32.Качественная и количественная оценка серологических реакций

Серологическими называют такие реакции, для постановки которых используют сыворотку,содержащую антитела.

Серологические реакции применяют: а) для идентификации микроорганизмов, токсинов, любого другого антигена с помощью известного антитела; б) для определения природы антитела в сыворотке крови с помощью известного антигена.Основными серологическими реакциями являются реакции агглют-ии, прецип-ии, связывания комплемента, иммунофлюоресценции, нейтрализации вирусов на культурах клеток, куриных эмбрионах и животных, реакция торможения гемагглютинации.Общие закономерности серологических реакций: 1) реакции ставятся in vitro; 2) проявляются при иммунологическом соответствии антигена и антитела, в оптимальных температурных условиях и рН среды; 3) протекают в две фазы: а) взаимодействие антигена с антителом, или специфическая фаза; б) образование видимого невооруженным глазом иммунного комплекса антитело–антиген, или неспецифическая фаза.ТИТР ДИАГН-Х СЫВ-ОК – наиб-ее разведение иммунной сыв-ки, при котором с помощью определенной серологической реакции выявляются специфические антитела.Диагностический титр - титр антител сыворотки крови к антигену (инфекционному агенту) серологической реакции определенного типа.Авидность-- характеристика общей стабильности комплекса антигена и антитела. Молекула антигена имеет несколько участков, с которыми связываются антитела – эпитопов. Прочность связи с одним из этих участков характеризуется свойством аффинности. А под авидностью подразумевают связь с несколькими участками.

36.Реакции нейтрализации токсина антитоксической сывороткой.

Идентифицировать вирус по характеру его действия на монослой культуры клеток, которые он разрушает или вызывает в них разного рода структурные изменения, очень трудно, и поэтому прибегают к постановке реакции нейтрализации (РН) вирусов заведомо известными вируснейтрализующими сыворотками. С этой целью полученный от больного вирус накапливают в культуре клеток и различные его разведения смешивают с неразведенной противовирусной сывороткой или, наоборот, постоянную дозу вируса добавляют к различным разведениям иммунной сыворотки. Смеси инкубируют в термостате при температуре 37 °С в течение 1–2 ч. После этого смесями вируса и сыворотки заражают культуру клеток и о нейтрализующей силе ее антител судят по отсутствию цитопатического действия на клетки Смесью вирусов и сывороток можно заражать куриные эмбрионы или чувствительных животных. В таких случаях нейтрализующую активность антител определяют по предотвращению развития патологических изменений на хорионаллантоисной оболочке; нейтрализации вирусных гемагглютининов в жидкостях эмбриона, устранению летального действия вируса на животныхПодобным образом с помощью РН идентифицируются вирусы, выделенные из материала больных при заражении им куриных эмбрионов и животных В таких случаях к вируснейтрализующим сывороткам прибавляют вируссодержащие жидкости эмбрионов и взвеси пораженных органов животных После определенного времени инкубации смесями инфицируют культуры клеток, куриные эмбрионы и животных.В серодиагностике вирусных инфекций РН определяют вирус–нейтрализующие антитела в сыворотке больных по известному вирусу. Ставят ее в динамике с парными сыворотками, одну из которых берут в разгаре заболевания, а вторую – спустя 2–3 недели, и по четырехкратному нарастанию титра антител в этой последней подтверждают диагноз.