ЛЕКЦИИ ПО ГИСТОЛОГИИ
Для учащихся Нижегородского фармакологического колледжа.
Раздел 1. Введение в гистологию.
Организм человека и животных представляет собой целостную систему, в которой
Можно выделить ряд иерархических уровней организации живой материи: клетки- ткани-морфофункциональные единицы органов-органы-системы органов.
ГИСТОЛОГИЯ-наука о строении, развитии и жизнедеятельности тканей животных организмов.
Основным предметом гистологии являются ткани, представляющие собой систему следующей за клеточным уровнем организации живой материи в целостном организме.
Ткани представляют собой систему клеток и неклеточных структур, объединившихся и специализировавшихся в процессе эволюции для выполнения важнейших функций в организме.
Курс гистологии включает в себя также цитологию-учение о клетке и эмбриологию-учение о зародыше.
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ В ГИСТОЛОГИИ.
Главными этапами цитологического и гистологического анализа являются выбор объекта исследования, подготовка его для изучения в микроскопе, применение методов микроскопирования, качественный и количественный анализ изображений.
1.Методы исследования живых клеток и тканей.
Изучение живых клеток и тканей позволяет получить наиболее полную информацию об их жизнедеятельности- проследить движение, процессы деления, разрушения,роста, дифференцировки, и взаимодействия клеток, продолжительность их жизненного цикла, реактивные изменения в ответ на действие различных факторов.
а / Прижизненные исследования клеток в организме.
1. Наблюдение структур в живом организме с помощью специальных просвечивающих микроскопов-иллюминаторов .
2. Метод вживления прозрачных камер в организм животного.( пример- вживление прозрачной камеры в ухо кролика для изучения движения крови по сосудам и процессов в микроцируляторном русле.)
б / Исследования живых структур в культуре клеток и тканей.
Выделенные из организма человека или животного клетки культивируют на специальных питательных средах в пластмассовых сосудах.
в / Витальное и суправитальное окрашивание.
При витальном окрашивании клеток и тканей краситель вводят в организм животного, при этом он избирательно окрашивает определенные клетки, их органеллы или межклеточное вещество.
Суправитальным окрашиванием называют окрашивание живых клеток, выделенных из организма. Таким способом выявляют , к примеру, ретикулоциты крови, митохондрии в клетках,
лизосомы.
2. Исследование мертвых (фиксированных ) клеток и тканей.
Основным объектом исследования здесь являются гистологические препараты, приготовленные из фиксированных структур.
Препарат может представлять собой мазок (например, мазок крови, костного мозга, слюны ),
Отпечаток (например, селезенки, тимуса, печени ), пленку из ткани ( например, брюшина ), тонкий срез.
3. Исследование химического состава и метаболизма клеток и тканей.
а / Цито- и гистохимические методы .
Эти методы позволяют выявлять локализацию различных химических веществ в структурах клеток,тканей и органов-ДНК, РНК, белков, углеводов и тд.
Методы основаны на специфичности реакции между химическим реактивом и субстратом, входящим в состав клеточных и тканевых структур, и окрашивании продуктов химических реакций.
б / Метод радиоавтографии.
Этот метод дает возможность наиболее полно изучить обмен веществ в разных структурах.
В основе метода лежит использование радиоактивных элементов или меченных им соединений.
в / Цитоспектрофлюориметрия – метод количественного изучения внутриклеточных веществ по спектрам их флюоресценции или по интенсивности флюоресценции на одной заранее выбранной
волне.
г / Методы иммунофлюоресцентного анализа.
Они эффективно используются в современной гистологии. Эти методы применяются для изучения процессов дифференцировки клеток, выявления в них специфических химических соединений и структур. Они основаны на реакциях антиген-антитело.
Методы микроскопирования гистологических препаратов.
Световая микроскопия (исследование в световом микроскопе ).
Ультрафиолетовая микроскопия.
Флюоресцентная ( люминисцентная ) микроскопия.
Фазово-контрастная микроскопия
Микроскопия в темном поле.
Микроскопия в падающем свете.
Поляризационная микроскопия.
Электронная микроскопия.