Реакция непрямой гемагглютинации (рнга)

РНГА является своеобразной модификацией РА. Сущность реакции состоит в том, что молекулы антигена адсорбируются на поверхности эритроцитов. Такие "нагруженные" антигенами эритроциты приобретают способность агглютинироваться иммунной сывороткой, специфичной для данного антигена. Эритроциты склеиваются и выпадают в осадок, образуя на дне пробирки гемагглютинат. В последнее время РНГА получила широкое распространение благодаря высокой чувствительности, экспрессивности и простоте постановки.

В лунках полистироловых планшетов готовят ряд последовательных двукратных разведений сыворотки. В предпоследнюю лунку вносят - 0,5 мл заведомо положительной сыворотки и в последнюю 0,5 мл физиологического раствора (контроли). Затем во все лунки добавляют по 0,1 мл разведенного эритроцитарного диагностикума, встряхивают и помещают в термостат на 2 ч. В положительном случае эритроциты оседают на дне лунки в виде ровного слоя клеток со складчатым или зазубренным краем (перевернутый зонтик), в отрицательном - оседают в виде пуговки или колечка (табл. 9).

Таблица 9 Постановка реакции непрямой гемагглютинации
Ингредиеенты	Номера лунок панели					Контроли
	1-я	2-я	3-я	4-я	5-я		1-й	2-й
Изотонический раствор натрия хлорида, мл	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5		-	0,5
Исследуемая сыворотка в разведении 1:25, мл	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5		Заведомо положительная сыворотка 0,5	-
Полученное разведение сыворотки	1:50	1:100	1:200	1:400	1:800
Эритроцитарный диагностикум , мл	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1		0,1	0,1
Инкубация при 37°С в течение 2 ч в термостате.
Результаты	+++	+++	-	-	-		+++

Титр сыворотки 1:100

На эритроцитах можно адсорбировать не только антигены, но и антитела. В данном случае РНГА можно применять для индикации патогенных микробов во внешней среде. Для этого IgG сыворотки (фиксируют на поверхности бараньих эритроцитов. Разрешающая способность экспресс-индикации антигенов составляет несколько тысяч микробных тел в 1 мл.

Реакция латекс-агглютинации (РЛА)

Помимо эритроцитов, в качестве носителей антигенов или антител можно использовать частицы полистирольного латекса, которые служат носителями антигена и при образовании иммунных агрегатов играют роль "мостиков" между молекулами антител. Латексные частицы являются как бы искусственными эритроцитами, но более устойчивы к внешним воздействиям. Каплю суспензии такого латекса прибавляют к капле исследуемой сыворотки, тщательно перемешивают. При положительной реакции образуются мелкие, но хорошо видимые невооруженным глазом агглютинаты.

Реакция коагглютинации (РКА)

Белок А некоторых штаммов золотистого стафилококка способен неспецифически адсорбировать на своей поверхности Fc-фрагменты иммуноглобулина G (за исключением IgG₃). Получившаяся молекула способна агглютинировать гомологичные антигены.

Помимо частиц латекса, белка А в реакциях "антиген - антитело'' могут быть использованы и другие инертные носители (бентонит, каолин, активированный уголь и др.).