- •Санитарная микробиология
- •Введение
- •Лабораторная работа № 1 Общие правила в микробиологии
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа № 2 Микробиологические методы исследования
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа № 3 Микробиологическое исследование мяса и продукции из мяса
- •И кислоты Определение St. Aureus (отсутствие в 1 г)
- •Микробиологическая схема посева
- •Определение бгкп (отсутствие в 1 г)
- •Определение бактерии рода Salmonella
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа № 4 Микробиологическое исследование рыбы и рыбных изделий
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа № 5 Микробиологическое исследование молока и молочных изделий
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа № 6 Микробиологическое исследование плодоовощной продукции
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа № 8 Микробиологическое исследование воды централизованного водоснабжения (му 4.2.1018-01)
- •Определения понятий показателей
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа № 9 Микробиологическое исследование воздуха
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа № 10 Санитарно-микробиологическое исследование оборудования, рук и спецодежды персонала
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа № 11 Санитарно-гигиеническое исследование почвы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №12 Определение наиболее вероятного числа (нвч) микроорганизмов по методу предельных разведений
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №13 Микробиологическое исследование воды поверхностных водоёмов
- •500 См3 проб
- •Контрольные вопросы
- •Гигиенические требования безопасности консервированных пищевых продуктов
- •Микробиологический контроль санитарного состояния производства
- •Приготовление питательных сред
- •Расчёт наиболее вероятного числа бактерий в 100 см3 воды поверхностных водоёмов, обеззараженных сточных вод
- •Список использованной литературы:
Контрольные вопросы
Какие документы регламентируют санитарно-микробиологическое исследование воды открытых водоёмов?
Определения показателей ОКБ и ТКБ? В чём заключается значение этих показателей при оценке санитарного состояния водоёмов?
Определение показателя ОМЧ, в чём заключается значение этого показателя?
Какими методами определяются ОКБ, ТКБ и ОМЧ?
Как выражаются результаты анализа ОКБ, ТКБ и ОМЧ?
Приложение 1
Характеристика микроорганизмов
Название патогенной группы |
Морфология |
Культуральные свойства |
Биохимические свойства |
Устойчивость |
Сан.-показ. значение отдельных родов |
Дифференциа - ция |
Примеча- ния |
БГКП Семейство: Enterobacteria - ceae роды: Escherichia (E.coli) Citrobacter (Citr.coli.citro- vorum) Enterobacter (Ent.aerogenes)
|
Короткие (дл. – 1-3 мкм, шир. - 0,5 - 0,8 мкм) поли- морфные, подвижные и неподвижные гр. «–» палоч- ки без спор |
Рост на средах: МПБ – помутнение среды, сероватый осадок, есть присте- ночное кольцо; МПА – прозрачные, серовато-голубые колонии; Эндо – плоские красные колонии с мет.блеском (E.coli) или без (Ent.aeroge- nes). |
Не разжижают желатин, свер- тывают молоко, расщепляют пептоны с обра- зованием H2S, NH3, аминов, лактозу, глюко- зу, спирты. |
При 60 0С E.coli погибает через 15 мин., в 1%-м р-ре фенола – через 5-15 мин., в р-ре сулемы (1:1000) – че - рез 2 мин. |
Бактерии рода Escherichia - обитатели кишечника человека и жив-х - показатели фе- кального загрязнения воды, почвы, пищевых продуктов. Бактерии рода Citro- bacter и Enterobacter – показатели более давнего фекального за- грязнения. |
По ТИМАЦ Т – температур- ный И - индолообразо- вания М – реакция с ме- тиловым красным А – реакция на ацетилметилкар- бинол (ацетоин) Ц – цитратный Л – сбраживание Лактозы. Тест по Олькеницкому
Тест по Олькеницкому. Тесты с серологическими сыворотками
|
ГОСТ Р 50474-93, ГОСТ 30726 |
Бактерии рода Proteus (Pr.vulgaris, Pr.mirabilis, Pr.morganii, Pr.rettgeri) |
Полиморфные палочки, разме- ром 0,5-0,6 x 1,2-3 мкм, подвижные, не об- разующие спор и капсул, фа - культативные анаэробы. Гр. «–» |
Рост на средах: МПА - ползучий рост, тонкая проз- рачная пленка.
|
Сбраживают глюкозу с выделением кислоты и газа не ферментируют лактозу и маннит, расщепляют мочевину. Pr.vulgaris и Pr.mirabilis обладают протеолитической активностью, разжижает желатин, выделяет H2S, образует индол, сбраживает мальтозу. |
Погибают при 60 0С в течение 1 ч, при 80 0С - за 5 мин |
Обнаружение большо- го колич-ва Pr.vulgaris в почве, воде свидете - льствует о содержании в них и разрушении ор- ганических веществ животного происхож- дения. Бактерии этого рода применяют для санитарно-гигиеничес- кой оценки почвы, во- ды открытых водоемов. |
ГОСТ 28560-90 |
|
Род Salmonella
|
Мелкие палоч- ки с закруглен- ными концами, изредка оваль- ной формы, длиной 2-4 мкм, шириной 0,5 мкм. Иногда образуют нити.
|
Рост на средах: МПА – гладкие, круглые, очерчен- ные, полупрозрач- ные, выпуклые влаж- ные колонии с ме- тал.блеском, иногда со слегка вдавлен- ным центром. Плоскирева – бес- цветные прозрачные колонии Эндо – круглые бес- цветные или слегка розоватые прозрач- ные колонии Левина – прозрач- ные, слабо-розовые или розовато-фио- летовые колонии |
Не разжижают желатин, не фер- ментируют сахарозу, не раз- лагают лактозу, не образуют ин- дола, не расщеп- ляют мочевину, не дает реакции Фогеса-Проска- уэра, ферментиру- ют мальтозу, ман- нит, сорбит, рас- щепляет глюкозу с образованием газа, дает положи- тельную реакцию с метиловым красным, утили- зирует аммоний, редуцирует ни- траты, образует H2S |
Устойчивы к высушиванию, к действию низких темпе- ратур, к высоким кон- центрациям со- ли. Погибают при варке мяса (массой 500 г) в течение 3 ч при 100 0С. При пастериза- ции молока погибают в те- чение30 мин при 80 0С
|
Бактерии рода Salmonella относятся к патогенным микроорга- низмам, вызывающим пищевые токсикоин- фекции.
|
ГОСТ 30519-97 ( Р 50480 - 93) |
|
Семейство: Streptococ-ceae род: Enterococcus (Е.faecalis, Е.faecium)
|
Гр «+», поли- морфные, по- парно располо- женные кокки, вытянутые в длину, наруж- ные концы заострены, без спор и капсул, величина ко- леблется от 0,5 до 1,2 мкм. |
Рост на средах: МПА - мелкие, про- зрачные голубова- тые колонии. МПБ – помутнение с осадком.
|
Ферментируют лактозу, маннит, глицерин, а сор- бит, сахарозу и арабинозу не постоянно и не все штаммы, ка- талазоотри- цательные. |
Выдерживают t 60-65 0С в те- чение 30 мин, способны рас- ти в присутст- вии 6,5 % NaCl 40 % желчи, в средах с рН 9,6-10
|
Е.faecalis и его вари- анты - показатели заг- рязнения объекта фека- лиями человека; Энтерококки - санитар- но-показательные м/о при санитарной оценке воды открытых водоё - мов, при оценке качест- ва хлорирования питье- вой воды. |
Тесты Шермана: редукция телу- рита калия или ТТХ, фермента- ция сорбита и маннита, пептонизация мо- лока, гемолиз эритроцитов. |
ГОСТ 28566-90 |
род: Streptococcus (Str.haemoliti- cus, Str.viridans, Str.anhaemoliti- cus) |
Гр «+», непод- вижные кокки, имеющие фор- му шара d 0,8- 1 мкм, без спор и капсул. Обра- зуют короткие и длинные це- почки. |
Рост на средах: МПБ – мелкие хло- пья, зерна, оседаю- щие на дно. МПА – серовато-бе- лые, просвечиваю - щиеся, блестящие колонии. Кровяной агар – ге- молиз или зеленая окраская вокруг ко- лоний либо не изме- няют эритроцитов. |
Не разжижают желатин, фер- ментируют глю- козу, лактозу, са- харозу, мальтозу, и салицин. |
Под действием прямых солне- чных лучей по- гибают через 2-3 ч. При 70- 750С погибают через 1 ч., при кипячении - немедленно или через неск.сек. 3-5 % р-ры фе- нола, 2 % р-р формалина, су- лема (1:1000) убивают стреп- тококки через 15 мин. |
Являются постоянны- ми обитателями полости рта и верхних дыхательных путей человека. Их можно рассматривать в качестве показателей загрязнения воздуха носоглоточной микрофлорой.
|
||
Сульфит-редуци-рующие анаэробы семейство: Bacillaceae род: Clostridium (Cl.perfringens)
|
Cl.perfringens – гр«+», крупная, полиморф-ная, неподвиж-ная палочка, образует спору и капсулу
|
Рост на средах: Кровяной сахарный агар – крупные, се- ро-зеленые колонии, окруженные зоной гемолиза. Вильсона-Блера – в месте образования колоний - черные точки и пятна. Рост на молоке: образуется ноздрева- тый губчатый сгус - ток казеина. |
Свертывает моло- ко, ферментирует глюкозу, лактозу, сахарозу, мальто- зу, галактозу, же- латин разжижает медленно. |
Вегет.формы погибают при
мин, споры вы- держивают ки- пячение 1-2 ч. |
Cl.perfringens – показатель фекального загрязнения, это санитарно-показательный м/о при контроле эффективности очистки сточных вод. |
|
ГОСТ 29185-91 |
Стафило – кокки семейство: Micrococcaceae род: Staphylococcus (S.aureus, S.albus. S.citreus) |
Гр «+», непод- вижные кокки, имеющие фор- му шара d 0,8- 1 мкм, без спор и капсул. Рас- полагаются в виде гроздей винограда, иногда короткими цепочками или парными и одиночными кокками |
МПБ - помутнение с небольшим осадком, пленка и пристеноч- ное кольцо. МПА – выпуклые, с ровными краями колонии. |
Патогенные ста- филококки раз- жижают желатин, свертывают и пептонизируют молоко. Сбражи- вают лактозу, ма- льтозу, маннит, сахарозу. Проду- цируют каталазу, уреазу, аммиак и водород. |
В высушенных субстратах сох-раняются до 6 мес. При 70 - 75 0С погиба- ют через 10-40 м., при кипяче- нии – мгновен- но. 5 % р-р фе- нола действует губительно че- рез 15-30 мин. Чувствительны к анилиновым красителям и антибиотикам. |
Патогеннные стафило- кокки - индикаторы воздушно-капельного загрязнения некоторых объектов внешней среды. |
Проба на каталазу, реакция плазмокоагуляции, ферментация мальтозы в анаэробных условиях. |
ГОСТ 10444.2-94 |
Кишечные бактерио - фаги |
Фаг состоит из головки и от - ростка, кото- рый имеет вну- тренний стер- жень и наруж- ный сокращаю- щийся футляр. На конце от- ростка есть ба- зальная плас- тинка с зубца- ми, от которых отходят нити. |
Обладают способностью просветлять (лизировать) молодые бульонные куль- туры. Растворяют бактерии («пожиратели бак- терий»). Феномен лизиса культуры – бактериофагия. |
Большинство инактивирует - ся при 65-70 0С Хорошо пере- носят замора – живание и вы- сушивание. Чувствительны к кислотам. 1 % р-р форма- лина инактиви- рует фаг через несколько мин. |
Фаги – используют в качестве дополнитель- ного показателя фе- кального загрязнения воды патогенными энтеробактериями |
|
МУК 4.2.1078-01 Санитарно микробиологический анализ питьевой воды. |
|
Приложение 2
Микробиологические критерии доброкачественности пищевых продуктов в соответствии с СанПиН 2.3.2.1078-01
Вид продукта |
КМАФАнМ, КОЕ/г не более |
Масса продукта (г, см3) в которой не допускается |
Примеча-ние |
|||
БГКП (коли-формы) |
S.aureus |
Сульфит-редуцир-ующие клостридии |
Патоген-ные, в том числе сальмонел-ла и L. monocytogenes |
|||
Рыба охлаждён-ная мороженая |
1·103 |
0,001 |
0,01 |
- |
25 |
V. parahaemolyticus - не более 100 КОЕ/г для морской рыбы |
Пресервы из разделан-ной рыбы с добавлением масла |
2·103 |
0,01 |
1,0 |
0,01 |
25 |
Плесени не более 10 КОЕ/г, дрожжи не более 100 КОЕ/г |
Мясо, заморожен-ное убойных животных |
1·104 |
0,01 |
- |
- |
25 |
|
Колбасы вареные, сосиски, сардельки высшего и первого сорта |
1·103 |
1,0 |
1,0 |
0,01 |
25 |
|
Молоко пастеризо-ванное в потреби-тельской таре |
1·105 |
0,01 |
1 |
- |
25 |
|
Приложение 3
