Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Praktikum_ekologii.doc
Скачиваний:
1
Добавлен:
01.05.2025
Размер:
1.6 Mб
Скачать

Работа 2. Обнаружение тяжелых металлов в растениях гистохимическим методом

Материалы и оборудование: 1) чашки Петри; 2) фильтровальная бумага; 3) маркер по стеклу; 4) термостат на 26 °С; 5) растворы Pb(NO3)2 (10­3 М), Cd(NO3)2 (10-4 M); 6) реактив дитизон (готовится непосредственно перед употреблением и не подлежит хранению); 7) растворы перманганата калия или формалина для обработки семян; 8) проростки кукурузы.

Ход работы

Работа состоит из двух этапов: 1) выращивание проростков на растворах солей; 2) приготовление срезов и их микроскопирование.

1. Зерновки кукурузы, предварительно обработанные в течение 10–20 минут слабым раствором формалина или перманганата калия, раскладывают по семь штук в чашки Петри на фильтровальную бумагу и наливают в каждую чашку по 15 мл дистиллированной воды (контроль), раствора Pb(NO3)2 в концентрации 10-3 М, раствора Cd(NO3)2 в концентрации 10-4 M. Чашки выдерживают в термостате при температуре 26 °С. Спустя семь дней проводят измерения длины главного корня, колеоптиля и зоны боковых корней. Для каждого варианта рассчитывают средние величины и определяют их процентное содержание по отношению к контролю (табл. 3).

Таблица 3

Влияние тяжелых металлов на проростки кукурузы

Вариант опыта

Длина главного корня

Длина колеоптиля

Длина зоны боковых корней

см

%

см

%

см

%

Контроль

100

100

100

Pb(NO3)2 (10-3 М)

Cd(NO3)2 (10-4 M)

2. Для определения локализации кадмия и свинца в растениях готовят серии поперечных срезов корня на разных расстояниях от апекса, а также срезы колеоптиля, мезокотиля и первых листьев на разных расстояниях от оснований.

Серии срезов помещают на предметное стекло, на него переносят 3–4 капли дитизона, накрывают покровным стеклом и через несколько минут рассматривают под микроскопом при разных увеличениях.

Задание: Заполнить табл. 3 и сделать вывод о влиянии тяжелых металлов на рост проростков. Сделать рисунки поперечных срезов корня и отметить локализацию в их тканях кадмия и свинца; сделать вывод о локализации кадмия и свинца в тканях корня и возможности продвижения тяжелых металлов по тканям; выяснить, существует ли барьер для передвижения тяжелых металлов по тканям корня.

Работа 3. Влияние солей тяжелых металлов на коагуляцию растительных и животных белков

Работа наглядно показывает действие солей биогенных и небиогенных тяжелых металлов на животные и растительные белки, выявляет разницу в реакции тех и других. Белки с тяжелыми металлами образуют комплексы, нерастворимые в воде.

Материалы и оборудование: 1) пробирки – 16 шт.; 2) пузырьки из-под пенициллина – 8 шт.; 3) стаканчик – 1 шт.; 4) пипетка на 1 мл – 1 шт.; 5) пипетка аптечная – 2 шт.; 6) стеклограф; 7) фильтровальная бумага; 8) 5 %-ный раствор CuSO4; 9) 5 %-ный раствор Pb(NO3)2; 10) дистиллированная вода; 11) животный белок (куриного яйца); 12) растительный белок (зернового гороха).

Ход работы

Приготовить в пузырьках от пенициллина серию растворов сульфата меди и нитрата свинца из исходного 5 %-ного раствора (2,5 %; 1,25 %; 0,62 %). В 8 пробирок пипеткой внести по 1 мл животного, а в другие 8 – по 1 мл растительного белка (для обеих солей всего 8 растворов). В каждую пробирку добавить по 2 капли одного из указанных растворов испытуемой соли. Все пробирки пометить стеклографом. Рассмотреть характер коагуляции на темном фоне (кусочек черной бумаги, доска и др.).

Таблица 4

Влияние солей тяжелых металлов на коагуляцию растительных

и животных белков

Название соли

Животный белок

Растительный белок

Концентрация раствора

5 %

2,5 %

1,25 %

0,62 %

5 %

2,5 %

1,25 %

0,62 %

Сульфат меди

Нитрат свинца

Приготовление растворов белков

  1. У куриного яйца отделить белок в мерный стаканчик, размешать его стеклянной палочкой в дистиллированной воде в соотношении 1:10. Затем профильтровать.

  2. Зерновой вызревший горох перемолоть в муку в кофемолке, развести в соотношении: 10 г гороховой муки на 50 мл 10 %-ного раствора NaCl или KCl. Профильтровать.

Задание: Заполнить табл.4 и определить концентрацию раствора соли, при которой происходит коагуляция белка (при разном виде солей и разном типе белков). На какой из видов белков сильнее всего действует сульфат меди и нитрат свинца? Какая соль сильнее действует на животный белок; на растительный белок? Почему?

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]