2. Этические проблемы в системе доклинических и клинических испытаний лекарств, регистрации лс

3.2.1. Доклинические исследования лс

Целью доклинических исследовании ЛС является получение науч­ными методами оценок и доказательств их эффективности и без­опасности.

Доклинические исследования ЛС включают в себя химические, физические, биологические, микробиологические, фармакологиче­ские, токсикологические и другие экспериментальные исследова­ния. Указанные исследования взаимозависимы. Так, в результа­те изучения острой токсичности потенциальных лекарственных соединений получают данные для последующих фармакологических исследований, которые, в свою очередь, определяют степень и про­должительность изучения хронической токсичности вещества.

При фармакологических исследованиях определяют терапевти­ческую эффективность препарата, а также его влияние на основные анатомические и физиологические системы организма. В процессе изучения фармакодинамики вещества устанавливают не только его специфическую активность, но и возможные побочные реакции, свя­занные с фармакологической активностью. Действие исследуемого препарата на здоровый и больной организм может различаться, поэ­тому фармакологические испытания должны проводиться на моделях соответствующих заболеваний или патологических состояний.

При токсикологических исследованиях устанавливают характер и выраженность возможного повреждающего воздействия препара­тов на экспериментальных животных. В токсикологических иссле­дованиях выделяют три этапа:

• изучение острой токсичности вещества при однократном вве­дении;

• определение хронической токсичности соединения, которое включает в себя повторные введения препарата на протяжении одного года, а иногда и более;

• установление специфической токсичности препарата - онкогенности, мутагенности, эмбриотоксичности, включая тератогенное действие, аллергизирующих свойств, а также способности вызывать лекарственную зависимость.

Доклининеские исследования ЛС в Российской Федерации проводятся в соответствии с Федеральным законом «О ЛСах». Согласно статье 36 «Доклинические исследования ЛС» закона доклинические иссле­дования ЛС проводятся организациями - разработчиками ЛС по правилам лабораторной практики, утвержденным федеральным органом контроля качества ЛС. Доклинические исследования ЛС на животных проводятся в соответствии с международными правила­ми. Контроль за соблюдением правовых и этических норм исполь­зования животных при проведении доклинических исследований ЛС осуществляется соответственно федеральным органом контроля качества ЛС и территориальными органами контроля качества ЛС.

Правила лабораторной практики в Российской Федерации (Ооос! ЬаЬогаЮгу Ргасйсе - СЬР РФ) (утверждены Приказом Министерства здравоохранения Российской Федерации от 19.06.2003 № 267) - это процедуры и требования в отношении оценок ЛС и использования экспериментальных животных при этом. Данным документом вве­дены обязательное составление и утверждение протокола экспери­мента, одобрение протокола эксперимента этическим комитетом или комиссией для определения допустимости и приемлемости экс­перимента. Также введена необходимость разработки и соблюдения стандартных операционных процедур для всех стадий и операций по обращению с животными. Исследователи должны обладать соот­ветствующей квалификацией и опытом, так как они несут ответс­твенность за анализ результатов и представление отчета об их работе руководителю испытания.

В документе указано, что доклинические исследования ЛС на животных проводятся в соответствии с международными прави­лами, с максимальной гуманностью умерщвления и проведения самих экспериментов. Потребление животными пищи и воды про­исходит в соответствии с протоколом исследований и принципом отсутствия в них патогенных микроорганизмов и вредных примесей. Должно достигаться максимальное документирование всех действий по приему, обслуживанию и экспериментированию с животны­ми. Большое внимание уделяется стандартизации тест-систем, т.е. использованию для экспериментов барьерных животных, живущих в стерильных условиях, лишенных патогенной микрофлоры, с опре­деленным генетическим статусом. Это дает возможность сократить разброс результатов, само количество экспериментов и, соответс­твенно, количество участвующих в них животных. Так, если необхо­димо получить высокостандартные и воспроизводимые результаты, в опытах применяют линейных (гомозиготных) животных, которых получают путем многократного близкородственного скрещивания. Линейные животные характеризуются определенными биологиче­скими свойствами, например восприимчивостью к инфекционным агентам, способностью к иммунному ответу.

СЬР РФ определяет необходимость достаточного количества помещений для животных или площадей для обеспечения раз­дельного содержания видов; животные должны содержаться при соответствующих условиях окружающей среды и в помещениях, подвергаемых уборке и удалению отходов. При проведении экспе­риментов должны соблюдаться правила обезболивания и эвтаназии. Содержание экспериментальных животных должно соответствовать действующим Санитарным правилам по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев).

Необходимость проведения доклинических исследований ЛС обусловле­на следующим:

• проведенные исследования на животных в соответствии с сов­ременными требованиями являются основой для оценки их без­опасного использования в медицинской практике;

• эксперименты на животных необходимы для развития меди­ко-биологических наук, поскольку позволяют лучше понимать законы и механизмы жизненных процессов;

• изучение повреждающего действия исследуемого препарата на организм экспериментальных животных позволяет определить, какие органы и ткани наиболее чувствительны к данному вещес­тву и на что следует обратить особое внимание при клинических испытаниях. Только в опытах на животных можно выявить воз­действие изучаемого вещества на органы с использованием гис­тологических методов оценки их структуры, влияние препаратов на внутриутробное развитие плода, возможное мутагенное или канцерогенное действие и ряд других воздействий. Как писал И.П. Павлов, «чем полнее будет проделан опыт на животных, тем менее часто больным придется быть в положении опытного объекта со всеми печальными последствиями».

Обоснование необходимости предварительного проведения опы­тов на животных перед первым испытанием новых лекарств на людях содержится в Хельсинкской декларации, где утверждает­ся, что биомедицинские исследования на людях должны отвечать общепринятым научным принципам и основываться на адекватно выполненных лабораторных опытах и экспериментах на животных, а также исчерпывающем знании научной литературы. Кроме того, этот кодекс этических принципов призывает к бережному отноше­нию к животным, которых используют для исследований.

Требование этичности эксперимента стало обязательным условием проведения экспериментов на животных во всех странах мира. Это показатель цивилизованности страны. В начале 1985 г. Совет меж­дународных медицинских научных организаций (СММНО) опуб­ликовал «Этический кодекс», который содержит «международные рекомендации по проведению медико-биологических исследований с использованием животных». В этическом кодексе сформулирова­ны приемлемые для научных работников и для общественных групп защитников животных теоретические принципы и этические прави­ла, которые могут быть приняты за основу при разработке регламен­тирующих мер и нормативных документов в разных странах мира в отношении использования животных для биомедицинских исследо­ваний. Рекомендации составлены на основе следующих положений:

• в принципе использование животных для научных целей неже­лательно;

• по возможности следует применять методы, не требующие

использования животных;

• при существующем уровне знаний использование животных

является неизбежным;

• моральный долг ученых - гуманно относиться к подопытным животным, по возможности не причинять им боли и неудобств и постоянно стремиться изыскивать способы получения того же результата без привлечения живых животных;

• животным, предназначенным для медико-биологических иссле­дований, следует обеспечивать наилучшие из возможных усло­вия их содержания.

В последние десятилетия для решения этических проблем при использовании животных в экспериментальной биологии и меди­цине руководствуются концепцией «трех К» Рассела и Берча: замена <^гер1асетеп1), уменьшение (гесшс1юп), повышение качества (геГшетеш).

Такой подход к экспериментированию имеет своей целью применение лучших научных методов при одновременном сокращении количес­тва животных, используемых в экспериментах, а также при усовер­шенствовании экспериментальной техники с целью минимализации страданий, испытываемых подопытными животными.

Во многих странах, в том числе в странах Европейского Союза, закон обязывает исследователей, подающих заявление о лицензии на проект, объявить, что они полностью учли возможность применения альтернативных методов экспериментирования. Это поддерживается Директивой ЕС 86/609/ЕЕС, а соглашение ЕС по защите позвоночных животных и других целях (1986) постановляет: проведение экспери­мента запрещается, если имеется другой научно приемлемый метод получения желаемого результата без использования животных.

К альтернативным методам относятся следующие:

• улучшенная система хранения и использования информации, а также обмен информацией об экспериментах, уже проведенных над животными, во избежание повторения таких процедур;

• использование физических и химических приемов, а также прогно­зов, основанных на физических и химических свойствах молекул;

• использование математических и компьютерных моделей, в том числе моделирование количественных отношений типа «струк­тура-деятельность»; молекулярное моделирование и исполь­зование компьютерных графических средств; моделирование биохимических, физиологических, фармакологических, токси­кологических и поведенческих систем и процессов;

• использование т у/г/ю-методов, в том числе подклеточных фрак­ций, кратковременного хранения слоев ткани, суспензии клеток и обрызгивания органов, а также выращивания тканей (клеточ­ное и органотиличное выращивание), в том числе выращивания человеческих тканей;

• использование низших организмов с ограниченной чувствитель­ностью и/или не защищенных законодательством, регулирую­щим эксперименты над животными;

• использование позвоночных животных на ранних этапах их раз­вития, предшествующих той стадии, на которой регулируется их использование в экспериментах и других научных процедурах;

• эксперименты с участием людей, включая участии ков-добро­вольцев, для выявления побочных эффектов после выведения ЛС на рынок.

Внедрение альтернативных методов позволит сократить число животных, применяемых для получения информации; уменьшить частоту или интенсивность негуманных процедур, применяемых к животным, используемых в экспериментах; заменить животных на альтернативные биологические модели (АБМ). Уникальными АБМ признаны культуральные — существование органов, тканей, клеток вне организма, т уИго. Ими могут быть бактерии, оплодотворенные куриные яйцеклетки, эмбрионы лягушек, инфузории и пр. АБМ обеспечивают высокую степень воспроизводимости и, следователь­но, статистическую достоверность получаемых результатов.

Все шире распространяется мнение о трудности определения безопасности (или опасности) для человека лечебного или профи­лактического средства на основании доклинических испытаний, проведенных только на животных.

Насколько низка эффективность использования животных в тестировании лекарственных препаратов, показывает тот факт, что примерно 90% новых ЛС забраковываются на ранних стадиях кли­нических испытаний, хотя они прошли многолетние испытания на животных по специальной схеме, включающей испытания на острую и хроническую токсичность, канцерогенность, мутагенность и тератогенность.

Известно много случаев, когда опыты на животных привели к неправильным выводам о безопасности препарата. Большой резо­нанс в мире получило так называемое «дело о талидомиде», успока­ивающем средстве, которое прошло испытание на животных и было рекомендовано для приема беременным женщинам.

Причины низкой эффективности экспериментов на животных определяются биологическими различиями между человеком и экспе­риментальными животными. Животные могут по-разному реагировать на один и тот же лекарственный препарат, это обусловлено различиями в абсорбции, кишечной флоре, распределении в тканях, метаболизме, включая биоинтоксикацию и детоксикацию, механизмах и скорости восстановления и выделения. Все это делает проблематичной экстра­поляцию результатов, полученных на животных, на человека.

Большинство болезней человека возникает и протекает совер­шенно отлично от болезней животных, даже если они имеют одно и то же название. Возникновение травм, влияние патогенных и токсичных повреждений на человека существенно отличается от таковых у животных. Организм человека сложнее организма любого животного, его связи с окружающей средой отличаются от всех фор связей у животных.

Научно-технический прогресс «создал» новые болезни, которых не было в древнюю эпоху жизни человека. Возникли радиационные авиационные, автомобильные болезни, обширная группа профес сиональной патологии, которая вызывается особенностями трудового процесса или вредными воздействиями материалов произволе тва. Социальные факторы создают у людей особые, свойственны преимущественно человеку болезни, не встречающиеся у животных. Существенным различием патологических процессов люде и животных является значительно большее разнообразие форм к вариантов болезней у человека. Поэтому у животных в лучшем ел у-чае воспроизводят только отдельные элементы болезней человека^ некоторые их «составные части» — симптомы и синдромы, но не. заболевание в целом. По существу, ни одно инфекционное заболева­ние человека не протекает у животных, восприимчивых к конкрет­ному микроорганизму, тождественно с его клиническим течением И; развитием у людей.

Учитывая данные факты, не нужно забывать и о положительных) результатах, которые дают эксперименты на животных для развития медицины и фармации и для всего человечества. Поэтому на иссле­дователей ложится большой груз ответственности при обосновании необходимости проведения доклинических исследований, соблю­дения законодательных и этических норм при проведении эксперимента на животном, при интерпретации итогов исследования, т.е. от высоконравственного уровня исследователя будет зависеть гарантия надежности результатов, доказывающей целесообразность, осмыс­ленность участия животных в эксперименте.