45. Накопительные культуры микроорганизмов и методы их получения.

Накопительная культура – культура в которой преобладают представители микроорганизмов близких по своим свойствам или микроорганизмы одного вида. Сущность м-да накопительной культуры заключается в создании элективной или избирательной условий, т.е. условия к-рые учитывают развития тех или иных микроорганизмов. Чистую культуру получают путем многократного пересева, добиваясь разведения отдельных колоний. Культура может быть чистой, т.е. содержать потомство только одного вида, и накопительной, т.е. состоять преимущественно из клеток одного вида микроорганизмов. Для выращивания отдельных видов микроорганизмов применяют элективные (селективные, избирательные) среды, которые были введены в практику русским микробиологом С.Н. Виноградским при изучении процессов нитрификации. Эти среды обеспечивают преимущественное развитие одного вида или группы родственных микроорганизмов и менее пригодны или совсем не пригодны для развития других.

Зная физиологические особенности соответствующей группы микробов, можно подобрать такие условия культивирования (состав, активную кислотность среды, температуру и др.), при которых будут развиваться лишь представители данной культуры. Эти среды применяют главным образом для выделения микроорганизмов из мест их естественного обитания и получения накопительных культур.

Для получения накопительной культуры определенного вида бактерии сначала подбирают элективные условия среды, обеспечивающие преимущественное развитие данных бактерий. Затем из мест обитания, в которых преобладают представители данной группы, делают посев на соответствующую элективную среду. Чистую культуру из накопительной получают из одной клетки или отдельной колонии. В последнем случае из накопительной культуры после разведения делают высев на плотную среду. Каждую, образовавшеюся колонию считают развившейся из одной клетки.

46. Чистые культуры микроорганизмов, их значение и методы получения.

Чистую культуру получают путем многократного пересева, добиваясь разведения отдельных колоний. Из одной взятой колонии отбирают небольшое кол-во затем еще высеивают на плотную среду (Чашки Петри).

Чистые культуры сохраняют на плотных средах, в пробирках на скошенном агаре и засевают, дальше их хранят в холодильнике, периодически пересеивая, при этом обязательно проверяют все признаки.

Сохранение чистых культур под слоем вазелинового масла при низких или ультранизких температурах, а так же микроорганизмы хранят в замороженном состоянии,затем высушивают под вакуумом, минуя жидкую фазу.

Культивирование – это выращивание микроорганизмов на питательных средах в определенных условиях, а развивающийся организм называется культурой. Культура представленная видами одного микроорганизма называется чистой культурой.

Чтобы изучить морфологические и биохимические свойства микроорганизмов выделят чистые культуры. Выделение проводят изолированием одной чистой клетки на твердых питательных средах, а затем уже методом пересева одной колонии размножают данную чистую культуру уже в жидкой среде.

Можно выделить чистую культуру в жидких средах, если искомая культура численно преобладает. Это достигается путем многократных растворений жидких питательных сред. Сохранение чистой культуры осуществляют под слоем вазелиновым маслом в холодильнике с низкой температурой, либо в лиофилизованных состояниях. Лиофилизация – это высушивание клеток микроорганизмов из замороженного состояния под вакуумом, т.о. высушивание минует жидкую фазу.

При сохранении микроорганизмов сталкиваются с проблемами сохранения: создания анабиоза. Работа по сохранению культур производится в институтах микробиологии.

Выделение чистой культуры включает 3 этапа:

1. получение накопительной культуры

2. выделение чистой культуры

3. определение ее чистоты

Для получения накопительной культуры определенного вида бактерии сначала подбирают элективные условия среды, обеспечивающие преимущественное развитие данных бактерий. Затем из мест обитания, в которых преобладают представители данной группы, делают посев на соответствующую элективную среду. Чистую культуру из накопительной получают из одной клетки или отдельной колонии. В последнем случае из накопительной культуры после разведения делают высев на плотную среду. Каждую, образовавшеюся колонию считают развившейся из одной клетки.