Методы диффузии антибиотиков в агаровые среды

Классический метод диффузии. Свежеприготовленная и подсушенная в течение 20 мин при 37 °С среда засевает­ся равномерным слоем свежевыросшей культуры. После ее впитывания пробойником или горлышком агглютина-ционной пробирки в ней делают лунки, в которые вносят по 0,1 мл раствора испытуемых антимикробных препара­тов и чашку, не переворачивая вверх дном, осторожно пе­реносят в термостат. Спустя 18 ч определяют активность антибиотиков по диаметру зон подавления роста тест-микроба вокруг тех лунок, в которых они содержались.

Метод диффузии препаратов из бумажных дисков. Свежевыросшую исследуемую культуру бактерий (2 млрд м. т./мл) газоном высевают на питательный агар в чашках Петри, избыток отсасывают пастеровской пипеткой. Сре­ду подсушивают и на ее поверхность стерильным пинце­том на расстоянии 2 см друг от друга накладывают стандарт­ные бумажные диски, пропитанные различными анти­микробными препаратами. Результаты учитывают после 16-18 ч выращивания при температуре 37 °С, измеряя ди­аметры зон задержки роста бактерий вокруг бумажных дисков. Сравнивая их величины с прилагаемыми к дис­кам инструктивными указаниями, определяют, к каким препаратам тест-микроб чувствительный, умеренно чувствительный и резистентный, т. е. может расти даже у края дисков (рис. 52).

Комбинированная антибиотикотерапия. Сочетанное применение антибиотиков преследует решение двух основных целей - усиление этиотропного действия при одновременном снижении токсического влияния препаратов на больной организм. При этом комбинации бактерицидных антибиотиков-синергистов и бактериостатиков, обладающих аддитивным (дополнительным) действием, позволяют повысить антимикробную эффективность каждого из них, расширить спектр действия и предотвратить развитие лекарственно-устойчивых популяций микробов.

Рис. 52. Зоны торможения роста бактериальной культуры вокруг бумажных дисков, пропитанных антибиотиками

Антагонизм проявляется лишь в сочетаниях бактерицидных антибиотиков с бактериостатиками, ввиду того, что последние, угнетая обмен веществ микробной клетки, снижают ее чувствительность по отношению к первым.

Побочное действие антибиотиков. Различают прямое и косвенное побочное действие антибиотиков. Прямое по­бочное действие обусловлено органотропностью антибио­тиков и выражается в структурных и функциональных изменениях со стороны различных органов и тканей. Так, некоторые из них неблагоприятно влияют на нервную сис­тему, слуховой аппарат, почки, вызывают хромосомные аберрации в соматических и половых клетках. Многие люди отличаются повышенной чувствительностью к анти­биотикам и реагируют на их введение крапивницей, оте­ком слизистых и кожных покровов, другими аллергичес­кими реакциями, а иногда - анафилактическим шоком. Косвенное побочное действие, связанное с паразитотроп-ностью препаратов, проявляется подавлением иммунного ответа на антиген, что ведет к формированию малонапря­женного иммунитета, не обеспечивающего устойчивости к реинфекции. Длительное применение антибиотиков при­водит к образованию в организме больного лекарственно-резистентных, антибиотикозависимых и атипичных форм микробов, что затрудняет бактериологическое подтверж­дение диагноза и процесс лечения. Самым неблагоприят­ным косвенным побочным действием считается дисбактериоз как следствие ингибирования антимикробным пре­паратом нормальной микрофлоры.