаривают под вакуумом. Упарен­ное извлечение вливают в 7-кратный объем эфира петролейного и оставляют на 5 ч в холодильнике. Выпадает кристаллический осадок, содержащий сумму алкалоидов, его сушат в токе азота, углерода диокси­да или под вакуумом при температуре не выше 60 °С. Осадок растворяют в кислоте уксусной ледяной (на водяной бане при температуре 35—37°С), обрабаты­вают 1 % раствором кислоты серной в метаноле и выдерживают при температуре 20 °С 48 ч. Выпадают кристаллы эрготамина сульфата. Их сушат под вакуумом 4 ч (без нагревания). Обрабатывают смесью бензола с метанолом и подщелачивают 10 % раство­ром аммиака в метаноле, добавляя его по каплям до значения рН 7,0. Раствор упаривают в токе азота при температуре 60 °С, охлаждают и оставляют на

15—942 449

4 ч, получают эрготамин-бензол-кристаллы, которые промывают водой дистиллированной до отрицательной реакции на сульфаты, затем бензолом, сушат и очища­ют от сопутствующих веществ. Кристаллы растворяют в смеси метанола и эфира, пропуская через колонку х: алюминия оксидом для осаждения балластных веществ, а очищенный раствор эрготамин-бензола упаривают в токе азота. В растворе остаются про­дукты окисления, сопутствующие алкалоиды, выпада­ют кристаллы эрготамин-бензола. Кристаллы раство­ряют в водном растворе ацетона, охлаждают при температуре 5 °С в течение 2 ч. Осаждающиеся кристаллы эрготамин-ацетона промывают 90 % ацето­ном, сушат в вакуум-эксикаторе в течение 24 ч, растворяют в метаноле и добавляют 5,2 % раствор кислоты виннокаменной. Выдерживают смесь в холо­дильнике в течение 2 ч, выпадают кристаллы эрго-тамина гидротартрата. Операцию проводят быстро, чтобы вновь не образовались эрготамин-ацетон-кри-сталлы. Осадок отфильтровывают, промывают 90 % раствором метанола и сушат под вакуумом при тем­пературе 20 °С. Метанольный маточник после отделе­ния эрготамина гидротартрата передают на производ­ство эргометрина.

Эрготамина гидротартрат—кристаллический поро­шок, без запаха, белого цвета, иногда с сероватым оттенком, мало растворим в воде и этаноле. Формы выпуска: ампулы по 1 мл 0,05 % раствора, флаконы по 10 мл 0,1 % раствора, таблетки (драже) по 0,001 г. Внутрь в.р.д. — 0,002 г, в.с.д. — 0,004 г, для подкож­ного введения в.р.д. — 0,0005 г, в.с.д. — 0,002 г. Хра­нение по списку А, в защищенном от света месте, при температуре не выше 10 °С.

Эрготамнн является составной частью таблеток «Кофетамин», «Беллатаминал», «Ригетамин» и др.

Эргометрина малеат (Ergometrini ma-leas) получают из метанольных маточников, содер­жащих алкалоиды, в том числе эргометрин, после осаждения эрготамина тартрата. Так как эргометрин растворим в воде, маточники обрабатывают водой (1:1), упаривают под вакуумом и получают водный раствор эргометрина. Далее проводят очистку жид­костной экстракцией, обрабатывая раствор хлорофор­мом, в который переходят алкалоиды, плохо раство­римые в воде. Очищенный водный раствор эргометри-

450

на подщелачивают аммиаком и извлекают эргометрин хлороформом. Хлороформный раствор эргометрина обезвоживают, упаривают в токе инертного газа .и получают эргометрин-хлороформ (двойное соедине-.ние), его растворяют в ацетоне (рН 5,0) v добавлени­ем 3 % раствора кислоты малеиновой на холоду кристаллизуют эргометрина малеат. Эргометрина малеат получают и из сырья обработкой рожков спорыньи раствором кислоты виннокаменной при температуре 20° в течение 3 ч в соотношении 1:15. -Алкалоиды адсорбируют в колонке на кизельгуре, .элюируют хлороформом (рН 9,0) и отгоняют его под вакуумом в токе инертного газа. Остаток, содержащий эргометрин-основание, выдерживают при температуре 5°, растворяют при нагревании в безводном ацетоне, очищают добавлением угля активированного и осаж­дают эргометрина малеат 3 % раствором кислоты малеиновой в ацетоне, внося ее по каплям, с после­дующей перекристаллизацией из 50 % этанола. Кри­сталлы сушат над фосфора оксидом.

Формы выпуска: таблетки по 0,0002 г эргометрина малеата и ампулы по 0,5 и 1 мл 0,02 % раствора. Хранение по списку Б, в защищенном от света месте, при температуре не выше 10 °С.

Контрольные вопросы

1. Какова общая схема получения препаратов индивидуальных веществ из лекарственного растительного сырья?

2. Чем руководствуются при выборе экстрагента в производ­ стве этой группы препаратов?

3. Какими способами осуществляется выделение суммы инди­ видуальных веществ из полученных/ вытяжек?

■ 4. Каковы особенности очистки извлечений из лекарственного

растительного сырья?

5. Каковы частные технологические схемы приготовления "■ • - препаратов индивидуальных веществ?