
Методы определения лекарственной чувствительности бактерий
Испытание на чувствительность бактерий к антибиотикам проводят, используя серийные разведения препаратов в жидких и плотных питательных средах и методы их диффузии в агаровые среды. При этом определяют минимальную ингибирующую (бактериостатическую) концентрацию (МИК) и минимальную бактерицидную концентрацию (МБК) лекарственных веществ.
Методы серийных разведений антибиотиков в мясопептонном бульоне и мясопептонном агаре.
Метод разведений в МПБ (табл. 3). В ряд пробирок, кроме первой, наливают по 0,5 мл бульона. В первую и вторую вносят 0,5 мл раствора антибиотика, содержащего 50 ЕД. Разведенный в 2 раза антибиотик из второй пробирки в количестве 0,5 мл переносят в третью и таким же «перекатом» - во все последующие, а из последней - лишние 0,5 мл удаляют. Сделав двукратные разведения антибиотика, бульоны засевают 1,5 мл разведенной 1:1000 бульонной культуры испытуемого штамма бактерий. Посевы помещают в термостат при температуре 37 °С и через 10-18 ч учитывают МИК и МБК, т. е. наименьшую концентрацию препарата, вызвавшую полную задержку роста бактерий, и такую же его концентрацию, которая привела к их гибели.
Ингредиенты |
Номера пробирок |
|||||||||
|
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
Контроль |
МПБ |
- |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
|
|
**» |
-* |
|
—V |
-* |
** |
—► |
|
|
50 ЕД анти- |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,54 |
- |
биотика |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Бульонная |
1,5 |
1,5 |
1,5 |
1,5 |
1,5 |
1,5 |
1,5 |
1,5 |
1,5 |
1,5 |
культура, |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
1:1000 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Разведение |
25 |
12,5 |
6,25 |
3,12 |
1,56 |
0,78 |
0,39 |
0,19 |
0,10 |
- |
антибио- |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
тика, мкг |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Метод разведений в МПА. Подготовив по 1 мл двойных разведений препарата от 1:10 000 до 1:320 000, поочередно вносят их в 9 мл расплавленного и охлажденного до 45-50 °С питательного агара и, быстро смешав, выливают в чашку Петри. После застывания агара дно чашки делят на сегменты, которые засевают испытуемыми видами (штаммами) бактерий, а один из них - культурой с известной антибиоти-кочувствительностью. Одновременно ими можно засевать контрольную чашку Петри без препарата. Среды помещают в термостат при температуре 37 С на 18-20 ч и затем определяют бактериостатическую концентрацию препарата.