3.3. Забарвлення за методом Грама:

- на фіксований препарат кладемо папірець за Синьовим, змочуємо водою і залишаємо на 2-3 хвилини;

- знімаємо пінцетом папірець і наносимо декілька крапель розчину Люголя на 1-2 хвилини;

- зливаємо розчин Люголя і знебарвлюємо препарат 96% розчином етилового спирту протягом 30 секунд;

- промиваємо препарат водою;

- наносимо декілька крапель розчину фуксину Пфейффера на 2-3 хвилини;

- добре промиваємо препарат водою;

- просушуємо фільтрувальним папером, досушуємо на повітрі.

Забарвлені препараті мікроскопірують у імерсійній системі (об’єктив зі збільшенням х90, окуляр – х7).

Завдання №4. Познайомтеся з методикою фарбування мазків для виявлення спор (Ожешко), капсул (Буррі-Гінса), включено (Лєфлєра), спирто-, лужно- і кислотостійких бактерій (по Цілю-Нільсену).

Під керівництвом викладача:

1) Приготуйте препарати з культури мікроорганізмів і проведіть забарвлення їх простим способом і за методом Грама.

2) Проведіть мікроскопію виготовлених препаратів за допомогою імерсійної системи, замалюйте у щоденник морфологію мікроорганізмів.

Завдання №5. Мікроскопія пофарбованих препаратів.

У мікробіологічній лабораторії у повсякденній практиці для вивчення морфології і тинкторіальних властивостей мікроорганізмів (відношенню до барвників) використовують світловий мікроскоп.

Мікроскопія включає етапи:

1) підготовка мікроскопа;

2) мікроскопія;

3) догляд за мікроскопом.

5.1. Ознайомтесь з будовою світлового мікроскопа.

5.2. Підготуйте мікроскоп до роботи.

Алгоритм «Підготовка мікроскопа»:

- поставте мікроскоп у зручну для роботи позицію, підніміть тубус;

- протріть оптичну систему м’якою тканиною, змоченою спиртом;

- підніміть конденсор;

- відкрийте діафрагму конденсора;

- встановіть об’єктив (х7);

- освітіть поле зору за допомогою дзеркала.

5.3. Проведіть мікроскопію пофарбованих препаратів, визначте морфологію мікроорганізмів.

Алгоритм «Мікроскопія препаратів»:

- нанесіть краплю імерсійного масла на препарат;

- покладіть препарат на предметний столик;

- переведіть об’єктив з малого збільшення на велике (х90 МІ);

- обережно опустить об’єктив макрогвинтами у краплю імерсійного масла (дивитися збоку);

- повільно піднімайте об’єктив макрогвинтами, доки не з’явиться зображення (дивитися у окуляр);

- встановить чіткість зображення за допомогою мікровінта;

- визначте форму мікроорганізмів, їх розміщення, наявність у них спор і капсул;

- підніміть тубус макрогвинтами;

- зніміть препарати з предметного столика.

Алгоритм «Догляд за мікроскопом»:

- зніміть імерсійне масло з лінзи об’єктива шматочком вати;

- протріть об’єктив марлевою серветкою, покладіть її на предметний столик;

- переведіть об’єктив на мале збільшення (х7);

- опустить конденсор, закрийте діафрагму, опустить тубус;

- поставте мікроскоп у шафу або накрийте чохлом.

Завдання №6. Запишіть у щоденник «Правила взяття, оформлення та транспортування патологічного матеріалу».

На мікробіологічне дослідження у хворих відбирають патологічний матеріал для діагностики інфекційних хвороб, у здорових – з метою профілактичного обстеження, та з навколишнього середовища – для виявлення патогенних мікроорганізмів або визначення його санітарного стану.

У лабораторію доставляють:

від людей - випорожнення, блювотні маси, промивні води шлунка, бронхів, мокротиння, кров, сечу, виділення з ран, гній, мазки зі слизових оболонок, зскрібки, спинномозкову рідину, жовч, вагінальні виділення, жіноче грудне молоко, пунктат кісткового мозку, лімфатичних вузлів, абсцесів, біопсійний та секційний матеріали, тощо;

з навколишнього середовища – воду, грунт, повітря, харчові продукти, трупи тварин, тощо.

УВАГА! Патологічний матеріал відбирають стерильним інструментом (тампоном, шприцом, шпателем, піпеткою та ін.) і вміщують у стерильний посуд (банки, пробірки, флакони, плювальниці).

Матеріал із навколишнього середовища для санітарно-бактеріологічного дослідження вміщують у нові поліетиленові пакети, стерильні пляшки, стерильний пергаментний папір і ретельно пакують.

До кожної проби додають етикетку, на якій вказують номер і назву матеріалу, лікувально-профілактичний заклад (відділення) або місце його взяття, прізвище, ім’я та по батькові хворого.

На етикетках до проб на санітарно-бактеріологічне дослідження вказують:

- форму,

- підприємство,

- джерело,

- дату і час взяття матеріалу.

Крім етикетки, заповнюють:

- бланк направлення за затвердженим зразком, у якому вказуються лікувально-профілактичний заклад (відділення) або місце взяття матеріалу,

- номер і назва матеріалу,

- кратність направлення матеріалу (первинне чи вторинне),

- прізвище, ім’я та по батькові хворого, його вік,

- дата захворювання,

- попередній діагноз,

- дані про лікування хворого антибіотиками та іншими препаратами,

- міста дослідження,

- дата і час взяття матеріалу,

- прізвище і посада особи, яка направляє матеріал для мікробіологічних досліджень.

Транспортується матеріал на спеціальному транспорті або переноситься у біксах, сумках-холодильниках, пластикових футлярах, термосах, стійких до автоклавування та дії дезінфектантів.

Матеріал, що вміщує мікроорганізми, нестійкі у навколишньому середовищі (збудники коклюшу, менінгококової інфекції), під час транспортування обкладають ватою та грілками.

Направлення на дослідження упаковують окремо.

УВАГА! Забороняється обертати направлення посудини з об’єктом дослідження.

Завдання №7. Проведіть дезінфекцію робочого місця, рук.