Введение

Санитарная микробиология - наука о микрофлоре окружающей среды (воздуха, воды, почвы и др.) и связанных с ней процессах, которые могут оказать неблагоприятное влияние на здоровье людей.

С помощью санитарно-микробиологических исследований решают вопрос о наличии или степени вероятности присутствия опасных для человека микробов или их токсинов в объектах внешней среды (воде, воздухе, почве, пищевых продуктах, лекарствах, различных материалах, оборудовании и др.)

Целью санитарно-микробиологического исследования может быть:

• определение присутствия (отсутствия) определенной группы микроорганизмов в определенном объеме (массе) объекта, например, в 1 см³ или в 25 г;

• определение количества микроорганизмов определенной группы в единице объема (массы).

Для обнаружения микроорганизмов в объекте и оценки их количества могут быть использованы различные методы, однако на практике в настоящее время используются два, чаще всего бактериологический, реже микро­скопический.

Основными этапами санитарно-микробиологического исследования в случае применения бактериологического метода являются: гомогенизация образца, десорбция микроорганизмов с плотных частиц, приготовление разведений, посев на питательные среды, идентификация выделенных микроор­ганизмов.

Гомогенизация образца необходима в связи с возможностью неравномерного распределения бактерий в анализируемом объекте. В зависимости от характеристик исследуемого материала для этих целей используют различ­ные методические приемы: от перемешивания простым встряхиванием при исследовании жидкостей до использования специальных приборов при ис­следовании пищевых продуктов.

Десорбция бактерий с плотных частиц требуется при исследовании объектов твердой консистенции. Для этого исследуемый материал (почва, пищевые продукты и т.п.) либо суспендируют в жидкости, либо с поверхности объекта (оборудование, руки работающих и т.д.) берут смывы или отпе­чатки. В случае суспендирования, как правило, к навеске объекта весом 10 г добавляют 90 см³ воды. Затем сосуд интенсивно встряхивают вручную или с помощью специального приспособления. В дальнейшем условно принимают 1 см³ полученной суспензии эквивалентным 0,1 г исходного материала. При взятии смывов заданную площадь поверхности протирают тампоном (сал­феткой), увлажненным стерильным физиологическим раствором, водой или питательной средой. Затем тампон (салфетку) погружают в пробирку с опре­деленным объемом жидкости для десорбции микроорганизмов с его поверх­ности. Взятие отпечатков осуществляют, прикладывая к поверхности пред­мета плотную питательную среду посредством специальных приспособлений.

Приготовление разведений - этап, необходимый в случае определения количества микроорганизмов в объекте. В санитарной микробиологии чаще всего используются десятикратные разведения, то есть такие, в которых кон­центрация бактерий в каждом последующем разведении в 10 раз меньше чем в предыдущем.

Техника подготовки пробы и приготовления разведений существенно влияет на достоверность получаемых в конечном итоге результатов. Поэтому техника работы с конкретными видами исследуемого материала всегда ого­варивается в специальных нормативных документах.

Техника посева на питательные среды зависит от вида исследуемого материала и целей исследования. Если нормируется отсутствие определен­ных групп микроорганизмов, то на питательные среды непосредственно засе­вается то количество материала или его суспензии, в котором искомых бак­терий не должно быть. Для определения количества бактерий в материале используются специальные методы посева мерного материала на питательный агар с подсчётом выросших колоний (1 колонию обычно образует одна клетка). Результат выражают в колониеобразующих единицах - КОЕ/мл, КОЕ/г или КОЕ /см³. Если, например, на чашке с посевом 1 см³ воды, разведённой 1:1000, выросло 120 колоний, таким образом, микробное число составит 1,2·10⁵.

Главной целью санитарной микробиологии является оценка объектов окружающей среды с точки зрения инфекционной опасности для здоровья человека. Непосредственно обнаружить патогенные микробы в объектах внешней среды чрезвычайно трудно ввиду их малой концентрации. В санитарной микробиологии степень эпидемиологической опасности определяют по косвенным показателям загрязнения внешней среды патогенными микроорганизмами. К косвенным показателям отнесли микроорганизмы, постоянно обитающие в организме человека и животных (толстом отделе кишечника и верхнем отделе дыхательных путей), такие микроорганизмы называются санитарно-показательными (СПМ). В качестве санитарно-показательных выбраны микробы, отвечающие следующим требованиям:

• постоянно и в больших количествах присутствующие в выделениях человека и теплокровных животных;

• не имеющие других природных резервуаров или естественных сред обитания;

• сохраняющиеся в объектах в течение определенных сроков, близких к срокам выживания патогенных микробов;

• не размножающиеся (интенсивно) в объектах внешней среды;

• легко идентифицируемые, поддающиеся количественному опре­делению.

Например, основной показатель фекального загрязнения почвы, пищевых продуктов, рук, спецодежды персонала, воды, лабора­торной посуды, предметов обихода, лекарственных средств — бак­терии группы кишечной палочки (БГКП) или колиформные бак­терии. Воздух оценивают по содержанию стафилококков и стреп­тококков, попадающих в него вместе с другими микробами из дыхательных путей и полости рта человека. К СПМ относят также эшерихии, клостридии, энтерококки, колифаги (бактериофаги), бактерии рода Proteus. Другими микробами, отражающими санитарное неблагополучие того или иного объекта, являются дрожжевые и плесневые грибы, синегнойная палочка, сальмонеллы. Характеристика микроорганизмов приводится в приложении 1.

В ходе оценки состояния объекта определяют индекс — количе­ство СПМ в единице объема (1 литр, 1 г или 1 кубометр) матери­ала или титр — наименьший объем (в см³), или весовое количе­ство (в г) материала, в котором еще обнаруживаются санитарно-показательные микробы.

Точность санитарно-микробиологических исследований обеспечивается: правильным отбором, хранением и транспортиров­кой проб в лабораторию, использованием стандартных методов, комплексностью исследования и его повторностью.

Точная видовая принад­лежность выделенных культур определяется не всегда. Параметры, на осно­вании которых выделенный микроорганизм относится к той или иной группе определяются нормативно-техническими документами, регламентирующими ход исследования тех или иных видов материалов.