5 Выводы

1 Использованные в работе добавки оказали положительное влияние на сохранение жизнеспособности спор. Наилучшей добавкой-наполнителем является лецитин, титр спор для пасты 1,86×10⁹ КОЕ/г, титр спор смачивающегося порошка составил 1,36×10⁹ КОЕ/г через месяц хранения. Показана возможность введения в состав пасты технического лецитина вместо пищевого в комбинации с гентамицином.

2 Проведен отбор перспективных УФ-протекторов для препаративных форм (активированный уголь, каолин, диоксид титана). Жизнеспособность спор препаративных форм с добавлением УФ-протекторов была выше на 5-10%. Все УФ-протекторы могут быть использованы в составе препаративной формы.

3 В условиях лабораторных опытов наиболее высокую биологическую эффективность показала паста с лецитином (смертность – 90,2% на 14-е сутки), эффективность от применения СП составила 85,4%. В условиях производственных опытов эффективность ЛПФ с учетом нарастания численности в контроле составила 92,5% в отношении личинок и 76,8% в отношении имаго.

4 С помощью электронной и световой микроскопии было показано, что препаративная форма с наполнителями более эффективна, чем споры гриба Verticillium lecanii без добавок за счет более обильного роста гриба в пленке препаративной формы, увеличения сайтов проникновения и более быстрой гибели насекомых (на 4-е сутки).

Список использованных источников

1 Глупов, В.В. Патогены насекомых: структурные и функциональные аспекты / В.В. Глупов; под ред. В.В. Глупова; М.: Круглый год, 2001. – 736 с.

2 Леднев, Г.Р. Возбудители микозов насекомых / Г. Р. Леднев, Б. А. Борисов, Г. В. Митина. – СПб., 2003. – 79 с.

3 Ахатов, А. К. Защита тепличных и оранжерейных растений от вредителей / А. К. Ахатов, С. С Ижевский, Ю. И. Мешков, Б. А. Борисов, О. Г. Волков, В. Н. Чижов; под общ. ред. А. К. Ахатова и С. С. Ижевского. – М.: Товарищество научных изданий КМК, 2003. – 307 с.

4 Insecticidal secondary metabolic products from the entomogenous fungus Verticillium lecanii / N. Claudon, J.F.Grove // Invertebrate Pathology – 1982. – 40, 3. – P.413–418.

5 Митина, Г.В. Энтомоцидные токсины гриба Verticillium lecanii (Zimm.) – продуцента биопрепарата вертициллин: автореф. дис. ... к.б.н. / Г.В. Митина; Л., 1992. – 18 с.

6 Выделение и изучение спектра действия фосфолипидов с инсектицидной активностью из энтомопатогенного гриба Lecanicillium lecanii / Г.В.Митина, С.В. Сокорнова, В.А. Павлюшин // Микология и фитопатология. – 2002. – Вып.6. – С.53-59.

7 Википедия [Электронный ресурс] / Электронный сканирующий микроскоп – Режим доступа : http://ru.wikipedia.org.wiki/

8 Википедия [Электронный ресурс] / Ультрафиолетовое облучение– Режим доступа : http://ru.wikipedia.org.wiki/

9 Damage and recovery from UV-B exposure in conidia of the entomopathogens Verticillium lecanii and Aphanocladium album / Gilberto U.L. Braga, Drauzio E.N. Rangel, Stephan D. Flint, Charles D. Miller, Anne J. Anderson, Donald W. Roberts // Мycologia. – 2002. –94(6). – p.912 – 920.

10 Growth of Metharhizium anisopliae on non-preferred carbonsources yields conidia with increased UV-B tolerance / Drauzio E.N., Rangel, Ann J.Anderson, Donald W. Roberts // Intertebrate Pathology. – 2006. – № 93. – Р. 127 – 134.

11 Влияние ультрафиолетового излучения на прорастание и вирулентность спор энтомопатогенного гриба Verticillium lecanii [Электронный ресурс]. – Режим доступа: http://www.immunopathology.com

12 Огарков, Б. Н. Энтомопатогенные грибы Восточной Сибири / Б.Н. Огарков, Г.Р. Огаркова – Иркутск: Изд-во Иркутского Университета, 2000. – 134 с.

13 The influence of ultraviolet light on pathogenicity of entomopathogenic fungus Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin to the European corn borer, Ostrinia nubilalis НВN. (Lepidoptera: crambidae) / L. Cagan, M. Svercel // Journal of central European Agriculture. – 2001. – №3-4. – Р. 227 – 234.

14 Verticillium lecanii spore formulation using UV protectant and wetting agent and biocontrol of cotton aphids / Lee Jin Young, Kang Seong Woo, Yoon Cheol Sik, Kim Jeong Jun, Choi Dong Ro, Kim Seung Wook // Biotechnology. – 2006. – № 13. – Р. 1041 – 1045.

15 Effects of physical and nutritional stress conditions during mycelia growth on conidial germination speed, adhesion to host cuticle and virulence of Metharhizium anisopliae, an entomopathogenic fungus / Е. Т. Drauzio, Diane G. Alston, Donald W. Roberts // The British Mycological Society. Elsevier. – 2008. – № 24. – Р.1356 – 1360.

16 Nucleotide excision repair and photoreactivation in the entomopathogenic fungi Beauveria bassiana, Beauveria brongniartii, Beauveria nivea, Metharhizium anisopliae, Paecilomyces farinosus and Verticillium lecanii / L. Chelico, J.L. Haughian and G.G. Khachatourians // Journal of Applied Microbiology. – 2006. – № 100. – Р. 964 – 972.

17 Дорогойченко, Н. И., Фрейман, В. Б. Новые формы микробных инсектицидов и методы их применения. – М., 1982.

18 Lacey, L. A. Manual of techniques in insect pathology / L. A. Lacey. – Wapato (USA).: Academic press, 1997. – Р.409

19 Кальвиш, Т. К., Санжимитупова Р. Д., Шарапов В. М., Андращук В. В. Применение грибных препаратов для защиты растений// Тез. 7 съезда Всесоюз. Микробиол. Общества. – 1985. – Т. 7 – Сельскохозяйственная микробиология – с. 27

20 Коломбет, Л.В. Научное обоснование и практическая реализация технологии создания грибных препаратов для защиты растений от болезней: автореф. дис. д-ра биол. наук / Л.В; МГУ – М., : 2006. – 48 с.

21 Крюков, В. Ю., Леднев Г. Р., Дубовский И. М., Серебров В. В., Левченко М. В., Ходырев В. П., Сагитов А. О., Глупов В. В. Перспективы применения энтомопатогенных гифомицетов (Deuteromycota, Hyphomycetes) для регуляции численности насекомых. // Евразиатский энтомологический журнал 6(2): 195-204 + IV, 2007.

22 Фитотоксины грибов: от фундаментальных исследований – к практическому использованию (обзор) / А. О. Берестецкий // Прикладная биохимия и микробиология. – 2008. – Т. 44, №5. – С. 501-514.

23 Митина, Г.В. Разработка композиций препаративных форм на основе бластоспор энтомопатогенного гриба Verticillium lecanii (Zimm.) Viegas. / Г. В. Митина, А. А. Чоглокова, В. А. Павлюшин // Современные средства, методы и технологии защиты растений: материалы Междунар. науч.-практ. конф.: сборник научных статей. / под общ. ред. Н. Г. Власенко. - НГАУ СибНИИЗХим. – Новосибирск, 2008. – с. 154-156.

24 Митина, Г.В. Энтомопатогенные грибы рода Lecanicillium: систематика, факторы вирулентности, токсинообразование. Биологические средства защиты растений, технологии их изготовления и применения / Г.В., С.В.Сокорнова, В.А.Павлюшин. – СПб: ВИЗР, 2005. – С.273-281.

25 Новикова, И. И. Оптимизация условий токсинообразования энтомопатогенного гриба Verticillium lecanii (Zimm.) Viegas / И. И. Новикова, Г. В. Митина, В. А. Павлюшин // Микология и фитопатология. – 1994. – Т. 28, № 6. – С. 37-44.

26 Большой практикум по микробиологии; под ред. Г. Л. Селибера. – М.: Высшая школа, 1962. – 491с.

27 Пат. 2005378 Российская Федерация / Способ получения инсектицида / Г. В. Митина, В. А. Павлюшин, И. И. Новикова, В. П. Конюхов.

28 Методы экспериментальной микологии: Справочник; под ред. В. Н. Билай. – Киев: Наукова думка, 1982. – 550с.

29 Ильичева, С. Н., Кононова, Э. В. Получение и применение грибных инсектицидов / С. Н. Ильичева– М., 1984.

30 Шевелуха В. С., Калашникова Е. А., Дегтярев С. В. Сельскохозяйственная биотехнология: учебник/ под ред. В. С. Шевелухи. М.: Высшая школа, 1998. 416 с.

31 Воронина, Э. Г. Способ определения вирулентности энтомофторовых грибов / Э. Г. Воронина, А. Я. Чумакова. – Авт. свид. СССР № 1128419, 1984.

32 Егоров, Н. С. Основы учения об антибиотиках / Н. С. Егоров– М.: Наука, 2004. – 524с.

33 Федеральная служба по интеллектуальной собственности, патентам и товарным знакам [Электронный ресурс] / Патентный поиск – Режим доступа : http://www.fisp.ru.

34 Научно-популярный портал Биомедиа. РФ [Электронный ресурс] / Обзор рынка биологических средств защиты растений – Режим доступа : http://биомедиа.рф/.

35 Биотехнологические средства защиты растений в России [Электронный ресурс] / Обзор рынка биологических средств защиты растений – Режим доступа : http://www.gard-service.ru.

36 Кочеров, Н.П. Технико-экономическое обоснование инженерных решений при проектировании химических производств: методические указания / Н.П. Кочеров. – СПб.: СПбГТИ(ТУ), 2001. 43 с.

37 Кочеров, Н.П. Технико-экономические расчеты при проектировании химических производств органического и неорганического цикла: методические указания / Н.П. Кочеров, С.Н. Иванова. – Ленинград, 1977.

38 Михайлова, Н.В., Сарычева О.В. Исследование рынка сбыта и обоснование договорной цены «know how»: методические указания для студентов технологических факультетов / Н.В. Михайлова, О.В. Сарычева. – СПб.:СПбГТИ(ТУ), 1999, 85 с.

39 ГОСТ 12.0.003-74. ССБТ Опасные и вредные производственные факторы. Классификация. – М.: Изд-во стандартов, 1974. – 270 с.

40 Лазарев, Н.В Вредные вещества в промышленности. Т.1, 2, 3./ Н.В Лазарев; под ред. Н.В Лазарева. – М.: Химия, 1997.

41 Сборник правил инструкций по технике безопасности при работе в химической лаборатории. - Л. изд.: ЛТИ имени Ленсовета, 1991. – 99с.

42 Колороченко, А.Я. Пожаровзрывоопасность веществ и материалов, и средства их тушения / А.Я. Колороченко; под ред. А.Н. Баратова, – М.: Химия, 1990. – 406с.

43 СниП 23-05-95. Естественное и искусственное освещение. Нормы проектирования – М.: Стройиздат., 1996.

44 ГОСТ 12.4.021 - 75. ССБТ. Системы вентиляционные. Общие требования. – М.: Изд-во стандартов, 1991. – 250 с.

45 ГОСТ 12.1.008 - 76. Система безопасности труда. Биологическая безопасность. Общие требования.

46 ГОСТ 12.1.005 - 88 ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования воздуха рабочей зоны.

47 Техника безопасности и промышленная санитария. Справочник. – М.: Химия, 1979

ПРИЛОЖЕНИЕ А

(рекомендуемое)

Патентный поиск

Патентная документация для последующего анализа представлена в таблице А.1. Ниже представленная информация взята из источника [33].

Таблица А.1 – Патентный поиск

Вид и номер охранного документа. Страна выдачи. Классификацион-ный индекс	Заявитель, дата приоритета, конвекционный приоритет, дата публикации	Сущность заявленного технического решения (по описанию изобретения или опубликованной заявки)
Патент 2103873 RU A01N63/00, C12N1/14 US 92/00033 (09.01.92)	Джеймс Е.Райт[US], Лоуренс Д.Чандлер[US], Тайрон А.Науф[US] Заявл.: 09.01.1992 Опубл.: 10.02.1998	Штамм гриба Beauveria bassiana, обладающий патогенной активностью против хлопкового долгоносика, белянки сладкого картофеля и хлопкового слепняка.
Патент 1459231 SU C12N1/14	ВИЗР, Ленинградский технологический институт им.Ленсовета Заявл.: 28.01.1987 Опубл.: 09.07.1995	Производство инсектицидов микробного происхождения на основе энтомофторовых грибов.
2192745 RU A01N63/04, C12N1/14 C12N1/14, C12R1:645	Мукамолова Т.Ю., Гаврилова В.Н. Заявл.: 11.04.2001 Опубл.: 20.11.2002	Штамм гриба Entomophthora thaxteriana 19 (ВИЗР) выделенного из персиковой тли.
Продолжение таблицы А.1
Вид и номер охранного документа. Страна выдачи. Классификацион-ный индекс	Заявитель, дата приоритета, конвекционный приоритет, дата публикации	Сущность заявленного технического решения (по описанию изобретения или опубликованной заявки)
Патент 2226547 RU A01N63/04	Мукамолова Т.Ю. Павлюшин В.А. Заявл.: 26.08.2002 Опубл.: 10.04.2004	Штамм гриба Entomophthora thaxteriana (Petch.) (Zygomycetes; Entomophthorales) № 9 (ВИЗР) - Продуцент биопрепарата Энтокс
Патент 2120756 RU A01N63/04, C12N1/14 C12N1/14, C12R1:645	Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Заявл.: 17.06.1997 Опубл.: 27.10.1998	Штамм Verticillium lecanii получен из больных особей паутинного клеща, обладает акарицидным и энтомопатогенным действием и эффективен против паутинного клеща и тепличной белокрылки.
2192745 RU A01N63/04, C12N1/14 C12N1/14, C12R1:645	Мукамолова Т.Ю., Гаврилова В.Н. Заявл.: 11.04.2001 Опубл.: 20.11.2002	Штамм гриба Entomophthora thaxteriana 19 (ВИЗР) выделенного из персиковой тли.
Патент 2059369 RU A01N63/04	Бильдушкинова, Л.М. Исангалин, Ф.Ш. заявл.: 29.07.1992 опубл.: 10.05.1996	Способ определения биологической активности инсектицидных препаратов на основе энтомопатогенных грибов
Продолжение таблицы А.1
Вид и номер охранного документа. Страна выдачи. Классификацион-ный индекс	Заявитель, дата приоритета, конвекционный приоритет, дата публикации	Сущность заявленного технического решения (по описанию изобретения или опубликованной заявки)
Патент 93000541 RU A01N63/04	Третьяков А.П. Заявл.: 22.01.1993 Опубл.: 10.06.1996	Способ получения энтомопатогенного препарата
United States Patent appl№ 20040161440	Stamets, Paul Edward; August 19, 2004	Mycopesticides
United States Patent appl№695249	Quimby, Jr.;Paul C.; Caesar; Anthony J.; Birdsall; Jennifer L.; Connick, Jr.; William J. Boyette; Clyde D.; Zidack; Nina K.; Grey; William E. March 15, 2002	Granulated formulation and method for stabilizing biocontrol agents
United States Patent appl№ 20040038825	Leland, J. Ethan; Mullins, Donald E; Vaughn, Larry Jay; February 26, 2004	Water soluble uv-protective coatings for biological pesticides and process for making same
United States Patent appl№ 20060110366	Yufera; Eduardo Primo; Fahmy; Mohamed Ibrahim; Pallares; Juan Munoz; Sanz; Pilar Moya; May 25, 2006	Entomopathogenic microorganism spores carrier and method for controlling harmful insects

ПРИЛОЖЕНИЕ Б

(обязательное)