
- •Введение 6
- •1 Аналитический обзор
- •1.1 Характеристика энтомопатогенного гриба Verticillium lecanii
- •1.2 Характеристика отряда Homoptera (равнокрылые)
- •1.2.1 Семейство Aleyrodinea – белокрылки
- •1.3 Инфицирование и развитие микозов
- •1.4 Изучение процесса патогенеза с помощью электронной
- •1.5 Факторы, влияющие на процесс патогенеза
- •1.6 Влияние ультрафиолетового облучения
- •1.7 Разработка препаративных форм биоинсектицидов на основе спор энтомопатогенных грибов
- •2 Цели и задачи исследования
- •3 Экспериментальная часть
- •3.1 Объекты исследования
- •3.1.1 Культура гриба Verticillium lecanii
- •3.2 Материалы и методы
- •3.2.1 Питательные среды
- •3.2.2 Культивирование гриба Verticillium lecanii
- •3.2.3 Определение титра спор
- •3.2.4 Получение образца биопрепарата гриба
- •Verticillium lecanii на ферментационной установке
- •3.2.5 Получение препаративных форм
- •3.2.6 Определение жизнеспособности спор гриба
- •3.2.7 Определение вирулентности препаративных
- •3.2.8 Определение вирулентности препаративных
- •3.2.9 Определение биологической эффективности
- •3.2.10 Изучение процесса патогенеза с помощью
- •3.2.11 Изучение влияния уф-излучения на
- •3.2.12 Изучение влияния уф-облучения на
- •3.3 Статистическая обработка результатов
- •4 Результаты исследований и их обсуждение
- •4.1 Результаты оценки влияния добавок к препаративным формам на жизнеспособность спор гриба Verticillium lecanii
- •4.2 Результаты опыта по изучению биологической
- •4.3 Результаты оценки влияния уф-излучения
- •4.4 Результаты опыта по изучению влияния уф-облучения
- •4.5 Результаты опыта по изучению процесса патогенеза с помощью электронной сканирующей и световой микроскопии
- •5 Выводы
- •Технико-экономическая оценка результатов исследования
- •Б.2 Расчет затрат на проведение исследовательской работы
- •В.3.2 Основные правила безопасности работы в лаборатории При работе с едкими веществами:
В.3.2 Основные правила безопасности работы в лаборатории При работе с едкими веществами:
1 работа с концентрированными кислотами и щелочами запрещена;
2 концентрированные кислоты должны храниться в толстостенных банках емкостью не более 2-х литров;
3 кислоты следует разливать при помощи сифонов с грушей или других приспособлений;
4 работа с кислотами должна проводиться под вытяжкой;
5 запрещается слив едких веществ в канализацию;
6 отработанные кислоты и щелочи следует собирать в отдельную посуду.
При работе с огнеопасными и легковоспламеняющимися жидкостями (ЛВЖ):
1 ЛВЖ и горючие жидкости (ГЖ) должны храниться в толстостенных сосудах с притертыми пробками;
2 емкости ЛВЖ более 50 мл должны храниться в железных ящиках, закрывающихся на замок с соответствующей надписью, слоем песка (4-5) см, стенки должны быть выложены асбестом;
3 запрещается хранить горючие вещества в вытяжном шкафу, в котором находятся нагревательные приборы;
4 запрещается работать с ЛВЖ и ГЖ без включенной вентиляции;
5 нагрев ЛВЖ и ГЖ проводить на водяной бане;
6 перед началом работы с ЛВЖ и ГЖ следует подготовить средства пожаротушения;
7 работа проводится в специальной одежде и перчатках;
8 категорически запрещается выливать ГЖ в канализацию. Отработанную жидкость следует помещать в герметичную посуду для дальнейшей утилизации.
При работе с электроприборами:
Работа на приборах ведется в соответствии с инструкциями по правильной и безопасной эксплуатации приборов (ГОСТ 12.1.019-79). При работе с электроприборами следует соблюдать следующее:
1 нельзя работать с электроприборами одному человеку (в комнате должно находиться, как минимум 2 человека);
2 следить за исправностью работы приборов, розеток, проводов;
3 включать прибор разрешается только в ту сеть, напряжение которой соответствует напряжению, указанному на приборе (ГОСТ 12.1.030.-81);
4 при пользовании электроприборами необходимо убедиться в исправности электропроводки и в целостности изоляции;
5 при пользовании электроприборами необходимо убедиться, что заземление подключено и в правильности подключения шлангов питания и всех высоковольтных соединений (ГОСТ 12.1.038-82);
6 нельзя оставлять без присмотра включенное под напряжением оборудование. В лаборатории все электроприборы занулены [39].
При работе с микроорганизмами ГОСТ 12.1.008-76:
1 работу с микроорганизмами проводить только в боксе;
2 входить в бокс через 20 мин после отключения УФ-лампы;
3 работу в боксе можно проводить только с убранными волосами, в халате и сменной обуви;
4 перед работой протереть, для стерилизации, поверхность столов этиловым спиртом;
5 при работе с суспензиями микроорганизмов пользоваться пипеткой с ватным фильтром или стерильным наконечником;
6 пинцеты, бактериальные петли, шпатели прожигают в пламени горелки; дезинфекция посуды;
7 посуду, в которой находились биопрепараты, моют 2% раствором соды и горячей водой;
8 осторожно пользоваться спиртовкой;
9 после работы необходимо тщательно вымыть руки;
10 на рабочем месте нельзя есть, пить, курить.
В.4 Меры первой помощи при работе в лаборатории
При работе в химической лаборатории наиболее часто происходят несчастные случаи, связанные с авариями лабораторного оборудования – ожоги, отравления, электротравмы, порезы.
1 При термических ожогах поверхность тела смазать вазелином или промыть питьевой содой; при более тяжелых ожогах – прикладывают марлю, смоченную 5% раствором марганцовокислого калия, делают повязку;
2 при химических ожогах пораженный участок обработать соответствующим веществом:
- при ожогах кислотами – слабым раствором питьевой соды или присыпать ожог мелом, окисью магния;
- при ожогах щелочами – слабым раствором уксусной кислоты или лимонной кислоты;
3 при попадании в глаза химических веществ их необходимо промыть большим количеством воды, направляя струю от виска к носу;
4 при воспламенении одежды загасить пламя, используя подручные средства, перекрывающие доступ кислорода к горящему участку. Применение химических средств пожаротушения к человеку запрещено. После устранения пламени оказать пострадавшему помощь по пункту 1;
5 при порезе рук стеклом в первую очередь удалить из раны осколки, затем промыть ее 2% раствором марганцовокислого калия. Мелкие порезы можно обработать клеем БФ-6;
6 при отравлении через пищевод тщательно промыть рот пострадавшего водой и 5% раствором соды, дать ему выпить молока или взвесь окиси магния (10 г окиси на 150 мл воды), известковую воду, растительное масло. Вызвать врача;
7 при отравлении через органы дыхания – надеть индивидуальные средства защиты (маску, противогаз, респиратор), вывести пострадавшего на воздух, вызвать врача;
8 при поражении электрическим током немедленно отключить ток. При легких поражениях пострадавшего вывести на воздух, дать понюхать нашатырный спирт. При нарушении работы сердца и дыхания пострадавшего необходимо освободить от стесняющей одежды, провести искусственное дыхание или непрямой массаж сердца, вызвать врача.
В.5 Анализ технологических операций с точки зрения опасности и вредности их выполнения
В ходе выполнения дипломной работы отдельные операции обладали потенциальной опасностью и вредностью. Сведения об этих операциях сведены в таблицы В.2.
В.6 Характеристики производственных отходов
Одной из глобальных проблем человечества является охрана окружающей среды. Поэтому большое внимание уделяется техническим рекомендациям по обезвреживанию стоков, газовых и твердых отходов. В таблице В.3 приведены характеристики отходов, образующихся при выполнении экспериментальной части дипломной работы.
Отходы не являются экологически вредными и на данном этапе не могут быть повторно использованы.
1 Микробиологические отходы автоклавируются для обеззараживания микроорганизмов, затем помещаются в контейнеры и подлежат сжиганию.
2 После работы чашки Петри и колбы обрабатываются моющими средствами и стерилизуются. Далее их опять можно использовать в работе.
3 Промывные воды образуются при приготовлении сред и промывании мазков. Они направляются в канализацию.
Таблица В.2 – Анализ технологических операций с точки зрения опасности и вредности при их проведении
Наименование |
Оборудование |
Реактивы |
Возможная опасность |
Причины появления |
Меры безопасности |
Приготовление питательных сред |
Стеклянная посуда, аналитические весы |
Неорганические соли, сахара, агар |
Резаная рана, электротравма |
Работа со стеклом, на-рушение изоляции, зануления |
Не работать с битой посудой, работа с исправным оборудованием |
Стерилизация питательной среды, посуды |
Автоклав АВ-30 |
Питательные среды |
Электротравмы, термические ожоги, механические повреждения |
Нарушение изоляции, зануления, нарушение режима стерилизации, неисправный автоклав |
Проверка изоляции зануления. Соблюдение правил эксплуатации сосудов и аппаратов под давлением |
Мытье посуды |
Мойка, ерш, стеклянная посуда |
Вода, моющие средства |
Резаные раны, термические ожоги |
Битая стеклянная посуда, горячая вода |
Не работать с битой посудой, регулировать температуру воды |
Посев микро-организмов в ламинаре |
УФ-лампа, газовая горелка, стеклянная посуда |
Спирт, среды, вода, культуры |
Термический ожог, облучение, отравле-ние газом и озоном, заражение микроорганизмами |
Неосторожное обращение с горелкой. Нахождение вблизи ламинара при вклю-ченной УФ лампе, попадание микроорга-низмов в пищевод |
Колпак, халат, проверка горелки, проветривание помещения после облучения. Аккуратность в работе с культурами. |
Утилизация микроорганизмов после исследования |
Стеклянная посуда, автоклав АВ-30 |
|
Резаные раны, термический ожог, механические травмы |
Нарушение режима стерилизации, неисправный автоклав |
Не работать с битой посудой, соблюдать правила эксплуатации автоклава |
Таблица В.3 – Характеристика производственных отходов
Наименование отходов |
Агрегатное состояние |
Количест-во отходов |
Наименование вредных примесей |
Примечание (метод обезвреживания или утилизации) |
Твердые среды после выращивания культур |
Твёрдое |
20 чаш/нед |
Условно-патогенные микроорганизмы |
В канализацию после стерилизации автоклавированием |
Культуральные жидкости |
Жидкое |
4 л/нед |
Условно-патогенные микроорганизмы |
В канализацию после стерилизации автоклавированием |
Растительные отходы после тестов |
Твёрдое |
12 раст/нед |
|
На свалку |
Промывная вода |
Жидкое |
80 л/нед |
Моющие средства |
В канализацию |
Подмор белокрылки |
Твёрдое |
– |
|
На свалку |