Группы крови. Система ав0. Факторы, определяющие групповую принадлежность крови. Методики определения групп крови.

В истории немало случаев, когда человеку пытались перелить кровь от другого человека и даже животных. В большинстве случаев эти попытки заканчивались трагически. Но только в 1901 г. после открытия австрийским ученым К. Ландштейнером групп крови АВО (открыл I, II и III группы, удостоен Нобелевской премии) стало понятно, что кровь донора и реципиента должна быть совместима по антигенному фактору эритроцитов. Позднее (1907) чешский врач Я. Янский предложил выделять I, II, III и IV группы крови. Их открытия позволили широко применить в практической медицине переливание крови.

Было установлено, что мембрана эритроцитов человека является носителем более 300 антигенов, обладающих способностью вызывать против себя образование иммунных антител. Если соответствующие антитела попадают в кровь, развивается реакция взаимодействия между эритроцитарными антигенами и сывороточными антителами и происходит агглютинация (склеивание) эритроцитов.

Система AB0

В системе AB0 в соответствии с наличием на поверхности на поверхности эритроцитов агглютиногенов (антигенов) А и В выделено 4 группы крови, обозначаемых римскими цифрами I, II, III и IV. В плазме крови к агглютиногенам А и В могут содержаться антитела — агглютинины α и β. В норме у каждого человека отсутствуют агглютинины к соответствующим агглютиногенам. Содержание в крови разных групп системы AB0 агглютиногенов и агглютининов представлено таблице 3.

Серологический состав групп крови системы АВ0

Группы	Эритроциты	Плазма или сыворотка
крови	Агглютиногены	Агглютинины
I (0)	0	a , b
II (A)	A	b
III (B)	B	a
IV (AB)	AB	0

При переливании крови необходимо предотвратить ситуацию, когда в крови реципиента одновременно будут находиться и антигены, и антитела именно к этому антигену, т.е. возникнет ситуация несовместимости. Агглютинины являются g-глобулинами и имеют 2 центра связывания, что обеспечивает возможность образования мостика между двумя эритроцитами и, таким образом, вызывают склеивание (агглютинацию) эритроцитов, содержащих на мембране соответствующие агглютиногены. Агглютинация эритроцитов наблюдается лишь в том случае, если встречаются одноименные агглютиноген и агглютинин: А и α, В и β.

Агглютинация эритроцитов

У новорожденных в крови отсутствуют антитела системы АВ0 и образование их к антигенам, которых у него нет, происходит в течение первого года жизни. Антитела не вырабатываются против «своего», т. е. присутствующего в эритроците данного человека антигена — А и В. Однако антигены А и В широко распространены в животном мире, поэтому, после рождения человека в его организме начинается формирование антител против антигенов А и В, поступающих с пищей, бактериями.

Существуют разновидности агглютиногена А: А₁, А₂, А₃ и др. Из них самым сильным является А₁. Поэтому при слабоактивных сыворотках, содержащих агглютинин a, кровь таких лиц может быть ошибочно отнесена к I (0) группе. Агглютиноген В также существует в нескольких разновидностях.

У лиц с I(0) группой крови на поверхности мембран эритроцитов имеется антиген Н, который доступен для взаимодействия с анти-Н-антителами, довольно часто встречающимися в плазме крови II(A) и IV(АВ) групп и несколько реже III(В) группы. В этих случаях переливание крови I(0) группы лицам, имеющим другие группы крови, может привести к гемотрансфузионным осложнениям. Наличие Н-антигена на поверхности мембран эритроцитов послужило основанием обозначать систему АВО как АВН.

Существуют следующие методики определения групп крови по системе АВ0:

— с использованием изогемагглютинирующих (стандартных) сывороток;

— перекрестным методом, т.е. одновременно при помощи стандартных сывороток и стандартных эритроцитов;

— с использованием моноклональных антител.

Определение группы крови с использованием изогемагглютинирующих (стандартных) сывороток. Группы крови определяют путем постановки реакции агглютинации крови реципиента (человека, которому переливают кровь) со стандартными сыворотками I–IV групп крови, полученных от доноров.

Стандартные сыворотки содержат только агглютинины соответствующих групп крови и имеют стандартную окраску: сыворотка 0(I) группы не окрашена, А(II) группы — синяя, B(III) группы — розовая, AB(IV) — желтая.

Определение группы крови проводят в помещении с хорошим освещением при температуре +15–+25°С. При температуре выше 25 °С реакция агглютинации замедляется, а при температуре ниже 15 °С возможна холодовая агглютинация.

На пластинку наносят по одной большой капле (0,1 мл) стандартных сывороток соответствующих групп 2 серий. Рядом с каждой каплей сыворотки наносят маленькую каплю (0,01 мл) исследуемой крови, соблюдая соотношение 10:1. Капля вносимой в сыворотку крови должна быть меньше объема капли сыворотки, чтобы не снизить титра содержащихся в них агглютининов. Смешивают каплю сыворотки с каплей крови индивидуальной чистой стеклянной палочкой, затем, периодически покачивая пластинку, наблюдают за ходом реакции в течение 5 мин.

Агглютинация начинается в течение первых 10–30 с, однако наблюдение следует вести до 5 мин ввиду возможности более поздней агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В. Через 3 мин в капли смеси сыворотки с эритроцитами, в которых наступила агглютинация, добавляют по одной капле (0,05 мл) изотонического раствора хлорида натрия и продолжают наблюдение при периодическом покачивании пластинки до истечения 5 мин.

Совместимость различных групп крови

Определение групп крови

Определение группы крови системы AB0

с помощью моноклональных антител

Определение группы крови перекрестным способом проводится одновременно при помощи изогемагглютинирующих сывороток и стандартных эритроцитов. При этом способе определяют наличие или отсутствие агглютиногенов и, кроме того, при помощи стандартных эритроцитов устанавливают наличие или отсутствие групповых агглютининов.

Для определения групповой принадлежности крови применяют также стандартные реагенты — моноклональные антитела (цоликлоны) (анти-А и анти-В), реагент содержит краситель (розовый— для антител анти-А, синий— для антител анти-В). Моноклональные анти-А, анти-В, анти-АВ антитела являются продуктом жизнедеятельности специфических мышиных гибридом и принадлежат к иммуноглобулинам класса М.

Определение групп крови антителами анти-А и анти-В имеет ряд преимуществ по сравнению с определением изогемагглютинирующими сыворотками: обеспечиваются более высокие качество агглютинации, достоверность и надежность результатов, заметно упрощается процедура определения и сокращаются сроки реакции (наступает уже в первые 1–2 с).

Результаты реакции при определении групп крови различными методами представлены в таблице

Определение групп крови

Группа ИК по антигену	А. Результаты реакции со стандартными сыворотками
	αβ(I)	β(II)	α(III)	(IV)
I	–	–	–	–
II	+	–	+	–
III	+	+	–	–
IV	+	+	+	–
Группа ИК по антителу	Б. Результаты реакции со стандартными эритроцитами
	0(I)	А(II)	В(III)	АВ(IV)
αβ(I)	–	+	+	+
β(II)	–	–	+	+
α(III)	–	+	–	+
нет (IV)	–	–	–	–
Группа ИК по антигену	В.Результаты реакции с моноклональными антителами
	анти-А		анти-В
0(I)	–		–
А(II)	+		–
В(III)	–		+
АВ(IV)	+		+

Примечание: ИК — исследуемая кровь; А — стандартные изогемагглютинирующие сыворотки; Б — стандартные эритроциты; В — моноклональные антитела; «+» — наличие реакции агглютинации, «–» — отсутствие реакции агглютинации.

Наряду с агглютининами в плазме крови содержатся гемолизины (обозначаемые аналогично агглютининам a и b). Они при встрече с одноименным агглютиногеном вызывают гемолиз эритроцитов. Их действие проявляется при температуре 37–40°С и уже через 30–40°С наступает гемолиз эритроцитов (при определении групповой принадлежности крови со стандартными сыворотками агглютинация эритроцитов не сопровождается гемолизом, так как процесс протекает при комнатной температуре).

Распространенность людей с группами крови: I(0) — 40–50% , II(А) — 30–40% , III(В) — 10–20%, IV(АВ) — 5%.

География: 40 % людей Центральной Европы имеют группу крови II(А), 90% Северной Америки — I (0), более 20% Центральной Азии — III(В). I (0) группа крови имеется у всех народов, II(А) — преобладает у жителей Европы, Ближнего Востока, Китая, Японии. Людей с III(В) группой крови меньше всех, с IV(АВ) — преобладают жители Индии, Центральной Азии, долины Нила. III(В) группы крови нет у аборигенов Америки и Австралии, II(А) — нет у Южно-африканских народов. 100% индейцев Южной Америки имеют I(0) группу крови.

В практике переливания крови (гемотрансфузия) и её компонентов обязательная проверка на совместимость по антигенам систем AB0 (4 группы) и Rh (2 группы), итого по 8 группам. Остальные системы (они известны как редкие) к несовместимости по группам крови приводят значительно реже, но также должны учитываться при гемотрансфузиях и при тестировании возможности развития гемолитической болезни новорождённого. Согласно данным Международного общества переливания крови (The International Society of Blood Transfusion ) к редким системам групп крови относят; Cartwright, Chido/Rodgers, Colton, Cost, Cromer, Diego, Dombrock, Duffy, Er, Gerbich, GIL, GLOB (Globoside), Hh, Ii, Indian, JMH (John Milton Hagen), Kell, Kidd, Knops, Kx, Landsteiner–Wiener, Lewis, Lutheran, MNS, OK, P, Raph, Rh, Scianna, Wright, Xg, Yt.

Антигенные свойства большинства этих антигенов выражены слабо, однако, эти системы имеют значение при частых переливаниях крови, приводящих к накоплению этих антигенов и проявлению их действия. Поэтому повторно переливать кровь одного и того же донора не рекомендуется.