Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
ІНСТРУКЦІЇ ДО ПРАКТИЧНИХ ЗАНЯТЬ з Мікробіології...doc
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.05.2025
Размер:
1.32 Mб
Скачать

МІНІСТЕРСТВО ОХОРОНИ ЗДОРОВ’Я УКРАЇНИ

Криворізький медичний коледж

ЦМК спеціальних дисциплін відділення «Лабораторна діагностика»

ІНСТРУКЦІЇ

до проведення практичних занять з навчальної дисципліни

«Мікробіологія»

Для студентів спеціальності

«Сестринська справа»

Обговорено та ухвалено на засіданні ЦМК спеціальних дисциплін відділення «Лабораторна діагностика»

______________ 2013 року

протокол №___

Голова ЦМК Крутикова Т.В.

Кривий Ріг

2013

ІНСТРУКЦІЯ

до проведення практичного заняття №1

Тема: Ознайомлення з організацією та обладнанням бактеріологічної лабораторії, принципами основних методів мікробіологічних досліджень

Оснащення:

- Термостат, автоклав, сухожарова шафа;

- Мікроскопи, імерсійна олія, пофарбовані препарати;

- Спиртівки, спирт, сірники;

- Бактеріологічні петлі, пінцети;

- Розчини барвників;

- Предметні скельця, лабораторний посуд;

- 0,9% розчин NaCl;

- Поживні середовища;

- Культури мікроорганізмів;

- Дезінфекційний розчин

- Гумові рукавички, мило, рушник.

Конкретні цілі:

Знати:

Правила роботи в бактеріологічній лабораторії. Основні принципи лабораторних досліджень: бактеріоскопічний, бактеріологічний, біологічний та серологічний. Морфологію, хімічний склад і фізіологію мікроорганізмів.

Вміти:

- Організовувати робоче місце;

- Виготовляти мазки з агарової і бульйонної культур;

- Виготовляти мазки-препарати з патогенного матеріалу: крові, харкотиння, гною;

- Фарбувати мазки простим і складними методами;

- Визначати основні морфологічні і тинкторіальні властивості збудників інфекційних хвороб, працювати з мікроскопом;

- Проводити взяття матеріалу для дослідження, транспортувати його до лабораторії;

- Дотримуватись правил техніки безпеки, особистої гігієни і протиепідемічного режиму під час взяття патогенного матеріалу, його транспортування.

- Дотримуватись правил техніки безпеки, протиепідемічного режиму під час роботи з біологічним матеріалом.

Практичні навички:

1. Організація робочого місця.

2. Виготовлення мазків з мікробної культури.

3. Виготовлення мазків з крові, гною, харкотиння.

4. Фарбування препаратів простим методом.

5. Фарбування препаратів за методом Грама.

6. Мікроскопія забарвлених препаратів.

7. Визначення морфології основних груп мікроорганізмів.

8. Проводити взяття матеріалу для дослідження, транспортувати його до баклабораторії.

9. Дотримуватись правил техніки безпеки, особистої гігієни і протиепідемічного режиму під час взяття патогенного матеріалу, його транспортування.

Хід заняття:

Завдання №1. 1) Ознайомтесь з правилами поведінки та техніки безпеки у мікробіологічній лабораторії, запишіть у щоденник.

2) Познайомтеся зі структурою та обладнанням бактеріологічної лабораторії, організацією робочого місця.

3). Ознайомтеся з класифікацією мікроорганізмів за ступенем безпеки.

4). Ознайомтесь з принципами основних методів мікробіологічних досліджень, запишіть у щоденник основні методи лабораторних досліджень.

Методи лабораторних досліджень

МІКРОСКОПІЧНИЙ (бактеріоскопічний, вірусоскопічний, протозооскопічний)

Виготовлення й забарвлення мазків із досліджуваного матеріалу від хворого й вивчення його під мікроскопом.

Він дає змогу виявити характерні морфологічні особливості збудника й має важливе значення при діагностиці гонореї, менінгококового менінгіту, туберкульозу, лепри, сифілісу,поворотного тифу, віспи, малярії, лейшманіозу, токсоплазмозу, тощо.

бактеріологічний метод

Зводиться до посіву матеріалу від хворого на відповідні живильні середовища, виділення і ідентифікації чистої культури.

Він має вирішальне значення при діагностиці черевного тифу, дизентерії, холери, дифтерії, чуми та інших хвороб.

серологічний метод

Базується на виявленні специфічних антитіл у сироватці крові хворих до певного збудника.

Для цього використовують різні імунологічні (серологічні реакції): РА, розгорнута РА, РЗК, РП, РІФ, ІФА, РПГА, тощо.

біологічний метод (експериментальний)

Полягає у зараженні лабораторних тварин чистою культурою збудника, досліджуваним матеріалом або введенні бактерійних токсинів і відтворенні типової картинки захворювання.

З діагностичною метою використовують при чумі, сибірці, туляремії, правці, ботулізмі, анаеробної газовій інфекції, кліщовому енцефаліті, тощо.

алергійний метод

Дає змогу встановити діагноз за допомогою внутрішньо-шкірних алергічних проб.

Цим методом широко користуються при діагностиці туберкульозу (проба Манту), бруцельозу (проба Бюрнс), туляремії та інших хвороб.

молекулярно-генетичні методи

Використовують для виявлення та ідентифікації бактерій, вірусів, грибів і найпростіших.

Реакція гібридизації ДПК і РНК (реакція генних зондів).

Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР).

ПЛР використовують при визначенні і ідентифікації збудників туберкульозу, сифілісу, гонореї, мікоплазм, вірусів СНІДу, герпесів, гепатитів, ротавірусів та ентеровірусів.

5). Запишіть у щоденник інструкції з правил приготування препаратів з різного виду біоматеріалу і методів забарвлення.

Завдання №2. Приготування препарату з культури мікроорганізмів:

- На знежирене предметне скло стерильною пастерівською піпеткою нанести краплю стерильного ізотонічного розчину хлориду натрію. Пропалюємо петлю у полум’ї спиртівки, остуджуємо. Беремо петлею частину досліджуваної колонії (накопичення мікроорганізмів, яке виросло з однієї клітини на твердому поживному середовищі), емульгуємо у краплині розчину до розміру 15-20 мм.

- Висушуємо препарат на повітрі.

- Фіксуємо у полум’ї спиртівки.

Слизу з зіву та носу, гною з рани:

- матеріал збираємо стерильним ватним тампоном і рівномірно розподіляємо його на поверхні знежиреного предметного скла.

- висушуємо препарат на повітрі.

- фіксуємо у полум’ї спиртівки.

Препарати крові для мікроскопії:

Мазок:

- на правий край знежиреного предметного скла наносимо краплю досліджуваної крові.

- другим предметним склом із шліфованим краєм під кутом 450 робимо тонкий мазок крові на всій поверхні скла.

- висушуємо препарат на повітрі.

- фіксуємо протягом 10-15 хвилин у метиловому (етиловому) спирті, суміші Нікіфорова.

«Товста» крапля крові (для бактеріоскопії – пошуку збудників)

- на знежирене предметне скло наносимо 2-3 краплі крові діаметром 12-15 мм.

- висушуємо препарат на повітрі.

- фіксуємо протягом 10-15 хвилин у метиловому (етиловому) спирті, суміші Нікіфорова.

Мазок зі спинномозкової рідини, сечі:

- на знежирене предметне скло наносимо 2-3 краплі досліджуваного матеріалу так, щоб діаметр краплі складав 2,5-3 см.

- висушуємо препарат на повітрі.

- фіксуємо у полум’ї спиртівки або за допомогою спирту.

Завдання №3. Фарбування препаратів простим методом та за методом Грама:

3.1. Забарвлення препаратів простим методом: для забарвлення застосовують один з барвників – генциановий фіолетовий, метиленовий синій, фуксин Пфейффера. На забарвлений препарат наносимо декілька крапель барвника так, щоб препарат був повністю покритий ним.

Забарвлюють протягом 2-3 хвилин.

Промивають водою.

Просушуємо фільтрувальним папером, досушуємо на повітрі.

3. 2. Забарвлення складними методами дозволяє диференціювати мікроорганізми за методом Грама; визначити наявність капсули за методом Буррі-Гінса; спори – за Ожешко, мікобактерії туберкульозу за методом Ціля-Нільсена.