Лабораторная работа № 2. Ферментный состав желудочного сока

Сок фундальной части желудка содержит следующие ферменты: 1) протеолитический фермент пепсин, расщепляющий белок до альбумоз и пептонов; 2) химозин или сычужный фермент, створаживающий молоко и 3) липолитический фермент, расщепляющий нейтральные жиры на жирные кислоты и глицерин.

Определение протеолитической силы желудочного сока обычно изучается при переваривании: 1) фибрина – белка, получаемого из крови и 2) белка куриного яйца, свернувшегося и заключенного в капиллярные трубки (меттовские палочки).

Определение протеолитической силы желудочного сока с помощью меттовских палочек является более точным; этот способ разработан С. Г. Меттом в 1889 г. в лаборатории И. П. Павлова.

Цель: изучить действие ферментов желудочного сока.

Приборы и материалы: желудочный сок, спиртовка, водяная баня, 0,5%-ный раствор соляной кислоты, фибрин, очищенный мел (или сода), лакмусовая бумага, молоко, термометр.

Ход работы

1. Переваривание белков желудочным соком

В две пробирки наливают па 3,0 мл желудочного сока. Одну из этих пробирок для разрушения находящегося в нем фермента кипятят (помутнение содержимого указывает на свертывание белков) и затем охлаждают до комнатной температуры. В третью пробирку наливают 3,0 мл 0,5%-ной соляной кислоты. Желудочный сок и кислоту надо набирать различными пипетками, так как даже ничтожное количество фермента может оказать пептическое действие. Во все три пробирки кладут одинаковое количество (0,2-0,4 г) слегка расщипанного (скатанного в рыхлый шарик) фибрина и помещают в водяную баню при t 37-38°.

Через 20 минут исследуют, что произошло с фибрином. В первой пробирке (с нормальным желудочным соком) фибрин полностью исчез или заметна только небольшая желтоватая муть. Во второй пробирке (в которой фермент был разрушен кипячением) произошло набухание шарика фибрина. То же отмечается в третьей пробирке (с соляной кислотой).

Эти результаты показывают, что переваривающая способность желудочного сока зависит от наличия в нем фермента пепсина, под влиянием которого белки расщепляются и переходят в растворимое состояние. Соляная кислота желудочного сока способствует набуханию белков (поглощению воды), однако переваривающего действия не оказывает.

2. Значение реакции среды для действия пепсина

В две пробирки наливают одинаковое количество желудочного сока (3,0-5,0 мл). В одну из пробирок прибавляют немного соды или лучше очищенного мела до получения нейтральной реакции (синяя лакмусовая бумажка не краснеет, красная не синеет). В обе пробирки кладут одинаковое количество фибрина и ставят их в водяную баню при 37-38°. Через 15-20 минут убеждаются, что в нормальном желудочном соке фибрин переварился и перешел в растворимое состояние, в пробирке же, где кислота сока была нейтрализована, не произошло никаких изменений. Фибрин остался в том же состоянии, в каком был положен.

Таким образом, пепсин оказывает свое ферментативное действие на белки, только в кислой среде.