Иммунный статус

[править]Материал из Википедии — свободной энциклопедии

Имму́нный ста́тус — это комплексный показатель состояния иммунной системы, это количественная и качественная характеристика состояния функциональной активности органов иммунной системы и некоторых неспецифических механизмов противомикробной защиты.

Иммунный статус это показатели работы иммунной системы. Он включает исследование количественных показателей компонентов иммунной системы и определение их функциональной активности. Исследование проводится в иммунологической лаборатории. Материалом для исследования чаще всего служит кровь больного, кроме этого может быть исследован местный иммунитет слизистых оболочек или проведены кожные пробы с аллергенами.

Существуют следующие виды нарушения работы иммунной системы:

Недостаточность иммунной системы или иммунодефицит. Пониженная активность иммунной системы, развивающаяся в результате сниженного количества компонентов иммунной системы или их недостаточной функциональной активности.

Гиперреактивность иммунной системы. Избыточная активность иммунной системы, которая может приводить к тяжелому течению вызвавшего ее заболевания.

Аутоиммунные реакции. Иммунная система атакует собственные ткани. Наблюдается при срыве иммунологической толерантности к антигенам собственных тканей.

Показанием к назначению исследования иммунологического статуса является любое подозрение неадекватной работы иммунной системы – тяжелое течение инфекционных болезней, наличие хронических или часто рецидивирующих инфекционных заболеваний, наличие очагов хронического воспаления, заболевания соединительной ткани, аутоиммунные процессы и др.

Оценка иммунного статуса позволяет уточнить диагноз заболевания, определить лечебную тактику. При отклонениях в работе иммунной системы больному могут быть назначены иммунотропные препараты такие как иммуностимуляторы, иммуномодуляторы или иммуносупрессоры. Так же может быть проведена заместительная терапия с помощью введения иммунных сывороток, иммуноглобулинов, лейкоцитарной массы, препаратов интерферонов.

Оценка иммунного статуса

Существуют скрининговые тесты оценки иммунного статуса, которые позволяют быстро оценить основные показатели работы иммунной системы. Стандартный скрининговый тест включает:

Подсчет абсолютного количества лейкоцитов, нейтрофилов, лимфоцитов и тромбоцитов.

Определение концентрации сывороточных иммуноглобулинов различных классов (IgG, IgA и IgM)

Определение гемолитической активности системы комплемента CH50.

Проведение кожных тестов гиперчувствительности замедленного типа.

Более детальное изучение иммунного статуса включает изучение количества и функциональной активности клеточного и гуморального звеньев иммунной системы:

Исследование фагоцитарной функции.

Исследование система комплемента.

Исследование Т-системы иммунитета.

Исследование В-системы иммунитета.

Рациональным считается исследование иммунного статуса в несколько этапов. Вначале проводятся ориентировочные исследования для выявления значительных дефектов иммунной системы (1 уровень), затем можно провести более подробное изучение (2 уровень) основываясь на данных предыдущего исследования.

Тесты 1-го уровня:

Исследование фагоцитарной функции:

подсчет абсолютного числа фагоцитов (нейтрофилов и моноцитов);

оценка интенсивности поглощения микробов фагоцитами;

способности фагоцитирующих клеток переваривать захваченные микробы.

Исследование система комплемента:

определение гемолитической активности комплемента CH50.

Исследование Т-системы иммунитета:

подсчет общего числа лимфоцитов;

подсчет процента и абсолютного числа зрелых T-лимфоцитов (CD3) и двух основных их субпопуляций: хелперов/индукторов (CD4) и киллеров/супрессоров (CD8);

определение пролиферативного ответа на основные T-митогены (фитогемагглютинин и конканавалин A).

Исследование В-системы иммунитета:

определение концентрации иммуноглобулинов различных классов (G, A, M, E) в сыворотке крови;

определение процента и абсолютного количества B-лимфоцитов (CD19, СD20) в периферической крови.

Тесты 2-го уровня:

Исследование фагоцитарной функции:

оценка интенсивности хемотаксиса фагоцитов;

определение экспрессии молекул адгезии (CD11a, CD11b, CD11c, CD18) на поверхностной мембране нейтрофилов.

Исследование Т-системы иммунитета:

исследование продукции цитокинов (интерлейкина-2, (ИЛ-2 или IL-2), ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, гамма-интерферона (INF-γ), фактора некроза опухоли (ФНО или TNF-α) );

определение активационных молекул на поверхностной мембране T-лимфоцитов (CD25, HLA-DR);

выявление молекул адгезии (CD11a, CD18);

исследование пролиферативного ответа на специфические антигены, чаще всего на дифтерийный и столбнячный анатоксины;

проведение аллергической реакции с помощью кожных тестов с рядом микробных антигенов.

Исследование В-системы иммунитета:

субклассов иммуноглобулинов, особенно IgG;

секреторного IgA;

исследование соотношения κ (каппа) и λ (лямбда) цепей иммуноглобулинов;

определение специфических антител к белковым и полисахаридным антигенам;

исследование способности лимфоцитов к пролиферативному ответу на B- (стафилококк, липополисахарид энтеробактерий) и T-B- (митоген лаконоса) митогены.

МЕТОДЫ ИЗУЧЕНИЯ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ВЫДЕЛЕНИЕ ЛИМФОЦИТОВ

Основные методы оценки Т- и В-систем иммунитета связаны с определением количества и функциональной активности Т- и В-лимфоцитов. В связи с этим важной процедурой подготовительного этапа является выделение чистой суспензии лимфоцитов периферической крови.

К числу наиболее употребительных относится метод выделения клеток на градиенте плотности фиколлпака. Смешивая фиколл и пак в определенной пропорции, получают раствор, имеющий плотность 1.077 г/см. Центрифугируя периферическую кровь после наслаивания на градиент, удается разделить клетки, имеющие плотность ниже (лимфоциты, моноциты) и выше (эритроциты. гранулоциты), чем 1.077 г/см.

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Моноциты выделяли из побочных продуктов приготовления консервов крови – лейкоцитной пленки. Лейкоцитную пленку разводили буфером PBS, содержащим Ca2+ и Mg2+ (Biochrom) в соотношении 1:1. Полученную суспензию (35 мл) наслаивали на 15 мл фикола плотности 1.077 (Biochrom) в пробирке LeucosepTM (Greiner). Образцы центрифугировали 30 мин (Backman Coulter) при 650xg. Мононуклеарную фракцию собирали с интерфазы фикол/сыворотка, переносили в свежие пробирки и два раза отмывали буфером PBS. Во время первого центрифугирования готовили непрерывный градиент на основе перкола (PercollTM GE Healthcare). Полученную смесь помещали в 50 мл пробирку и центрифугировали при 12000xg в течение 10 мин при 200С с отключенными тормозами в роторе F34-6-38 (Eppendorf). Отмытые клетки (5-8x108) ресуспендировали в 5 мл PBS и наносили на полученный градиент. Градиенты центрифугировали при 650xg в течение 30 мин при 200С с отключенными тормозами. В результате центрифугирования популяция клеток разделялась на две фракции. Фракция, находившаяся в верхней части градиента содержала клеточную суспензию обогащенную моноцитами до 60-80%. Эту фракцию собирали, и 3 раза отмывали буфером PBS. Полученная клеточная популяция была использована для некоторых экспериментов напрямую. При необходимости получения популяций клеток, содержащих более 90% моноцитов, обогащенная моноцитами фракция, использовалась для магнитной сортировки CD14+ клеток при помощи набора для выделения моноцитов (Miltenyi Biotech). Полученная таким образом клеточная популяция содержала 92-95% моноцитов, что контролировалось при помощи анализа поверхностной экспрессии маркера моноцитов CD14. Макрофаги культивировали в концентрации 1x106 клеток/мл в бессывороточной среде X-VIVO 10TM (Cambrex), содержащей цитокины.

Для получения кДНК использовались наборы для синтеза кДНК фирмы Invitrogen, содержащие обратную транскриптазу SuperScript II или SuperScript III. Применение этих наборов позволяло получать достаточное количество кДНК при использовании 100 нг тотальной РНК. Синтез проводился в строгом соответствии с рекомендациями производителя. Полимеразная цепная реакция проводилась с использованием коммерческих реагентов для определения цитокинов CCL18, IL-1, IL-1ra, ФНО. Олигонуклеотиды для определения GAPD- гена, использовавшегося для нормализации полученных данных, представлены в Приложении Б. Для постановки реакция использовали готовую реакционную смесь фирмы AppliedBiosystems(Darmstadt, Germany). Концентрацию цитокинов в культуральной среде определяли при помощи наборов для ELISAфирмы R&Dsystems(Wiesbaden, Germany).

Иммунные заболевания

аллергия (от гр. allos– другой, ergon – действие) – необычная (повышенная) чувствительность организма к воздействию некоторых факторов окружающей среды (химических веществ, микробов и продуктов их жизнедеятельности, пищевых продуктов и т. д.). Такие факторы (вещества) получили название аллергенов.

Симптомы заболевания очень разнообразны и индивидуальны, но наиболее часто встречаются следующие: зуд, сыпь, отеки, насморк и кашель, расстройство желудочно-кишечного тракта.

Причины. Основной причиной возникновения аллергии является ослабленная иммунная система, в результате чего возникает повышенная чувствительность организма к разнообразным внешним факторам. Существует (условно) несколько групп аллергенов: бытовые аллергены (бытовая пыль, шерсть домашних животных, красители, стиральные порошки, косметические и парфюмерные средства), пищевые аллергены (продукты питания, овощи, фрукты, различные пищевые добавки), лекарственные препараты, промышленные аллергены (различные красители, хром, никель, свинец, скипидар, минеральные масла, формалин и др.).

Ангина (от лат. angina, angere – душить) Симптомы. Боли при глотании, недомогание, повышение температуры тела, затрудненное дыхание.

Причины. Ангина – заболевание инфекционное. Источником инфекции могут быть гнойные заболевания носа и его придаточных пазух, кариозные зубы. Возбудителями инфекции чаще всего являются стафилококки, стрептококки, пневмококки. Холодная, дождливая погода, сквозняки или интенсивное курение могут также спровоцировать воспаление слизистых оболочек горла.

Болезнь Крона Симптомы. Хроническая диарея, боли в верхней и нижней части живота, повышение температуры, плохое всасывание, снижение работоспособности, аппетита и веса. Причины. До сих пор остаются неясными. Бронхиальная астма Волчанка Гепатит А

«Иммунные» факторы и повреждения тканей

В основе всех полиморфных клинических проявлений аллергии лежит иммунологический механизм.

Различают два вида иммунных факторов. Одни факторы находятся в жидких средах организма и представляют собой протеины из группы гамма-глобулинов (антитела). Эти антитела специфически соединяются с антигеном и образуют комплекс антиген — антитело. Антиген может быть в растворенном или взвешенном состоянии или в виде клеток.

Все аллергические реакции, в основе которых лежит иммунный механизм с циркулирующими (гуморальными) антителами, многие исследователи относят к разделу гуморальной аллергии. Все тканевые повреждения, в основе которых лежит такой тип иммунной реакции, являются обратимыми и исчезают в течение, нескольких часов, поэтому их называют реакциями, немедленного типа. Существует большая группа аллергических реакций, в основе которых лежит иммунный механизм другого типа. Эти аллергические реакции протекают без участия гуморальных антител. Они характеризуются также высокой специфичностью. Предполагают, что иммунный фактор (эквивалент антител) фиксирован на поверхности некоторых клеток, которые являются обязательными участниками этих реакций.

Рассмотренная выше группа аллергических реакций отличается от предыдущей тем, что тканевые изменения вследствие воздействия специфического антигена на сенсибилизированные ткани развиваются медленно; они появляются.....спустя 8—12 часов после введения аллергена и достигают максимума через сутки или позже.

Воспалительный процесс при этих аллергических реакциях протекает медленно и так же медленно подвергается обратному развитию в течение нескольких недель. Все вышеизложенное позволяет отнести этот тип иммунных реакций к аллергическим реакциям замедленного типа

Иммунодефициты (ИДС) — нарушения иммунологической реактивности, обусловленные выпадением одного или нескольких компонентов иммунного аппарата или тесно взаимодействующих с ним неспецифических факторов.

Единой классификации не существует. По происхождению иммунодефициты делят на первичные и вторичные. Первичные иммунодефициты

[править]Определение и классификация

Первичные иммунодефициты — это врожденные (генетические или эмбриопатии) дефекты иммунной системы. В зависимости от уровня нарушений и локализации дефекта они бывают:

гуморальные или антительные — с преимущественным поражением системы В-лимфоцитов)

Х-сцепленная агаммаглобулинемия (болезнь Брутона)

Гипер-IgM синдром

Х-сцепленная

аутосомно-рецессивна